兔表皮角化細(xì)胞

兔表皮角化細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品：小鼠腎小球上皮細(xì)胞 兔膀胱平滑肌細(xì)胞 視覺(jué)抑制蛋白抗體 人鼻粘膜上皮細(xì)胞;HNEpC 半乳糖凝集素1抗體 NPC/HK-1人鼻咽癌細(xì)胞 前列腺素E受體4相關(guān)蛋白抗體 CATH.a（小鼠神經(jīng)細(xì)胞）

本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用，不直接用于食品、藥品、臨床或動(dòng)物的診斷或治療！

產(chǎn)品名稱：兔表皮角化細(xì)胞

組織來(lái)源：皮膚

產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

培養(yǎng)信息：

包被條件：鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養(yǎng)基：含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性：貼壁

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

傳代特性：可傳1-2代

消化液：0.25%

培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%

兔表皮角化體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。

細(xì)胞簡(jiǎn)介：

兔表皮角化分離自皮膚組織；表皮位于動(dòng)物皮膚的外層，由胚胎時(shí)期外胚層形成，具有抗摩擦和抗損傷的作用。表皮是皮膚的淺層結(jié)構(gòu)，由復(fù)層扁平上皮構(gòu)成。從基底層到表面可分為五層，即基底層、棘層、顆粒層、透明層和角質(zhì)層。表皮角化細(xì)胞（KC）是構(gòu)成表皮的主要細(xì)胞成分，在體內(nèi)處于不斷增殖過(guò)程中，分裂的角化細(xì)胞主要位于其基底層，少數(shù)位于棘細(xì)胞層。隨著向表層的推移，細(xì)胞的分化程度逐漸增加，并喪失分裂活性。

方法簡(jiǎn)介：

實(shí)驗(yàn)室分離的兔表皮角化先消化、后-膠原酶混合消化法制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測(cè)：

實(shí)驗(yàn)室分離的兔表皮角化經(jīng)PCNA免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)步驟：

一、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中），培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

二、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

a）、對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。

2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。

3.輕輕吹打細(xì)胞，脫落后吸出，在1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。

4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液，將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。

b）、對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄上清液，補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。

方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
公司正在出售的產(chǎn)品：

總/氧化型（T-GSH/GSSG）含量測(cè)定試劑盒   可見分光光度法   50管/48樣

過(guò)氧化物酶（GPX）試劑盒   DTNB法   50管/48樣

過(guò)氧化物酶（GPX）試劑盒   GR法   50管/48樣

硫氧還蛋白過(guò)氧化物酶（TPX）試劑盒   紫外分光光度法   50管/48樣

豬脂蛋白α(Lp-α)ELISA 試劑盒

Human melanocyte stimulating hormone (MSH) ELISA Kit 人黑色素細(xì)胞刺激素(MSH)試劑盒

RabbitHighmobilitygroupprotein1,HMG-1ELISAKit 兔子高遷移率族蛋白1(HMG-1)試劑盒 進(jìn)口分裝

CLIAKitforapo-A1ELISAKit大鼠載脂蛋白A1

血清/血漿總膽汁酸酶連續(xù)循環(huán)比色法定量試劑盒20次

PorcineLaminin,LNELISAKit豬層連蛋白/板層素(LN)試劑盒

RALGPS1蛋白抗體

細(xì)胞表面趨化因子受體7抗體

HA重組甲型流感 H7N9 (A/Anhui/1/2013) 血凝素 (Hemagglutinin) 蛋白 (HA1+HA2, cleavage) (His 標(biāo)簽) Protein

phospho-FAK(pSer732 0.5mgphospho-FAK(pSer732)(phospho-Focal adhesion kinase) 0酸化粘著斑激酶抗原

SEMA5A重組人 Semaphorin 5A / SEMA5A 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

BTN3A3 Protein Human 重組人 BTN3A3 蛋白

CTSC Protein Human 重組人 Cathepsin C / CTSC / DPPI 蛋白 (His 標(biāo)簽)

phospho-FAK(pSer732 0.5mgphospho-FAK(pSer732)(phospho-Focal adhesion kinase) 0酸化粘著斑激酶抗原

BTN3A3 Protein Human 重組人 BTN3A3 蛋白

HA重組甲型流感 H7N9 (A/Anhui/1/2013) 血凝素 (Hemagglutinin) 蛋白 (HA1+HA2, cleavage) (His 標(biāo)簽) Protein

CTSC Protein Human 重組人 Cathepsin C / CTSC / DPPI 蛋白 (His 標(biāo)簽)

SEMA5A重組人 Semaphorin 5A / SEMA5A 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

兔表皮角化細(xì)胞大鼠β羥(βOHB)試劑盒 ，英文名： βOHB ELISA Kit

Rabbit immunoglobulin A (IgA) ELISA Kit 兔子免疫球蛋白A(IgA)試劑盒

ELISA 小鼠神經(jīng)生長(zhǎng)因子(mouse NGF)  進(jìn)口分裝

CLIAKitforIL-12/P70(HumanIerleukin12)ELISAKIT人白介素12

通用型馬鈴薯Y病毒(PotatoVirusY;PVY)試劑盒20次

ELISAKitANG-1大鼠血管生成素1

收到細(xì)胞如何處理？

1、首先，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請(qǐng)拍照，并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）。

2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題，部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí)，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸浮）、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。

4、靜置完成后，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)。

5、貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長(zhǎng)密度超過(guò)80%，可正常傳代；若未超過(guò)80%，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。

6、懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無(wú)菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時(shí)，若細(xì)胞密度超過(guò)80%，可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml；若細(xì)胞密度未超過(guò)80%，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作