詳細(xì)介紹
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號(hào) |
皮膚組織 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 梭形、多角形 | YS-01X7349 |
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
人表皮黑色素分離自皮膚組織;表皮位于動(dòng)物皮膚的外層,由胚胎時(shí)期外胚層形成,具有抗摩擦和抗損傷的作用。表皮是皮膚的淺層結(jié)構(gòu),由復(fù)層扁平上皮構(gòu)成。從基底層到表面可分為五層,即基底層、棘層、顆粒層、透明層和角質(zhì)層。黑色素細(xì)胞是皮膚產(chǎn)生和維持色素的主要細(xì)胞,起源于神經(jīng)嵴,后逐漸遷移到表皮和毛囊。黑色素細(xì)胞的異?;蚬δ艿氖С?dǎo)致了一系列難治性色素性疾病的發(fā)生,如、黃褐斑等。表皮黑色素細(xì)胞主要分布于位于表皮的基底層,與表皮細(xì)胞共同組成表皮黑素單位,其主要功能是產(chǎn)生黑素小體保護(hù)皮膚免受損害。
方法簡(jiǎn)介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人表皮黑色素細(xì)胞先消化、后-膠原酶混合消化法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè):
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人表皮黑色素經(jīng)S-100免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 梭形、多角形
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細(xì)胞傳代及凍存:
細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。
② 消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠β連環(huán)蛋白/聯(lián)蛋白(β-Cat)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠骨退化特異標(biāo)志物(CTX-2)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽(PACAP)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠核因子κB抑制蛋白α(IKB-α)試劑盒 96T/48T
Rat ovarian cancer marker-CA125 CA125 ELISA Kit 大鼠卵巢癌標(biāo)志物CA125 試劑盒
humanProstaglandinD2-methoxime,PGD2-MOXELISAKIT 人甲肟前列腺素D2(PGD2-MOX)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humanai-Nogo-Aaibody,NOGO-AAb試劑盒人NOGO-A抗體(Nogo-AAb)試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物酸性0酸酶總活性比色法定量試劑盒20次
HumanUlaSensitivegrowthhormone,US-GHELISAKit人超敏生長(zhǎng)激素(US-GH)試劑盒規(guī)格:96T/48T
磷酸化磷脂酰肌醇激酶調(diào)節(jié)亞單位gamma抗體
氧化蛋白質(zhì)水解酶
VNN1重組小鼠 VNN1 / Vanin-1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
酸脫氫酶α(PDHα)重組蛋白 Recombinant Pyruvate Dehydrogenase Alpha (PDHa)
CBFB重組人 CBFB / CBF-beta 蛋白 Protein
F7 Protein Human 重組人 Coagulation Factor VII / FVII / F7 蛋白
PROCR Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 Epcr / PROCR 蛋白
酸脫氫酶α(PDHα)重組蛋白 Recombinant Pyruvate Dehydrogenase Alpha (PDHa)
F7 Protein Human 重組人 Coagulation Factor VII / FVII / F7 蛋白
VNN1重組小鼠 VNN1 / Vanin-1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
PROCR Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 Epcr / PROCR 蛋白
CBFB重組人 CBFB / CBF-beta 蛋白 Protein
人表皮黑色素細(xì)胞大鼠抑制素B(INHB)試劑盒 ,英文名: INHB ELISA Kit
Mouse immunoglobulin M (IgM) ELISA Kit 小鼠免疫球蛋白M(IgM)試劑盒
MouseP-SelectinELISAkit 小鼠P選擇素(P-Selectin/CD62P)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHumanDiphtheriaaibodyELISAKit人白喉抗體
細(xì)胞Akt/PKB激酶總活性定量試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKitsmActinin-α大鼠橫紋肌輔肌動(dòng)蛋白α
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂??;
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗(yàn);
4、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí),淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長(zhǎng);
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。