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本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,不直接用于食品、藥品、臨床或動(dòng)物的診斷或治療!
產(chǎn)品名稱:人肝動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞
組織來源:肝動(dòng)脈組織
產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息:
包被條件 PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%)
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 內(nèi)皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
人肝動(dòng)脈內(nèi)皮分離自肝動(dòng)脈組織;在胚胎期,肝臟有3條動(dòng)脈供血,分別來源于胃左動(dòng)脈、腹腔動(dòng)脈和腸系膜上動(dòng)脈,這3條動(dòng)脈分別的不同部位。出生后,一般保留一條動(dòng)脈,大部分為起源于腹腔動(dòng)脈的動(dòng)脈,由其分出左、右肝動(dòng)脈供應(yīng)左、右半肝。偶爾也可見起源于胃左動(dòng)脈的動(dòng)脈或起源于腸系膜上動(dòng)脈的動(dòng)脈。但也有2條動(dòng)脈并存的情況,如起源于腹腔動(dòng)脈和起源于胃左動(dòng)脈(25%),起源于腹腔動(dòng)脈和起源于腸系臘上動(dòng)脈(10%),而起源于胃左動(dòng)脈和起源于腸系膜上動(dòng)脈的2條動(dòng)脈同時(shí)存在的情況比較少見。此外,還有5%像胚胎期一樣,3條動(dòng)脈同時(shí)存在。這種起源于腹腔動(dòng)脈以外的肝動(dòng)脈稱為迷走肝動(dòng)脈,如果肝臟沒有起源于腹腔動(dòng)脈的動(dòng)脈供血時(shí),此種異位起源的肝動(dòng)脈稱替代動(dòng)脈,如果在常見肝動(dòng)脈類型外,還有一支這種異位起始的動(dòng)脈的一部分血流,這種肝動(dòng)脈稱副肝動(dòng)脈。肝動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞是襯于肝動(dòng)脈內(nèi)表面的單層扁平上皮,在炎癥時(shí)高表達(dá)黏附分子,與血流中白細(xì)胞表面黏附分子相互作用,從而介導(dǎo)白細(xì)胞穿越血管壁,亦屬一類非專職抗原提呈細(xì)胞。它們吞噬異物、細(xì)菌、壞死和衰老的組織,還參與集體免疫活動(dòng),包括:①血管收縮及血管舒張,從而控制血壓;②凝血(血栓形成及纖維蛋白溶解);③動(dòng)脈硬化;④血管生成;⑤炎癥及腫脹(浮腫);⑥內(nèi)皮細(xì)胞亦控制一些物質(zhì),如白血球進(jìn)出血管。
方法簡(jiǎn)介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人肝動(dòng)脈內(nèi)皮采用混合酶消化法結(jié)合差速貼壁法,并通過內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè):
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人肝動(dòng)脈內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)步驟:
一、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中),培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
二、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a)、對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞,脫落后吸出,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液,將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b)、對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄上清液,補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
公司正在出售的產(chǎn)品:
兔子細(xì)胞間粘附分子2試劑盒 兔子細(xì)胞間粘附分子2試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 兔子細(xì)胞間粘附分子2試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔子細(xì)胞間粘附分子2試劑盒、兔子細(xì)胞間粘附分子2eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
兔子細(xì)胞間粘附分子1試劑盒 兔子細(xì)胞間粘附分子1試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 兔子細(xì)胞間粘附分子1試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔子細(xì)胞間粘附分子1試劑盒、兔子細(xì)胞間粘附分子1eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
兔子脫氧酚試劑盒 兔子脫氧酚試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 兔子脫氧酚試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔子脫氧酚試劑盒、兔子脫氧酚eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
豬氧化酶試劑盒 豬氧化酶試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 豬氧化酶試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:豬氧化酶試劑盒、豬氧化酶eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
小鼠標(biāo)志物(CA724)ELISA 試劑盒
Human ai myocardial aibody (EMAb) ELISA Kit 人抗眼肌抗體(EMAb)試劑盒
HumanglathioneS-ansferases,GSTsELISAKit 人S轉(zhuǎn)移酶(GSTs)試劑盒 進(jìn)口分裝
CLIAKitforABM-Ab(Humanalveolibasememembranezoneaibody)ELISAKit人抗肺泡基底膜抗體
伊紅復(fù)染試劑盒50次
Mouseniicoxide,NOELISAKit小鼠(NO)試劑盒
內(nèi)質(zhì)網(wǎng)氧化物蛋白Ero1-Lα抗體
腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子6抗體
PECAM1重組小鼠 CD31 / PECAM-1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
BDNF (Brain-derived Neurotrophin factor 0.5mgBDNF (Brain-derived Neurotrophin factor) 腦源神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(腦衍化神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子)(多肽片斷抗原)
IGF1重組人 IGF1 / IGF-I 蛋白 Protein
GADD45A Protein Human 重組人 GADD45A / DDIT-1 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)
TNFSF12 Protein Rat 重組大鼠 TNFSF12 蛋白
BDNF (Brain-derived Neurotrophin factor 0.5mgBDNF (Brain-derived Neurotrophin factor) 腦源神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(腦衍化神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子)(多肽片斷抗原)
GADD45A Protein Human 重組人 GADD45A / DDIT-1 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)
PECAM1重組小鼠 CD31 / PECAM-1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
TNFSF12 Protein Rat 重組大鼠 TNFSF12 蛋白
IGF1重組人 IGF1 / IGF-I 蛋白 Protein
人肝動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞大鼠亞鐵螯合酶(FECH)試劑盒 ,英文名: FECH ELISA Kit
Mouse coagulation factor II (F II) ELISA Kit 小鼠Ⅱ(FⅡ)試劑盒
Mousebasicfibroblastgrowthfactor4,bFGF-4ELISAKit 小鼠堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子4(bFGF-4)試劑盒 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHumanCollectinELISAKit人膠原凝集素
細(xì)胞CDK1/CYCLINB激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKitu-T4大鼠高敏甲狀腺素
收到細(xì)胞如何處理?
1、首先,觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有,請(qǐng)拍照,并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù))。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題,部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí),以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸浮)、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)。
5、貼壁細(xì)胞:若細(xì)胞生長(zhǎng)密度超過80%,可正常傳代;若未超過80%,移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細(xì)胞:將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時(shí),若細(xì)胞密度超過80%,可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng),補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml;若細(xì)胞密度未超過80%,將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作