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人氣管成纖維細(xì)胞

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更新時(shí)間:2024-11-05 11:16:35瀏覽次數(shù):594

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
貨號(hào) YS-01X8302 主要用途 僅供科研研究實(shí)驗(yàn)
人氣管成纖維細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品:EOMA小鼠血管內(nèi)皮瘤細(xì)胞 U266B1人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞 應(yīng)激誘導(dǎo)分泌蛋白1抗體 KiMA (人胚腎上皮細(xì)胞) TGFB1誘導(dǎo)抗凋亡因子1抗體 CHO-K1 (倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞亞株) RNA聚合酶II結(jié)合蛋白3抗體 ZSWIM5蛋白抗體

詳細(xì)介紹

人氣管成纖維細(xì)胞

人氣管成纖維細(xì)胞

商品屬性:

組織來(lái)源

產(chǎn)品規(guī)格

細(xì)胞形態(tài)

貨號(hào)

氣管

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

成纖維細(xì)胞樣

YS-01X8302

細(xì)胞簡(jiǎn)介:

人氣管成纖維分離自氣管組織;氣管(Trachea),呼吸器官的一部分;為后壁略平的圓筒型管狀。上端平第六頸椎下緣,與環(huán)狀軟骨相連;向下至第四、五胸椎體(相當(dāng)胸骨角平面)交界處,分左、右主支氣管,分叉處稱為氣管杈。氣管主要由14-16個(gè)半環(huán)狀軟骨構(gòu)成,有彈性,軟骨為“C"字形的軟骨環(huán),缺口向后,各軟骨環(huán)以韌帶連接起來(lái),環(huán)后方缺口處由平滑肌和致密結(jié)締組織連接,保持了持續(xù)張開狀態(tài)。管腔襯以粘膜,表面覆蓋纖毛上皮,粘膜分泌的粘液可粘附吸入空氣中的灰塵顆粒,纖毛不斷向咽部擺動(dòng)將粘液與灰塵排出,以凈化吸入的氣體。成纖維細(xì)胞(Fibroblast)是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分,由胚胎時(shí)期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來(lái)。成纖維細(xì)胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細(xì)胞功能活動(dòng)旺盛,細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性,具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動(dòng),在一定條件下,它可以實(shí)現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化;成纖維細(xì)胞對(duì)不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的支氣管成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養(yǎng)基中。30min細(xì)胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現(xiàn)為小的突起;6h后細(xì)胞基本貼壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長(zhǎng),不聚集成團(tuán);細(xì)胞生長(zhǎng)迅速,5-7天即呈融合狀態(tài),細(xì)胞排列緊密,有的交叉重疊生長(zhǎng),平坦、胞體較大,細(xì)胞質(zhì)透明,細(xì)胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細(xì)胞融合,并彼此連接成網(wǎng)狀;細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。氣管成纖維細(xì)胞在生理?xiàng)l件下的主要功能包括:構(gòu)造和維持組織的正常形態(tài),合成和釋放細(xì)胞外基質(zhì)以及組織損傷后及時(shí)大量聚集修復(fù)損傷組織。

方法簡(jiǎn)介:

實(shí)驗(yàn)室分離的人氣管成纖維采用膠原酶 - 聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測(cè):

實(shí)驗(yàn)室分離的人氣管成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBVHCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基:含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin

換液頻率:每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性:貼壁

細(xì)胞形態(tài):成纖維細(xì)胞樣

傳代特性:可傳3-5代左右

消化液:0.25%

培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%CO25%

人氣管成纖維體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。

人氣管成纖維細(xì)胞

細(xì)胞傳代及凍存:

細(xì)胞傳代步驟細(xì)胞凍存步驟
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:

  ① 組織塊培養(yǎng)法

  組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。

  ② 消化培養(yǎng)法

 ?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

  對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

 ?、芷鞴倥囵B(yǎng)

  器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

人氣管成纖維細(xì)胞


公司正在出售的產(chǎn)品:

兔組織因子   英文名稱:   Rabbit Tissue Factor   規(guī)格:      英文縮寫:   TF

兔組織金屬蛋白酶抑制因子1   英文名稱:   Rabbit Tissue Inhibitor of Metalloproteinases 1   規(guī)格:      英文縮寫:   TIMP-1

兔合酶   英文名稱:   Rabbit Total Niic Oxide Syhase   規(guī)格:      英文縮寫:   T-NOS

γ干擾素   英文名稱:   Rabbit γ Ierferon   規(guī)格:      英文縮寫:   IFN-γ

小鼠補(bǔ)體因子H(CFH)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human glycogen syhase kinase (GSK) ELISA Kit 人糖原合成酶激酶(GSK)試劑盒

HumanAialNaiureticPeptide,ANPELISAKit 人心肽(ANP)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanB-LymphocyteChemoatacta1,BLC-1試劑盒人B-淋巴細(xì)胞趨化因子1(BLC-1/CXCL13)試劑盒規(guī)格:96T/48T

植物總淀粉化學(xué)比色法定量試劑盒20

HumanSomelysin-2,ST2ELISAKit人基質(zhì)裂解素(ST2)試劑盒規(guī)格:96T/48T

LIM結(jié)構(gòu)域結(jié)合蛋白3抗體

/蘇蛋白激酶ATR抗體

LAYN重組大鼠 Layilin / LAYN 蛋白 Protein

CTGF (connective tissue growth factor 0.5mgCTGF (connective tissue growth factor) 結(jié)締組織生長(zhǎng)因子(多肽抗原)

CIB2重組人 CIB2 / KIP-2 蛋白 Protein

FTL Protein Human 重組人 FTL / ferritin, light polypeptide 蛋白

IL11RA Protein Mouse 重組小鼠 IL11RA / IL11Rα 蛋白

CTGF (connective tissue growth factor 0.5mgCTGF (connective tissue growth factor) 結(jié)締組織生長(zhǎng)因子(多肽抗原)

FTL Protein Human 重組人 FTL / ferritin, light polypeptide 蛋白

LAYN重組大鼠 Layilin / LAYN 蛋白 Protein

IL11RA Protein Mouse 重組小鼠 IL11RA / IL11Rα 蛋白

CIB2重組人 CIB2 / KIP-2 蛋白 Protein

人氣管成纖維細(xì)胞大鼠艾杜糖酯酶(IDS)試劑盒 ,英文名: IDS ELISA Kit

Mouse compleme fragme 3A (C3a) ELISA Kit 小鼠補(bǔ)體片斷3a(C3a)試劑盒

ELISA 小鼠M-能受體結(jié)合力(mouse MCBC)  進(jìn)口分裝

CLIAKitforIL-2(HumanIerleukin2)ELISAkit人白介素2

通用型科薩基病毒A(CoxsackievirusA)定性試劑盒20

ELISAKitTSP-1大鼠血小板反應(yīng)蛋白/敏感蛋白1

原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:

  一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)

  1、細(xì)胞要通過(guò)充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;

  2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L;

  3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);

  4、 胎牛血清濃度為10%-80%

  5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

  6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂??;

  7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;

  8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。

  二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)

  1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞;

  2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;

  3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗(yàn);

  4、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí),淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長(zhǎng);

  5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;

  6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行


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