詳細(xì)介紹
本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,不直接用于食品、藥品、臨床或動(dòng)物的診斷或治療!
產(chǎn)品名稱:大鼠脾臟單核細(xì)胞
組織來源:脾臟
產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基:含FBS、M-CSF、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性:半貼壁半懸浮
細(xì)胞形態(tài):巨噬細(xì)胞樣
傳代特性:不傳代,不增殖,存活1-2周
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
大鼠脾臟單核體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的優(yōu)良培養(yǎng)狀態(tài)。
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
大鼠脾臟單核分離自脾臟組織;脾臟是機(jī)體最大的免疫器官,占全身淋巴組織總量的25%,含有大量的淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞,是機(jī)體細(xì)胞免疫和體液免疫的中心。位于左季肋區(qū)后外方肋弓深處,與9-11肋相對(duì),長(zhǎng)軸與第10肋一致。膈面與膈肌和左肋膈竇相鄰,前方有胃,后方與左腎、左腎上腺毗鄰,下端與結(jié)腸脾溝相鄰,地柔軟的網(wǎng)狀內(nèi)皮細(xì)胞器官。單核細(xì)胞(monocytes)是體積最大的白細(xì)胞。其細(xì)胞核常偏位,呈多形性,如卵圓形、腎形(a)、馬蹄形(b)、不規(guī)則形(c)等,常有折疊感(c);染色質(zhì)呈疏松網(wǎng)狀,著色較淺。胞質(zhì)較多,嗜堿性,但因含大量細(xì)小的嗜天青顆粒而染成灰藍(lán)色,顆粒含過氧化物酶。單核細(xì)胞是血液中最大的血細(xì)胞。目前認(rèn)為它是巨噬細(xì)胞的前身,具有明顯的變形運(yùn)動(dòng),能吞噬、清除受傷、衰老的細(xì)胞及其碎片。單核細(xì)胞還參與免疫反應(yīng),在吞噬抗原后將所攜帶的抗原決定簇轉(zhuǎn)交給淋巴細(xì)胞,誘導(dǎo)淋巴細(xì)胞的特異性免性反應(yīng)。單核細(xì)胞也是對(duì)付細(xì)胞內(nèi)致病細(xì)菌和寄生蟲的主要細(xì)胞防衛(wèi)系統(tǒng),還具有識(shí)別和殺傷腫瘤細(xì)胞的能力。淋巴細(xì)胞則為具有特異性免疫功能的細(xì)胞。T淋巴細(xì)胞主要參與細(xì)胞免疫反應(yīng)而B淋巴細(xì)胞參與體液免疫反應(yīng)。
方法簡(jiǎn)介:
實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠脾臟單核采用密度梯度離心法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè):
實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠脾臟單核經(jīng)CD14免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)步驟:
一、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中),培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
二、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a)、對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞,脫落后吸出,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液,將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b)、對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄上清液,補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
收到細(xì)胞如何處理?
1、首先,觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有,請(qǐng)拍照,并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù))。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題,部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí),以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸?。⒓?xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)。
5、貼壁細(xì)胞:若細(xì)胞生長(zhǎng)密度超過80%,可正常傳代;若未超過80%,移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細(xì)胞:將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時(shí),若細(xì)胞密度超過80%,可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng),補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml;若細(xì)胞密度未超過80%,將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠白介素18(IL-18)ELISAKit ELISA. 96T/48T
人(TM)ELISAKit ELISA. 96T/48T
人Ⅶ(FⅦ)ELISAKit ELISA. 96T/48T
人可溶性白細(xì)胞抗原G(sHLA-G)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠活化蛋白C(APC)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat lymphocyte chemotactic factor (Lptn/LTN/XCL1) ELISA Kit 大鼠淋巴細(xì)胞趨化因子(Lptn/LTN/XCL1)試劑盒
humanfreechorionicgonadoopin,f-βhCGELISAKIT 人游離β絨毛膜(f-βhCG)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humanai-Monocyteaibody,AMA試劑盒人抗單核細(xì)胞抗體(AMA)試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物葡萄糖6-0酸異構(gòu)酶(glucose-6-phosphateisomerase;GPI)電泳分析試劑盒5次
Humanurokinase,UKELISAKit人(UK)試劑盒規(guī)格:96T/48T
8號(hào)染色體開放閱讀框76抗體
磷酸化細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子SMAD2/SMAD3抗體
IL11RA重組狗 IL11RA / IL-11RA / IL11Rα 蛋白 Protein
NOS-2 peptide 合成酶-2多肽抗原 0.5mgNOS-2 peptide 合成酶-2多肽抗原
CSNK2A1重組人 CSNK2A1 / CK2A1 蛋白 (GST 標(biāo)簽) Protein
ERBB3 Protein Human 重組人 HER3 / ErbB3 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
SELE Protein Mouse 重組小鼠 E-Selectin / CD62e / SELE 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
NOS-2 peptide 合成酶-2多肽抗原 0.5mgNOS-2 peptide 合成酶-2多肽抗原
ERBB3 Protein Human 重組人 HER3 / ErbB3 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
IL11RA重組狗 IL11RA / IL-11RA / IL11Rα 蛋白 Protein
SELE Protein Mouse 重組小鼠 E-Selectin / CD62e / SELE 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
CSNK2A1重組人 CSNK2A1 / CK2A1 蛋白 (GST 標(biāo)簽) Protein
大鼠脾臟單核細(xì)胞大鼠白介素6(IL-6)試劑盒 ,英文名: IL-6 ELISA Kit
Mouse ierleukin 1 alpha (IL-1 alpha) ELISA Kit 小鼠白介素1α(IL-1α)試劑盒
ELISA 小鼠熱休克蛋白60(mouse Hsp-60) 進(jìn)口分裝
CLIAKitforINS(HumanInsulin)ELISAKit人胰島素
通用型副氏菌A(SalmonellaParatyphiA)定量PCR擴(kuò)增試劑盒20次
ELISAKitApo-H大鼠載脂蛋白H