大鼠輸尿管上皮細(xì)胞

大鼠輸尿管上皮細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品：高遷移率族蛋白2重組兔單克隆抗體 乳腺癌抑制基因Protor1抗體 OTOP3蛋白抗體 大鼠外周血淋巴細(xì)胞 小鼠結(jié)腸平滑肌細(xì)胞 人胃腸道間質(zhì)瘤細(xì)胞；GIST-T1 Sf21 (昆蟲卵巢細(xì)胞)

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產(chǎn)品名稱：大鼠輸尿管上皮細(xì)胞

組織來(lái)源：尿道組織

產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

培養(yǎng)信息：

包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣

傳代特性 可傳1-2代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

細(xì)胞簡(jiǎn)介：

大鼠輸尿管上皮分離自輸尿管組織；輸尿管上接腎盂，下連膀胱，是一對(duì)細(xì)長(zhǎng)的管道，呈扁圓柱狀，位于腹膜后，為一肌肉粘膜所組成管狀結(jié)構(gòu)，沿腰大肌內(nèi)側(cè)的前方垂直下降進(jìn)入骨盆。輸尿管有三個(gè)狹窄部：一個(gè)在腎盂與輸尿管移行處（輸尿管起始處）；一個(gè)在越過(guò)小骨盆入口處；后一個(gè)在進(jìn)入膀胱壁的內(nèi)部。這些狹窄是結(jié)石、及壞死組織容易停留的部位。輸尿管——膀胱連接處有一種特殊結(jié)構(gòu)，即瓦耳代爾鞘，它能有效地防止膀胱內(nèi)尿液返流到輸尿管。臨床上將輸尿管分為上、中、下三段，也可稱為腹段、盆段、膀胱段。其中，腹段自腎盂輸尿管交界處，到跨越髂動(dòng)脈處；盆段，自髂動(dòng)脈到膀胱壁；膀胱段，自膀胱壁內(nèi)斜行至膀胱粘膜、輸尿管開(kāi)口。輸尿管管壁分為4層，黏膜層、固有層、肌層、外膜。黏膜層表面為移行上皮，約有4-5層細(xì)胞；固有層由細(xì)密的結(jié)締組織構(gòu)成，內(nèi)含膠原纖維和少量彈性纖維；輸尿管肌層主要由內(nèi)縱和外環(huán)兩層平滑肌組成；外膜為疏松結(jié)締組織，營(yíng)養(yǎng)血管由外膜進(jìn)入輸尿管。其中，輸尿管上皮細(xì)胞主要分布于黏膜層。

方法簡(jiǎn)介：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠輸尿管上皮采用先消化、然后機(jī)械分離法使輸尿管分層、后膠原酶消化，并通過(guò)上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測(cè)：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠輸尿管上皮經(jīng)PCK免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)步驟：

一、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中），培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

二、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

a）、對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。

2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。

3.輕輕吹打細(xì)胞，脫落后吸出，在1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。

4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液，將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。

b）、對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄上清液，補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。

方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。

收到細(xì)胞如何處理？

1、首先，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請(qǐng)拍照，并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）。

2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題，部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落；先不要打開(kāi)培養(yǎng)瓶蓋，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí)，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸浮）、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。

4、靜置完成后，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)。

5、貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長(zhǎng)密度超過(guò)80%，可正常傳代；若未超過(guò)80%，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。

6、懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無(wú)菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時(shí)，若細(xì)胞密度超過(guò)80%，可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml；若細(xì)胞密度未超過(guò)80%，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作

公司正在出售的產(chǎn)品：

山羊促生長(zhǎng)激素釋放激素(GHRH)試劑盒   96T/48T

山羊雌三醇(E3)試劑盒   96T/48T

山羊雌二醇(E2)試劑盒   96T/48T

山羊檢測(cè)(e)試劑盒   96T/48T

豚鼠內(nèi)皮素1(ET-1)試劑盒 ，英文名： ET-1 ELISA Kit

Human low density lipoprotein immune complexes (LDL-IC) ELISA Kit 人低密度脂蛋白免疫復(fù)合物(LDL-IC)試劑盒

MonkeyIerleukin-2receptor,IL-2RELISAkit白介素2受體(IL-2R)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforBigET(HumanBigEndothelin)ELISAKit人大內(nèi)皮素

細(xì)菌尿素酶(UREASE)活性定性染色試劑盒20次

rabbitLeukoieneB4,LT-B4ELISAKit兔子白三烯B4(LTB4)試劑盒規(guī)格：96T/48T

等電壓依賴性陰離子通道（內(nèi)參）重組兔單克隆抗體

驅(qū)動(dòng)蛋白家族Member14蛋白抗體

ENPP7重組小鼠 ENPP7 / NPP-7 蛋白 Protein

肌紅蛋白(MYO)天然蛋白 Native Myoglobin (MYO)

CD27重組人 CD27 / TNFRSF7 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

IL17F Protein Human 重組人 IL-17F / Interleukin-17F 蛋白

IL2 Protein Rat 重組大鼠 Interleukin-2 / IL-2 蛋白

肌紅蛋白(MYO)天然蛋白 Native Myoglobin (MYO)

IL17F Protein Human 重組人 IL-17F / Interleukin-17F 蛋白

ENPP7重組小鼠 ENPP7 / NPP-7 蛋白 Protein

IL2 Protein Rat 重組大鼠 Interleukin-2 / IL-2 蛋白

CD27重組人 CD27 / TNFRSF7 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

大鼠輸尿管上皮細(xì)胞人游離蛋白S(FP-S)ELISA 試劑盒

Major histocompatibility complex class II (MHC II /HLA- II) ELISA Kit 人主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ類(MHCⅡ/HLA-Ⅱ)試劑盒

Humanfetalsulfoslycoproteinaigen,FSAELISAKit 人胚胎性硫糖蛋白抗原(FSA)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanIerferonα,IFN-α試劑盒人α干擾素(IFN-α)試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織結(jié)構(gòu)型神經(jīng)元合成酶(cNOS/NOS1/nNOS)活性比色法定量試劑盒20次

HumanKallikrein11,KLK11ELISAKit人11(KLK11)試劑盒規(guī)格：96T/48T