詳細(xì)介紹
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號 |
心臟組織 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 梭形、多角形 | YS-01X7267 |
細(xì)胞簡介:
小鼠心肌分離自心臟組織;心臟是脊椎動物身體中最重要的一個(gè)器官,主要功能是為血液流動提供壓力,把血液運(yùn)行至身體各個(gè)部分。心臟由心肌構(gòu)成,左心房、左心室、右心房、右心室四個(gè)腔組成。左右心房之間和左右心室之間均由間隔隔開,故互不相通,心房與心室之間有瓣膜(房室瓣),這些瓣膜使血液只能由心房流入心室,而不能倒流。心臟的作用是推動血液流動,向器官、組織提供充足的血流量,以供應(yīng)氧和各種營養(yǎng)物質(zhì),并帶走代謝的終產(chǎn)物(如二氧化碳、無機(jī)鹽、尿素和尿酸等),使細(xì)胞維持正常的代謝和功能。心肌細(xì)胞呈菱形、多邊形等不規(guī)則形狀;細(xì)胞培養(yǎng)2h后開始貼壁,呈梭形;到12h左右,細(xì)胞開始伸出偽足,呈菱形、多角形;分離培養(yǎng)48h以后,大部分伸出偽足、呈巴掌狀,部分心肌細(xì)胞會出現(xiàn)搏動;心肌細(xì)胞為終末分化細(xì)胞,在體外不增殖。體外培養(yǎng)的心肌細(xì)胞可保持結(jié)構(gòu)及功能上的某些特點(diǎn),并具有自發(fā)性節(jié)律搏動,且心肌細(xì)胞的培養(yǎng)具有簡便、定量、重復(fù)性好以及不受神經(jīng)體液因素的影響等特點(diǎn)。利用培養(yǎng)的心肌細(xì)胞在探索非血液動力學(xué)因素所致的心肌肥厚的調(diào)節(jié),研究心肌細(xì)胞的生物力學(xué)、凋亡、受體下調(diào)、缺血預(yù)處理、信號通路、對作用于心臟的新藥進(jìn)行篩選并對其安全性進(jìn)行評價(jià)以及從培養(yǎng)的心肌細(xì)胞中提取有價(jià)值的生物因子等方面具有廣闊的應(yīng)用前景,對于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。
方法簡介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠心肌采用膠原酶-聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法,并用化學(xué)試劑抑制法篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠心肌經(jīng)α-Sarcometric actin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
包被條件 PLL(0.1mg/ml)
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 梭形、多角形
傳代特性 屬于終末分化細(xì)胞;屬于不增殖細(xì)胞群
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細(xì)胞傳代及凍存:
細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠髓過氧化物酶試劑盒 小鼠髓過氧化物酶試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠髓過氧化物酶試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠髓過氧化物酶試劑盒、小鼠髓過氧化物酶eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
小鼠透明質(zhì)酸試劑盒 小鼠透明質(zhì)酸試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠透明質(zhì)酸試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠透明質(zhì)酸試劑盒、小鼠透明質(zhì)酸eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
小鼠脫氫表雄試劑盒 小鼠脫氫表雄試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠脫氫表雄試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠脫氫表雄試劑盒、小鼠脫氫表雄eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
小鼠戊糖素試劑盒 小鼠戊糖素試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠戊糖素試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠戊糖素試劑盒、小鼠戊糖素eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
小鼠糖化血紅蛋白A1c(A1c)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat cyclic guanosine monophosphate (cGMP) ELISA Kit 大鼠環(huán)0酸鳥苷(cGMP)試劑盒
Humanoctameranscriptionfactor2B,OTF2BELISAKit 人八聚體轉(zhuǎn)錄因子(OTF2B)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Chickenβ-lactamase試劑盒雞β內(nèi)酰胺酶(β-lactamase)試劑盒規(guī)格:96T/48T
載玻片細(xì)胞βAMYLOID蛋白表達(dá)熒光顯微鏡試劑盒10/20次
MouseEotaxin1ELISAKit小鼠嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白Eotaxin1(Eotaxin1/CCL11)試劑盒規(guī)格:96T/48T
AF750標(biāo)記的晚期糖基化終末產(chǎn)物特異性受體抗體
半乳糖凝集素3抗體
PDGFRA重組人 PDGFRa / CD140a 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
原A(PGA)重組蛋白 Recombinant Pepsinogen A (PGA)
GH1重組人 GH1 / Growth hormone 1 蛋白 Protein
CHIT1 Protein Human 重組人 Chitotriosidase / Chitinase 1 / CHIT1 蛋白
HA Protein H1N1 重組甲型流感 H1N1 (A/New Caledonia/20/1999) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白
原A(PGA)重組蛋白 Recombinant Pepsinogen A (PGA)
CHIT1 Protein Human 重組人 Chitotriosidase / Chitinase 1 / CHIT1 蛋白
PDGFRA重組人 PDGFRa / CD140a 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
HA Protein H1N1 重組甲型流感 H1N1 (A/New Caledonia/20/1999) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白
GH1重組人 GH1 / Growth hormone 1 蛋白 Protein
小鼠心肌細(xì)胞大鼠蛋白激酶Cε(PKCε)試劑盒 ,英文名: PKCε ELISA Kit
N- acetyl beta -D- Glucosaminidase (NAG) ELISA Kit 人N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)試劑盒
RatIerleukin16,IL-16ELISAKIT 大鼠白介素16(IL-16)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforCXCR3ELISAKit大鼠CXC趨化因子受體3
細(xì)胞色素P450亞酶CYP3A(END)活性比色法定量試劑盒20次
RatFactor-relatedApoptosis,FASELISAKit大鼠凋亡相關(guān)因子(FAS/CD95)試劑盒規(guī)格:96T/48T
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂?。?/p>
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗(yàn);
4、長期培養(yǎng)時(shí),淋巴細(xì)胞中要加入生長因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長;
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行