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詳細介紹
商品屬性：
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
骨髓 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 圓形 | YS-01X7743 |
細胞簡介：
大鼠骨髓單個核分離自骨髓；骨髓是機體的造血組織，位于身體的許多骨骼內(nèi)。成年動物的骨髓分兩種：紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能制造紅細胞、血小板和各種白細胞。血小板有止血作用，白細胞能殺滅與抑制各種病原體，包括細菌、病毒等；某些淋巴細胞能制造抗體。因此，骨髓不但是造血器官，它還是重要的免疫器官。骨髓是存在于長骨（如肱骨、股骨）的骨髓腔和扁平骨（如髂骨）的稀松骨質(zhì)間的網(wǎng)眼中，是一種海綿狀的組織，能產(chǎn)生血細胞的骨髓略呈紅色，稱為紅骨髓。出生時，紅骨髓充滿全身骨髓腔，隨著年齡增大，脂肪細胞增多，相當(dāng)部分紅骨髓被黃骨髓取代，最后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓。骨髓單個核細胞是骨髓中具有單個核的細胞，包括淋巴細胞和單核細胞。注意這里是（mononuclear cell）單個核細胞，而不是（Monocyte）單核細胞。單個核細胞的體積、形態(tài)和比重與骨髓其他細胞不同，利用一定比例聚蔗糖和鈉形成的等滲溶液作密度梯度離心，使一定密度的細胞按相應(yīng)密度梯度分布，可將各種血細胞與單個核分離。
方法簡介：
公司實驗室分離的大鼠骨髓單個核采用取骨髓、通過密度梯度離心法制備而來制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測：
公司實驗室分離的大鼠骨髓單個核經(jīng)過檢測，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 半貼壁半懸浮
細胞形態(tài) 圓形
傳代特性 不增殖；不傳代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞傳代及凍存：
| 細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
| 如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
植物C(VC)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
植物B6(VB6)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
植物B12(VB12)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
植物A(VA)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
豬(EPI)ELISA 試劑盒
Human kallikrein 11 (KLK 11) ELISA Kit 人11(KLK 11)試劑盒
GuineaPigmonocytechemotacticprotein4,MCP-4ELISAkit 豚鼠單核細胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)試劑盒 進口分裝
CLIAKitforANG(Humanangiostatin)ELISAKit人血管抑素/血管穩(wěn)定蛋白
血液(CO2)濃度酶偶聯(lián)反應(yīng)比色法定量試劑盒20次
PorcineEndothelialniicoxidesyhase,eNOSELISAKit豬內(nèi)皮型合成酶(eNOS)試劑盒
4號染色體開放閱讀框3抗體
蛋白質(zhì)精亞型3抗體
FABP4重組小鼠 FABP4 / ALBP / A-FABP / AFABP 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
過氧蛋白同源物(PXDN)重組蛋白 Recombinant Peroxidasin Homolog (PXDN)
GPHA2重組人 GPHA2 / Glycoprotein hormone alpha 2 蛋白 Protein
ADRBK1 Protein Human 重組人 GRK2 / ADRBK1 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)
IL22RA1 Protein Canine 重組狗 IL22RA1 / IL22R 蛋白 (His 標(biāo)簽)
過氧蛋白同源物(PXDN)重組蛋白 Recombinant Peroxidasin Homolog (PXDN)
ADRBK1 Protein Human 重組人 GRK2 / ADRBK1 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)
FABP4重組小鼠 FABP4 / ALBP / A-FABP / AFABP 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
IL22RA1 Protein Canine 重組狗 IL22RA1 / IL22R 蛋白 (His 標(biāo)簽)
GPHA2重組人 GPHA2 / Glycoprotein hormone alpha 2 蛋白 Protein
大鼠骨髓單個核細胞小鼠抗內(nèi)皮細胞抗體(AECA)ELISA 試劑盒
Rat ai thyroid peroxidase aibody (TPO-Ab) ELISA Kit 大鼠抗甲狀腺過氧化物酶抗體(TPO-Ab)試劑盒
Humancytoplasmicimmunoglobulin,CIgELISAKit 人胞漿免疫球蛋白(CIg)試劑盒 進口分裝
HumanAngiopoietin2,ANG-2試劑盒人血管生成素2(ANG-2)試劑盒
植物脯羥化酶(prolilhydroxylase)活性比色法定量試劑盒20次
Lensculinarisagglinin,LCAELISAKit扁豆凝集素(LCA)試劑盒
原代細胞的培養(yǎng)條件：
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細胞要通過充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2、細胞接種時濃度要稍大一些，至少為5×108細胞/L；
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落，漂浮；
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應(yīng)將原代細胞換液；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時，應(yīng)將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞；
2、短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行；
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi)，進行分瓶試驗；
4、長期培養(yǎng)時，淋巴細胞中要加入生長因子，白血病細胞中要加入少量的原患者血清，以利細胞生長；
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。
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