化工儀器網(wǎng)
詳細介紹
商品屬性：
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
視網(wǎng)膜組織 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 神經(jīng)元細胞樣 | YS-01X7391 |
細胞簡介：
小鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)分離自視網(wǎng)膜組織；視網(wǎng)膜居于眼球壁的內(nèi)層，是一層透明的薄膜。視網(wǎng)膜由色素上皮層和視網(wǎng)膜感覺層組成，兩層間在病理情況下可分開，稱為視網(wǎng)膜脫離。色素上皮層與脈絡膜緊密相連，由色素上皮細胞組成，它們具有支持和營養(yǎng)光感受器細胞、遮光、散熱以及再生和修復等作用。組織學上視網(wǎng)膜分為10層，由外向內(nèi)分別為：色素上皮層、視錐、視桿細胞層、外界膜、外顆粒層、外叢狀層、內(nèi)顆粒層、內(nèi)叢狀層、神經(jīng)節(jié)細胞層、神經(jīng)纖維層、內(nèi)界膜。視網(wǎng)膜內(nèi)層為襯于血管膜內(nèi)面的一層薄膜，有感光作用；后部鼻側有一視神經(jīng)乳頭。視網(wǎng)膜上的感覺層是由三個神經(jīng)元組成。神經(jīng)元是視細胞層，專司感光，它包括錐細胞和桿細胞。視桿細胞主要在離中心凹較遠的視網(wǎng)膜上，而視錐細胞則在中心凹處最多。層叫雙節(jié)細胞，約有10到數(shù)百個視細胞通過雙節(jié)細胞與一個神經(jīng)節(jié)細胞相聯(lián)系，負責聯(lián)絡作用。第三層叫節(jié)細胞層，專管傳導。視網(wǎng)膜是一層菲薄的但又非常復雜的結構，它貼于眼球的后壁部，傳遞來自視網(wǎng)膜感受器沖動的神經(jīng)纖維跨越視網(wǎng)膜表面，經(jīng)由視神經(jīng)到達出口。視網(wǎng)膜的分辨力是不均勻的，在黃斑區(qū)，其分辨能力。視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞貼壁后呈單層排列，部分細胞聚集成團，細胞呈圓形或橢圓形，核圓且相對透明，有些細胞膜上伸出短而小的突起；該細胞為高度分化細胞，在體外屬于不增殖群。視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞是青光眼病理性損害的主要細胞，視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞的死亡可導致視功能逆損傷，研究視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞損害的細胞學和分子生物學機制有利于青光眼發(fā)病機制的研究。
方法簡介：
公司實驗室分離的小鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)采用-膠原酶聯(lián)合消化法，結合視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)和化學試劑抑制法篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測：
公司實驗室分離的小鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)經(jīng)CD90免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
包被條件 PLL（0.1mg/ml）
培養(yǎng)基 含B-27 Supplement、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 神經(jīng)元細胞樣
傳代特性 屬于終末分化細胞；屬于不增殖細胞群
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞傳代及凍存：
| 細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
| 如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
小鼠正常T細胞表達和分泌因子(RAES/CCL5)試劑盒 96T/48T
小鼠粘蛋白/粘液素5AC(MUC5AC)試劑盒 96T/48T
小鼠載脂蛋白H(Apo-H)試劑盒 96T/48T
小鼠載脂蛋白E(Apo-E)試劑盒 96T/48T
小鼠血小板衍生生長因子可溶性受體α(PDGFsR-α)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human exactable nuclear aigen (ENA) ELISA Kit 人可提取核抗原(ENA)試劑盒
Humannicotinamideadeninedinucleotidephosphate,NADPHELISAKit 人腺嘌呤二核苷酸0酸(NADPH)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitfor(PINP)ELISAKit大鼠Ⅰ型前膠原N端前肽
飲料糖精(saccharin)含量紫外光譜法定量試劑盒20次
MouseIschemiaModifiedAlbumin,IMAELISAKit小鼠缺血修飾白蛋白(IMA)試劑盒規(guī)格：96T/48T
白介素22受體抗體
Rabbit Anti-Acetyl-Histone H3 (Lys9) antibody
CD3D & CD3E重組食蟹猴 CD3D & CD3E Heterodimer 蛋白 Protein
Matriptase 蛋白裂解酶(一種新的癌基因 0.5mgMatriptase 蛋白裂解酶(一種新的癌基因)抗原
CD19重組人 CD19 / Leu-12 蛋白 Protein
CD28 Protein Human 重組人 CD28 / TP44 蛋白
BDNF Protein Mouse 重組小鼠 / 人 BDNF 蛋白
Matriptase 蛋白裂解酶(一種新的癌基因 0.5mgMatriptase 蛋白裂解酶(一種新的癌基因)抗原
CD28 Protein Human 重組人 CD28 / TP44 蛋白
CD3D & CD3E重組食蟹猴 CD3D & CD3E Heterodimer 蛋白 Protein
BDNF Protein Mouse 重組小鼠 / 人 BDNF 蛋白
CD19重組人 CD19 / Leu-12 蛋白 Protein
小鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞大鼠毒蕈堿型乙酰受體(M-AChR)試劑盒 ，英文名： M-AChR ELISA Kit
Porcine growth hormone releasing peptide (GHRP) ELISA Kit 豬生長激素釋放多肽(GHRP)試劑盒
植物源性成分(RBCL)核酸試劑盒 48T
CLIAKitforLTB4(MouseLeukoieneB4)ELISAKit小鼠白三烯B4
體液總脂肪酶(lipase)活性比色法定量試劑盒20次
ELISAKitHSP-70雞熱休克蛋白70
原代細胞的培養(yǎng)條件：
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細胞要通過充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2、細胞接種時濃度要稍大一些，至少為5×108細胞/L；
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落，漂?。?/p>
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應將原代細胞換液；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時，應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞；
2、短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行；
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi)，進行分瓶試驗；
4、長期培養(yǎng)時，淋巴細胞中要加入生長因子，白血病細胞中要加入少量的原患者血清，以利細胞生長；
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行
化工儀器網(wǎng)