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詳細(xì)介紹
商品屬性：
組織來(lái)源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號(hào) |
前列腺 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 內(nèi)皮細(xì)胞樣 | YS-01X8255 |
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
大鼠前列腺微血管內(nèi)皮分離自前列腺組織；前列腺（Prostate）是雄性的性腺器官；前列腺是不成對(duì)的實(shí)質(zhì)性器宮，由腺組織和肌組織構(gòu)成。前列腺如栗子，底朝上，與膀胱相貼，尖朝下，抵泌尿生殖膈，前面貼恥骨聯(lián)合，后面依直腸。前列腺腺體的中間有尿道穿過(guò)，扼守著尿道上口，所以，前列腺有問(wèn)題時(shí)，排尿首先受影響。前列腺是機(jī)體非常少有的，具有內(nèi)、外雙重分泌功能的性分泌腺。作為外分泌腺，前列腺每天分泌前列腺液，是構(gòu)成精液主要成分；作為內(nèi)分泌腺，前列腺分泌的激素稱為“前列腺素"。微血管是極細(xì)微的血管，管徑平均為6-9μm，連于動(dòng)、靜脈之間，互相連接成網(wǎng)狀。微血管壁薄，管徑較小，血流很慢，通透性大。其功能是利于血液與組織之間進(jìn)行物質(zhì)交換。其管壁主要由一層內(nèi)皮細(xì)胞構(gòu)成，在內(nèi)皮外面有一薄層結(jié)締組織。另外還?？梢?jiàn)到一種扁而有突起的細(xì)胞貼在微血管的管壁外面，稱為周細(xì)胞。每一次性活動(dòng)都會(huì)造成前列腺的充血,促使微血管不斷擴(kuò)張而壓迫腺體造成淤積，體外培養(yǎng)前列腺微血管內(nèi)皮，對(duì)于研究前列腺炎癥，炎癥發(fā)生機(jī)理有重要的意義。
方法簡(jiǎn)介：
實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠前列腺微血管內(nèi)皮采用膠原酶 - 混合消化法結(jié)合密度梯度離心法，最后通過(guò)內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)：
實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠前列腺微血管內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基：基礎(chǔ)培養(yǎng)基，含FBS、EGF、bFGF、IGF、VEGF、Heparin、Hydrocortisone、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)：內(nèi)皮細(xì)胞樣
傳代特性：可傳1-2代；不建議多次傳代
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
大鼠前列腺微血管內(nèi)皮體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的優(yōu)良培養(yǎng)狀態(tài)。
細(xì)胞傳代及凍存：
| 細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
| 如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。
② 消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
小鼠白三烯B4(LTB4)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠白血病抑制因子受體(LIFR)ELISAKit ELISA. 96T/48T
豬低氧誘導(dǎo)因子1α(HIF-1α)ELISAKit ELISA. 96T/48T
豬-葡萄糖共轉(zhuǎn)運(yùn)載體1(SGLT1)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶5(MMP-5)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat soluble iercellular adhesion molecule 1 (sICAM-1) ELISA Kit 大鼠可溶性細(xì)胞間粘附分子1(sICAM-1)試劑盒
Humancomplemeconolprotein,CCPELISAKit 人補(bǔ)體調(diào)節(jié)蛋白(CCP)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humanai-Histoneaibody,AHA試劑盒人抗組蛋白抗體(AHA)試劑盒規(guī)格：96T/48T
植物0脂酶D1(PhospholipaseD1)活性熒光定量試劑盒20次
HumanVascuoarendothelialcellgrowthfactorreceptor2,VEGFR-2/Flk-1ELISAKit人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體3(VEGFR-3/Flt-4)試劑盒規(guī)格：96T/48T
AF750標(biāo)記的二甲基化組蛋白H3K4抗體
磷脂酰肌醇激酶調(diào)節(jié)亞單位gamma重組兔單克隆抗體
UCHL3重組大鼠 UCHL3 蛋白 Protein
HCV-NS3 丙型肝病毒-NS3(抗原 0.5mgHCV-NS3 丙型肝病毒-NS3(抗原)
SIGIRR重組人 SIGIRR / TIR8 蛋白 Protein
EPHB1 Protein Human 重組人 EphB1 / EPHT2 蛋白 (aa 565-984, His & GST 標(biāo)簽)
LRIG1 Protein Mouse 重組小鼠 LRIG1 / LIG-1 蛋白
HCV-NS3 丙型肝病毒-NS3(抗原 0.5mgHCV-NS3 丙型肝病毒-NS3(抗原)
EPHB1 Protein Human 重組人 EphB1 / EPHT2 蛋白 (aa 565-984, His & GST 標(biāo)簽)
UCHL3重組大鼠 UCHL3 蛋白 Protein
LRIG1 Protein Mouse 重組小鼠 LRIG1 / LIG-1 蛋白
SIGIRR重組人 SIGIRR / TIR8 蛋白 Protein
大鼠前列腺微血管內(nèi)皮細(xì)胞大鼠白介素33(IL-33)試劑盒 ，英文名： IL-33 ELISA Kit
Mouse ierleukin 27 (IL-27) ELISA Kit 小鼠白介素27(IL-27)試劑盒
ELISA 小鼠高遷移率族蛋白(mouse HMGB1) 進(jìn)口分裝
CLIAKitforINH-BGH(MouseinhibinB)ELISAKit小鼠抑制素B
通用型甘蔗白條病(Xahomonasalbilineans;Xalb)試劑盒20次
ELISAKitiNOS大鼠誘導(dǎo)型合成酶
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件：
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過(guò)充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些，至少為5×108細(xì)胞/L；
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落，漂??；
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應(yīng)將原代細(xì)胞換液；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞；
2、短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行；
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi)，進(jìn)行分瓶試驗(yàn)；
4、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí)，淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子，白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清，以利細(xì)胞生長(zhǎng)；
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行
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