詳細(xì)介紹
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號 |
肝 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 圓形 | YS-01X8350 |
細(xì)胞簡介:
兔肝非實質(zhì)分離自肝臟組織;肝臟是身體內(nèi)以代謝功能為主的一個器官,并在身體里面起著去氧化、儲存肝糖、分泌性蛋白質(zhì)的合成等作用;肝臟也制造消化系統(tǒng)中之膽汁。肝臟是機體內(nèi)臟里大的器官,位于機體中的腹部位置,在右側(cè)橫隔膜之下,位于膽囊之前端且于右邊腎臟的前方,胃的上方。肝臟是機體消化系統(tǒng)中大的消化腺,為一紅棕色的V字形器官。肝臟是尿素合成的主要器官,又是新陳代謝的重要器官。肝臟在機體位置和形態(tài)結(jié)構(gòu):肝臟位于右上腹,隱藏在右側(cè)膈下和肋骨深面,大部分肝為肋弓所復(fù)蓋,僅在腹上區(qū)、右肋弓間露出并直接接觸腹前壁,肝上面則與膈及腹前壁相接。肝實質(zhì)細(xì)胞具有肝功能的單位,是肝臟的基本組成單位之一。肝非實質(zhì)細(xì)胞是指除了肝實質(zhì)細(xì)胞之外的細(xì)胞,主要包含了肝竇內(nèi)皮細(xì)胞、肝星狀細(xì)胞、肝枯否細(xì)胞。
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細(xì)胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂??;
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細(xì)胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗;
4、長期培養(yǎng)時,淋巴細(xì)胞中要加入生長因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長;
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時才能進(jìn)行。
方法簡介:
實驗室分離的兔肝非實質(zhì)采用取肝臟灌流、膠原酶消化、密度梯度離心法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
實驗室分離的兔肝非實質(zhì)經(jīng)過檢測,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基:含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:懸浮
細(xì)胞形態(tài):圓形
傳代特性:不增殖;不傳代
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
兔肝非實質(zhì)體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細(xì)胞傳代及凍存:
細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
豬內(nèi)皮型合成酶3(eNOS-3)試劑盒 組裝/原裝
豬內(nèi)皮型合成酶(eNOS)試劑盒 組裝/原裝
豬內(nèi)皮素1(ET-1)試劑盒 組裝/原裝
豬免疫球蛋白M(IgM)試劑盒 組裝/原裝
DNA交聯(lián)修復(fù)基因SNM1抗體
9號染色體開放閱讀框172抗體
IL8重組人 IL-8 / CXCL8 蛋白 (aa 6-77, Fc 標(biāo)簽) Protein
Ⅻ(F12)重組蛋白 Recombinant Coagulation Factor XII (F12)
BVES重組人 BVES / POPDC1 蛋白 (GST 標(biāo)簽) Protein
ATL1 Protein Human 重組人 ATL1 / SPG3A / Atlastin-1 蛋白 (GST 標(biāo)簽)
M1 Protein H7N9 重組甲型流感 H7N9 (A/Anhui/1/2013) Matrix 僀?僀
Ⅻ(F12)重組蛋白 Recombinant Coagulation Factor XII (F12)
ATL1 Protein Human 重組人 ATL1 / SPG3A / Atlastin-1 蛋白 (GST 標(biāo)簽)
IL8重組人 IL-8 / CXCL8 蛋白 (aa 6-77, Fc 標(biāo)簽) Protein
M1 Protein H7N9 重組甲型流感 H7N9 (A/Anhui/1/2013) Matrix protein 1 / M1 蛋白 (His 標(biāo)簽)
BVES重組人 BVES / POPDC1 蛋白 (GST 標(biāo)簽) Protein
豬葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白2(GL2)ELISA 試劑盒
Human formylmethionine (fMet) ELISA Kit 人甲酰甲硫(fMet)試劑盒
guineapigmaixmetalloproteinase9,MMP-9ELISAKit 豚鼠基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP-9)試劑盒分裝
CLIAKitforANGELISAKit大鼠血管生長素
血液元素比色法定量試劑盒20次
PorcineCollageypeⅡ,ColⅡELISAKit豬Ⅱ型膠原(ColⅡ)試劑盒
兔肝非實質(zhì)細(xì)胞大鼠干擾素誘導(dǎo)蛋白10(IP-10/CXCL10)試劑盒 ,英文名: IP-10/CXCL10 ELISA Kit
Rabbit prolactin (PRL) ELISA Kit 兔子催乳素(PRL)試劑盒
溶藻弧菌(VA)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
CLIAKitforMDC/CCL22(MouseMacrophage-DerivedChemokine)ELISAKit小鼠巨噬細(xì)胞來源的趨化因子
體液前列腺型酸型性0酸酶(PACP)活性比色法定量試劑盒20次
ELISAKitsIgA牛分泌型免疫球蛋白A