詳細(xì)介紹
本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療!
產(chǎn)品名稱:小鼠腎小球系膜細(xì)胞
組織來源:腎組織
產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息:
包被條件 PLL(0.1mg/ml)
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 梭形、多角形
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細(xì)胞簡介:
小鼠腎小球系膜分離自腎小球組織;腎小球是腎元中的用于將血液過濾生成原尿的一團毛細(xì)血叢,被鮑氏囊所包裹,是尿液形成的重要構(gòu)造。血液經(jīng)由入球小動脈進(jìn)入腎小球。腎小球內(nèi)的微血管不像其他微血管,匯流入靜脈,而是流入出球小動脈。在腎小球內(nèi),微血管受到高壓,而加速了超濾作用(hyperfiltration)的進(jìn)行。微血管中的血液經(jīng)由超濾作用之后,形成濾液,滲入鮑氏囊內(nèi)。腎小球與鮑氏囊合稱為腎小體,腎小球的過濾速率便稱為腎小球過濾率。腎小球系膜是位于腎小球毛細(xì)血管袢之間的一種特殊間充質(zhì),由系膜細(xì)胞和系膜基質(zhì)組成。腎小球系膜細(xì)胞是腎小球內(nèi)非?;钴S的細(xì)胞,具有分泌細(xì)胞基質(zhì)、產(chǎn)生細(xì)胞因子、吞噬和清除大分子物質(zhì)及類似平滑肌細(xì)胞收縮的功能。腎小球系膜細(xì)胞增生和基質(zhì)的過多產(chǎn)生是多種腎小球腎炎的主要病理表現(xiàn)。腎小球系膜細(xì)胞的培養(yǎng)是研究系膜擴張、瘢痕形成和腎小球硬化的理想方法。系膜細(xì)胞的主要作用可能有:①收縮作用,入球小動脈和出球動脈的收縮作用受系膜細(xì)胞的調(diào)節(jié),以影響毛細(xì)血管袢的內(nèi)壓和濾過率;②支持作用,它填充于毛細(xì)血管袢之間,支持毛細(xì)血管的位置;③吞噬作用,能吞噬被阻留在基膜內(nèi)的大分子物質(zhì)和蛋白質(zhì);④分泌腎素,在腎缺血或免疫復(fù)合物沉積時,系膜細(xì)胞增生且分泌腎素。
方法簡介:
公司實驗室分離的小鼠腎小球系膜采用機械研磨法結(jié)合不同孔徑不銹鋼網(wǎng)篩過濾后使用膠原酶消化制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實驗室分離的小鼠腎小球系膜經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)步驟:
一、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中),培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
二、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a)、對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞,脫落后吸出,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補加培養(yǎng)液,將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b)、對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄上清液,補加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
收到細(xì)胞如何處理?
1、首先,觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有,請拍照,并及時與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù))。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運輸問題,部分貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時,以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸?。?、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細(xì)胞:若細(xì)胞生長密度超過80%,可正常傳代;若未超過80%,移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細(xì)胞:將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時,若細(xì)胞密度超過80%,可將細(xì)胞懸液分至2個細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),補加培養(yǎng)基至5ml;若細(xì)胞密度未超過80%,將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時再進(jìn)行傳代操作
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠血紅素氧合酶2(HO-2)試劑盒 96T/48T
小鼠血紅素氧合酶1(HO-1)試劑盒 96T/48T
小鼠血管性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子(vWF)試劑盒 96T/48T
小鼠血管舒緩激肽(BK)試劑盒 96T/48T
小鼠新生甲狀腺素(NN-T4)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat ulasensitive thyroid stimulating hormone (U-TSH) ELISA Kit 大鼠高靈敏度促甲狀腺激素(U-TSH)試劑盒
HumanAspaateaminoansferase,ASTELISAKit 人天門冬氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
ChickenAi-ThrombinⅢ,AT-Ⅲ試劑盒雞抗Ⅲ抗體(AT-Ⅲ)試劑盒規(guī)格:96T/48T
載玻片細(xì)胞BAD蛋白表達(dá)熒光顯微鏡試劑盒10/20次
MouseHistamine,HISELISAKit小鼠組胺(HIS)試劑盒規(guī)格:96T/48T
TRIM9蛋白抗體
p21激活激酶2抗體
HA重組甲型流感 H6N8 (A/mallard/Ohio/217/1998) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein
PAP2c (Phosphatidic acid phosphatase 2c 0.5mgPAP2c (Phosphatidic acid phosphatase 2c) 0脂酸0酸酶2C(抗原)
METTL1重組人 METTL1 蛋白 Protein
CD81 Protein Human 重組人 CD81 / TAPA-1 蛋白
APP Protein Human 重組人 APP / Protease nexin-II 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
PAP2c (Phosphatidic acid phosphatase 2c 0.5mgPAP2c (Phosphatidic acid phosphatase 2c) 0脂酸0酸酶2C(抗原)
CD81 Protein Human 重組人 CD81 / TAPA-1 蛋白
HA重組甲型流感 H6N8 (A/mallard/Ohio/217/1998) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein
APP Protein Human 重組人 APP / Protease nexin-II 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
METTL1重組人 METTL1 蛋白 Protein
小鼠腎小球系膜細(xì)胞大鼠兒茶酚抑素(CST)試劑盒 ,英文名: CST ELISA Kit
Pigskin quality ketone / coicosterone (CO) ELISA Kit 豬皮質(zhì)酮/腎上腺酮(CO)試劑盒
魚特定基因序列(Fish)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
CLIAKitforLZM(MouseLysozyme)ELISAKit小鼠
體液總膽汁酸酶偶聯(lián)反應(yīng)比色法定量試劑盒20次
ELISAKitIGF-1雞胰島素樣生長因子1