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兔肺微血管平滑肌細(xì)胞

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更新時間:2024-11-05 12:35:20瀏覽次數(shù):843

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25
貨號 YS-01X8341 主要用途 僅供科研研究實驗
兔肺微血管平滑肌細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品:鋅指蛋白688抗體 胞粘蛋白4抗體 KLE (人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞) 大鼠浦肯野細(xì)胞 HS683人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞 大鼠支氣管平滑肌細(xì)胞 HCC38 (人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞) 小鼠椎間盤纖維環(huán)細(xì)胞

詳細(xì)介紹

兔肺微血管平滑肌細(xì)胞

兔肺微血管平滑肌細(xì)胞

商品屬性:

組織來源

產(chǎn)品規(guī)格

細(xì)胞形態(tài)

貨號

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

成纖維細(xì)胞樣

YS-01X8341

細(xì)胞簡介:

兔肺微血管平滑肌分離自肺組織;肺是機(jī)體的呼吸器官,位于胸腔,左右各一,覆蓋于心之上。肺有分葉,左二右三,共五葉。肺經(jīng)肺系(指氣管、支氣管等)與喉、鼻相連,故稱喉為肺之門戶,鼻為肺之外竅。肺血管平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后,可見細(xì)胞貼壁伸展,細(xì)胞形態(tài)大小不一,呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細(xì)胞匯合,多數(shù)細(xì)胞伸展呈長梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長,高低起伏;細(xì)胞密度低時,常交織成網(wǎng)狀;密度高時,則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細(xì)胞生長較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長特點(diǎn)。肺血管平滑肌細(xì)胞主要功能:①細(xì)胞表面表達(dá)介質(zhì)(ICAM-1VCAM-1)參與血管壁炎癥反應(yīng);②是多數(shù)重要動脈疾病的靶細(xì)胞。肺血管平滑肌細(xì)胞與主要病生理變化:①平滑肌增生易致肺動脈高壓;②先天性肺動脈狹窄;③肺動脈栓塞。血管平滑肌細(xì)胞的加速生長潛能是血管疾病進(jìn)展的關(guān)鍵因素,新研究表明血管平滑肌細(xì)胞表達(dá)的ICAM-1VCAM-1能促進(jìn)血管壁的炎癥反應(yīng),并且與血管疾病的發(fā)展及穩(wěn)定性有關(guān)。

方法簡介:

實驗室分離的兔肺微血管平滑肌采用混合膠原酶消化法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測:

實驗室分離的兔肺微血管平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基:含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin

換液頻率:每2-3天換液一次

生長特性:貼壁

細(xì)胞形態(tài):成纖維細(xì)胞樣

傳代特性:可傳3代左右

消化液:0.25%

培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO25%

兔肺微血管平滑肌體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。

兔肺微血管平滑肌細(xì)胞

細(xì)胞傳代及凍存:

細(xì)胞傳代步驟細(xì)胞凍存步驟
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:

  ① 組織塊培養(yǎng)法

  組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。

 ?、?消化培養(yǎng)法

 ?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

  對于懸浮生長的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

  ④器官培養(yǎng)

  器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

兔肺微血管平滑肌細(xì)胞


公司正在出售的產(chǎn)品:

抑瘤素   英文名稱:    M   英文縮寫:   OSM

骨鈣素   英文名稱:   Osteocalcin   英文縮寫:   OC

催產(chǎn)素   英文名稱:   Oxytocin   英文縮寫:   OT

氧化低密度脂蛋白   英文名稱:   oxidized low density lipoprotein   英文縮寫:   OxLDL

CTDSPL2蛋白抗體

5號染色體開放閱讀框55抗體

CTSH重組小鼠 Cathepsin H / CTSH 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

10(KLK10)重組蛋白 Recombinant Kallikrein 10 (KLK10)

TMUB2重組人 TMUB2 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

CA13 Protein Human 重組人 Carbonic Anhydrase XIII / CA13 蛋白 (His 標(biāo)簽)

CA9 Protein Canine 重組狗 Carbonic Anhydrase IX / CA9 蛋白 (His僀?僀

10(KLK10)重組蛋白 Recombinant Kallikrein 10 (KLK10)

CA13 Protein Human 重組人 Carbonic Anhydrase XIII / CA13 蛋白 (His 標(biāo)簽)

CTSH重組小鼠 Cathepsin H / CTSH 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

CA9 Protein Canine 重組狗 Carbonic Anhydrase IX / CA9 蛋白 (His 標(biāo)簽)

TMUB2重組人 TMUB2 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

魚雌二醇(E2)ELISA 試劑盒

Human rheumatoid ahritis associated nuclear aigen aibody (RANA) ELISA Kit 人抗類風(fēng)濕關(guān)節(jié)核抗原抗體(RANA)試劑盒

Humanadiponectin,ADPELISAKit 人脂聯(lián)素(ADP)試劑盒分裝

CLIAKitforADMELISAKit大鼠腎上腺髓質(zhì)素

血液乙酰酯酶活性比色法定量試劑盒20

MouseReninELISAKit小鼠腎素(Renin)試劑盒

兔肺微血管平滑肌細(xì)胞大鼠干細(xì)胞因子受體(SCFR)試劑盒 ,英文名: SCFR ELISA Kit

Rabbit follicle stimulating hormone (FSH) ELISA Kit 兔子促卵泡素(FSH)試劑盒

肉毒桿菌(A/B)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

CLIAKitforMethylase(MouseMethylase)ELISAKit小鼠甲基化酶

體液牛病毒性腹瀉病毒II(BovineViralDiarrhoeaVirus-2;BVDV-2)定性試劑盒20

ELISAKitMT牛金屬硫蛋白

原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:

  一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)

  1、細(xì)胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;

  2、細(xì)胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L;

  3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);

  4、 胎牛血清濃度為10%-80%

  5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

  6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂?。?/p>

  7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;

  8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。

  二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)

  1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細(xì)胞;

  2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;

  3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗;

  4、長期培養(yǎng)時,淋巴細(xì)胞中要加入生長因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長;

  5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;

  6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時才能進(jìn)行


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