化工儀器網(wǎng)
詳細(xì)介紹
商品屬性：
組織來(lái)源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號(hào) |
關(guān)節(jié)韌帶 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 成纖維細(xì)胞樣 | YS-01X8294 |
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
人關(guān)節(jié)韌帶成纖維分離自關(guān)節(jié)韌帶組織；韌帶是纖維結(jié)締組織，將各個(gè)骨頭在關(guān)節(jié)處連接起來(lái)，并在關(guān)節(jié)活動(dòng)時(shí)加固關(guān)節(jié)穩(wěn)定關(guān)節(jié)。其中顳下頜關(guān)節(jié)、踝關(guān) 節(jié)、膝關(guān)節(jié)韌帶組織研究較多，顳下頜關(guān)節(jié)兩側(cè)各有三條，即顳下頜韌帶、莖突下頜韌帶和蝶下頜韌帶。踝關(guān)節(jié)周圍韌帶根據(jù)其解剖位置可以分成3組，外側(cè)韌帶 ，內(nèi)側(cè)三角韌帶，脛腓聯(lián)合韌帶。膝關(guān)節(jié)的韌帶有囊外韌帶和囊內(nèi)韌帶,其共同作用為加強(qiáng)關(guān)節(jié)的穩(wěn)定性。囊外韌帶主要有:髕韌帶位于髕骨的下部，關(guān)節(jié)囊的前 方,是股四頭肌肌腱的延續(xù),向下附著于脛骨粗隆，兩側(cè)有側(cè)副韌帶加強(qiáng)；囊內(nèi)韌帶:主要為交叉韌帶:前交叉韌帶附著于脛骨髁間隆起前份和股骨外側(cè)髁的內(nèi)側(cè)面 ，防止脛骨過(guò)度前移;后交叉韌帶附著于脛骨髁間隆起后份與股骨內(nèi)側(cè)髁的外側(cè)面，防止脛骨過(guò)度后移。另外，在膝關(guān)節(jié)內(nèi)尚有膝橫韌帶。任何關(guān)節(jié)韌帶均可由于 外傷而發(fā)生損傷，但影響較大又較常見的是膝關(guān)節(jié)韌帶損傷和踝關(guān)節(jié)韌帶損傷。膝關(guān)節(jié)韌帶損傷，常見者為膝關(guān)節(jié)側(cè)副韌帶損傷。多因膝關(guān)節(jié)微屈時(shí)，突然受到 內(nèi)翻或外翻的沖擊力所致。踝關(guān)節(jié)韌帶損傷。多因行走或跑跳時(shí)誤入不平之處所致。以外側(cè)損傷多見。韌帶是致密纖維結(jié)締組織，主要特點(diǎn)是細(xì)胞、基質(zhì)成分少 ，纖維非常多、纖維粗大排列緊密，且排列方向與承受張力的方向一致，有很強(qiáng)的保護(hù)和支持作用。韌帶主要包含韌帶成纖維細(xì)胞。人關(guān)節(jié)韌帶成纖維對(duì)研究關(guān)節(jié)韌帶損傷有重要意義。
方法簡(jiǎn)介：
實(shí)驗(yàn)室分離的人關(guān)節(jié)韌帶成纖維采用 - 膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)：
實(shí)驗(yàn)室分離的人關(guān)節(jié)韌帶成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基：基礎(chǔ)培養(yǎng)基，含FBS、bFGF、Insulin、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)：成纖維細(xì)胞樣
傳代特性：可傳3代左右
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
人關(guān)節(jié)韌帶成纖維體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細(xì)胞傳代及凍存：
| 細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
| 如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。
?、?消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
豬干擾素-γ試劑盒 豬干擾素-γ試劑盒 規(guī)格型號(hào)：96T/48T 豬干擾素-γ試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：豬干擾素-γ試劑盒、豬干擾素-γeisa試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個(gè)月。
大鼠纖溶酶原激活物抑制因子試劑盒 大鼠纖溶酶原激活物抑制因子試劑盒 規(guī)格型號(hào)：96T/48T 大鼠纖溶酶原激活物抑制因子試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：大鼠纖溶酶原激活物抑制因子試劑盒、大鼠纖溶酶原激活物抑制因子eisa試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個(gè)月。
大鼠纖溶酶原激活物抑制因子1試劑盒 大鼠纖溶酶原激活物抑制因子1試劑盒 規(guī)格型號(hào)：96T/48T 大鼠纖溶酶原激活物抑制因子1試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：大鼠纖溶酶原激活物抑制因子1試劑盒、大鼠纖溶酶原激活物抑制因子1eisa試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個(gè)月。
大鼠纖溶酶原激活物抑制物試劑盒 大鼠纖溶酶原激活物抑制物試劑盒 規(guī)格型號(hào)：96T/48T 大鼠纖溶酶原激活物抑制物試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：大鼠纖溶酶原激活物抑制物試劑盒、大鼠纖溶酶原激活物抑制物eisa試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個(gè)月。
豬可溶性P選擇素(sP-Selectin)ELISA 試劑盒
Human decay accelerating factor (DAF) ELISA Kit 人降解加速因子(DAF)試劑盒
Porcinethyroopin-releasinghormone,HELISAKIT 豬促甲狀腺素釋放激素(H)試劑盒 進(jìn)口分裝
CLIAKitforAMAELISAKit大鼠抗心肌抗體
血液還原型(GSH)濃度熒光定量試劑盒50次
PlaVitaminD,VDELISAKit植物D(VD)試劑盒
G蛋白修補(bǔ)結(jié)構(gòu)域蛋白3抗體
神經(jīng)元PAS結(jié)構(gòu)域蛋白5抗體
MCPT1重組小鼠 MCPT1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
CDK2 (Cyclin-Dependent Kinase 2 0.5mgCDK2 (Cyclin-Dependent Kinase 2) 周期素依賴激酶2(抗原)
CAMK1G重組人 CAMK1G / CLICK III / CaMKIgamma 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein
APEX1 Protein Human 重組人 APEX1 / AP / APEx / Ref-1 蛋白 (His 標(biāo)簽)
SFRP2 Protein Mouse 重組小鼠 sFRP2 蛋白 (His 標(biāo)簽)
CDK2 (Cyclin-Dependent Kinase 2 0.5mgCDK2 (Cyclin-Dependent Kinase 2) 周期素依賴激酶2(抗原)
APEX1 Protein Human 重組人 APEX1 / AP / APEx / Ref-1 蛋白 (His 標(biāo)簽)
MCPT1重組小鼠 MCPT1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
SFRP2 Protein Mouse 重組小鼠 sFRP2 蛋白 (His 標(biāo)簽)
CAMK1G重組人 CAMK1G / CLICK III / CaMKIgamma 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein
人關(guān)節(jié)韌帶成纖維細(xì)胞大鼠白介素12(IL-12/P70)試劑盒 ，英文名： IL-12/P70 ELISA Kit
Rabbit thyroxine (T4) ELISA Kit 兔子甲狀腺素(T4)試劑盒
ELISA 小鼠8異前列腺素(mouse 8-iso-PG) 進(jìn)口分裝
CLIAKitforIL-29(humanIerleukin29)ELISAKit人白介素29
通用型角胡麻葉斑病嗜麥芽黃黃單胞菌(Xahomonasmaltophilia;Xm)試劑盒20次
ELISAKitPF-3大鼠血小板因子3
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件：
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過(guò)充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些，至少為5×108細(xì)胞/L；
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落，漂?。?/p>
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應(yīng)將原代細(xì)胞換液；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞；
2、短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行；
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi)，進(jìn)行分瓶試驗(yàn)；
4、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí)，淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子，白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清，以利細(xì)胞生長(zhǎng)；
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行
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