詳細(xì)介紹
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號 |
前列腺 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 成纖維細(xì)胞樣 | YS-01X8254 |
細(xì)胞簡介:
大鼠前列腺基質(zhì)分離自前列腺組織;前列腺(Prostate)是雄性的性腺器官;前列腺是不成對的實(shí)質(zhì)性器宮,由腺組織和肌組織構(gòu)成。前列腺如栗子,底朝上,與膀胱相貼,尖朝下,抵泌尿生殖膈,前面貼恥骨聯(lián)合,后面依直腸。前列腺腺體的中間有尿道穿過,扼守著尿道上口,所以,前列腺有問題時,排尿首先受影響。前列腺是機(jī)體非常少有的,具有內(nèi)、外雙重分泌功能的性分泌腺。作為外分泌腺,前列腺每天分泌前列腺液,是構(gòu)成精液主要成分;作為內(nèi)分泌腺,前列腺分泌的激素稱為“前列腺素"。常見疾病為良性前列腺增生,在病理學(xué)上良性前列腺增生癥又稱前列腺結(jié)節(jié)狀增生,是前列腺中最常見的產(chǎn)生癥狀的瘤樣病變,結(jié)節(jié)開始發(fā)生可能是基質(zhì)細(xì)胞自發(fā)逆轉(zhuǎn)至胚胎階段,其生長潛力可能是基質(zhì)-上皮之間的相互協(xié)同作用所致,最終形成前列腺增生?;|(zhì)細(xì)胞是器官中結(jié)締組織細(xì)胞,起到為器官中實(shí)質(zhì)細(xì)胞提供支持和營養(yǎng)的作用,成纖維細(xì)胞、炎癥細(xì)胞、免疫細(xì)胞以及周皮細(xì)胞都是常見的基質(zhì)細(xì)胞類型?;|(zhì)細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞的相互作用在腫瘤細(xì)胞的生長過程中具有重要作用。體外培養(yǎng)前列腺基質(zhì)細(xì)胞對治療前列腺增生有重要的研究意義。
方法簡介:
實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠前列腺基質(zhì)采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠前列腺基質(zhì)經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基:含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細(xì)胞形態(tài):成纖維細(xì)胞樣
傳代特性:可傳3代左右
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
大鼠前列腺基質(zhì)體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的優(yōu)良培養(yǎng)狀態(tài)。
細(xì)胞傳代及凍存:
細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠白介素試劑盒 小鼠白介素試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠白介素試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠白介素試劑盒、小鼠白介素eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
小鼠環(huán)0酸鳥苷試劑盒 小鼠環(huán)0酸鳥苷試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠環(huán)0酸鳥苷試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠環(huán)0酸鳥苷試劑盒、小鼠環(huán)0酸鳥苷eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
小鼠骨膠原交聯(lián)試劑盒 小鼠骨膠原交聯(lián)試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠骨膠原交聯(lián)試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠骨膠原交聯(lián)試劑盒、小鼠骨膠原交聯(lián)eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
小鼠骨成型蛋白受體試劑盒 小鼠骨成型蛋白受體試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠骨成型蛋白受體試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠骨成型蛋白受體試劑盒、小鼠骨成型蛋白受體eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶4(MMP-4)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat soluble endothelial protein C receptor (sEPCR) ELISA Kit 大鼠可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體(sEPCR)試劑盒
HumanpoiculinELISAKit 人膜橋蛋白(poiculin)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humanai-IgAaibody試劑盒人抗IgA抗體(ai-IgA-Ab)試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物0脂酶D2(PhospholipaseD2)活性比色法定量試劑盒20次
HumanVascuoarendothelialcellgrowthfactorreceptor1,VEGFR-1/Flt1ELISAKit人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子受體1(VEGFR-1/Flt1)試劑盒規(guī)格:96T/48T
AF680標(biāo)記的血小板內(nèi)皮細(xì)胞黏附分子1抗體
磷酸相互作用結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體
NEK3重組小鼠 NEK3 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein
層粘連蛋白β1(LAMβ1)重組蛋白 Recombinant Laminin Beta 1 (LAMb1)
TNFSF11重組人 RANKL / OPGL / TNFSF11 / CD254 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
EPHB1 Protein Human 重組人 EphB1 / EPHT2 蛋白
ALCAM Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 ALCAM 蛋白
層粘連蛋白β1(LAMβ1)重組蛋白 Recombinant Laminin Beta 1 (LAMb1)
EPHB1 Protein Human 重組人 EphB1 / EPHT2 蛋白
NEK3重組小鼠 NEK3 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein
ALCAM Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 ALCAM 蛋白
TNFSF11重組人 RANKL / OPGL / TNFSF11 / CD254 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
大鼠前列腺基質(zhì)細(xì)胞大鼠白介素35(IL-35)試劑盒 ,英文名: IL-35 ELISA Kit
Mouse ierleukin 23 (IL-23) ELISA Kit 小鼠白介素23(IL-23)試劑盒
ELISA 小鼠羥脯(mouse HYP) 進(jìn)口分裝
CLIAKitforINHBPELISAKit大鼠抑制素結(jié)合蛋白
通用型甘油三酯(iglyceride)含量酶連續(xù)循環(huán)反應(yīng)比色法定量試劑盒50次
ELISAKitPROG大鼠孕激素/孕同
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細(xì)胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂??;
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細(xì)胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗(yàn);
4、長期培養(yǎng)時,淋巴細(xì)胞中要加入生長因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長;
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時才能進(jìn)行