詳細(xì)介紹
本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,不直接用于食品、藥品、臨床或動(dòng)物的診斷或治療!
產(chǎn)品名稱:兔小腸Cajal間質(zhì)細(xì)胞
組織來源:小腸
產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基:含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細(xì)胞形態(tài):成纖維細(xì)胞樣
傳代特性:不建議傳代
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
兔小腸Cajal間質(zhì)體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細(xì)胞簡介:
兔小腸Cajal間質(zhì)分離自小腸組織;小腸位于腹中,上端接幽門與胃相通,下端通過闌門與大腸相連,是食物消化吸收的主要場所。小腸盤曲于腹腔內(nèi),上連胃幽門,下接盲腸,分為十二指腸、空腸和回腸三部分。小腸內(nèi)消化是至關(guān)重要的,因?yàn)槭澄锝?jīng)過小腸內(nèi)胰液、膽汁和小腸液的化學(xué)性消化及小腸運(yùn)動(dòng)的機(jī)械性消化后,基本上完成了消化過程,同時(shí)營養(yǎng)物質(zhì)被小腸粘膜吸收了。小腸管壁由粘膜、粘膜下層、肌層和漿膜構(gòu)成。其結(jié)構(gòu)特點(diǎn)是管壁有環(huán)形皺襞,粘膜有許多絨毛,絨毛根部的上皮下陷至固有層,形成管狀的腸腺,其開口位于絨毛根部之間。絨毛和腸腺與小腸的消化和吸收功能關(guān)系密切;構(gòu)成腸腺的細(xì)胞有柱狀細(xì)胞、杯狀細(xì)胞、潘氏細(xì)胞和未分化細(xì)胞。柱狀細(xì)胞和內(nèi)分泌細(xì)胞與絨毛上皮相似,接近絨毛的柱狀細(xì)胞與吸收細(xì)胞相似,絨毛深部的柱狀細(xì)胞微絨毛少而短,不形成紋狀緣。Cajal間質(zhì)細(xì)胞(ICC)是一類主要分布于胃腸道的間質(zhì)細(xì)胞,是胃腸道的起搏細(xì)胞和信號(hào)傳導(dǎo)細(xì)胞,與肌細(xì)胞以及末梢神經(jīng)元有著緊密的關(guān)系,具有激發(fā)和促進(jìn)胃腸蠕動(dòng)的作用。借助于電子顯微鏡技術(shù),清楚觀察到了ICC位置分布和內(nèi)部精細(xì)結(jié)構(gòu);應(yīng)用免疫熒光等生化技術(shù),發(fā)現(xiàn)了其特殊表達(dá)的c-kit蛋白;利用電生理技術(shù),得知多種胃腸動(dòng)力障礙疾病也與其異常有關(guān)。多年來,學(xué)者逐漸在胃腸道、膽道、膀胱、子宮等部位發(fā)現(xiàn)了ICC的蹤跡,并試圖闡述其與某些疾病的發(fā)生機(jī)制。
方法簡介:
實(shí)驗(yàn)室分離的兔小腸Cajal間質(zhì)采用膠原酶消化法結(jié)合組織貼塊法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
實(shí)驗(yàn)室分離的兔小腸Cajal間質(zhì)經(jīng)c-kit免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)步驟:
一、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中),培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
二、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a)、對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞,脫落后吸出,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液,將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b)、對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄上清液,補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
收到細(xì)胞如何處理?
1、首先,觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有,請(qǐng)拍照,并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù))。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題,部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí),以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸浮)、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細(xì)胞:若細(xì)胞生長密度超過80%,可正常傳代;若未超過80%,移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細(xì)胞:將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時(shí),若細(xì)胞密度超過80%,可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml;若細(xì)胞密度未超過80%,將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作
公司正在出售的產(chǎn)品:
兔內(nèi)皮素
-1(rabbit ET-1) 作用: ELISA 試劑盒 組裝/原裝
兔降解產(chǎn)物(rabbit FDP) 作用: ELISA 試劑盒 組裝/原裝
兔促卵泡素(rabbit FSH) 作用: ELISA 試劑盒 組裝/原裝
兔堿性成纖維生長因子(rabbit b-FGF/FGF-2) 作用: ELISA 試劑盒 組裝/原裝
ADP核糖基化樣因子8B抗體
凋亡相關(guān)蛋白4抗體
DLL4重組小鼠 DLL4 / Delta4 蛋白 Protein
CC16(Clara cell protein 16 0.5mgCC16(Clara cell protein 16) peptide 克拉拉細(xì)胞蛋白(Clara細(xì)胞分泌蛋白)抗原
NGFR重組人 NGFR/ P75 蛋白 Protein
HK3 Protein Human 重組人 Hexokinase-3 / HK3 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)
IL17RA Protein Rat 重組大鼠 IL17RA / IL17R 蛋白 僀?僀
CC16(Clara cell protein 16 0.5mgCC16(Clara cell protein 16) peptide 克拉拉細(xì)胞蛋白(Clara細(xì)胞分泌蛋白)抗原
HK3 Protein Human 重組人 Hexokinase-3 / HK3 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)
DLL4重組小鼠 DLL4 / Delta4 蛋白 Protein
IL17RA Protein Rat 重組大鼠 IL17RA / IL17R 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
NGFR重組人 NGFR/ P75 蛋白 Protein
小鼠NOD樣受體-2(NOD-2)pcr檢測試劑盒
Rat hyaluronic acid (HA) ELISA Kit 大鼠透明質(zhì)酸(HA)試劑盒
HumanCoisolELISAKit 人(Coisol)pcr檢測試劑盒分裝
HumanCollagenaoaibody,CLA試劑盒人抗膠原蛋白抗體(CLA)試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織3-羥-3-甲戊二酰(HMG-COA)還原酶比色法定量試劑盒20次
Humaecombinationactivatinggene2,RAG-2ELISAKit人重組激活基因2(RAG-2)試劑盒規(guī)格:96T/48T
兔小腸Cajal間質(zhì)細(xì)胞大鼠乳酸脫氫酶A(LDHA)試劑盒 ,英文名: LDHA ELISA Kit
Mouse angiotensin I (Ang- I) ELISA Kit 小鼠血管緊張素Ⅰ(Ang-Ⅰ)試劑盒
RatChorionicGonadoophinβ,β-CGELISAKit 大鼠絨毛膜β(β-CG)pcr檢測試劑盒分裝
CLIAKitforGzms-B(HumangranzymesB)ELISAKit人顆粒酶B
細(xì)胞同酸激酶(PK)總活性比色法定量試劑盒20次
RatUrokinase-typePlasminogenActivatorReceptor,PLAUR/uPARELISAKit大鼠型纖溶酶原激活物受體(PLAUR/uPAR)試劑盒規(guī)格:96T/48T