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詳細介紹
商品屬性：
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
滑膜組織 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 成纖維細胞樣 | YS-01X7321 |
細胞簡介：
人滑膜分離自滑膜組織；滑膜組織是位于關節(jié)腔內面的內襯結構，各種關節(jié)內疾病均會累及滑膜。而滑膜細胞是維持關節(jié)正常功能的重要組織結構，同時在各種關節(jié)疾患中也是主要病變部位。骨關節(jié)炎（OA）以關節(jié)軟骨退行性變?yōu)樘卣鳎洳±砀淖兝奂瓣P節(jié)的各個組成部分，但絕不僅局限于軟骨，還包括軟骨下骨、滑膜、半月板和韌帶。各組成部分的病理改變相互影響，相互作用，共同加速關節(jié)的退變?；ぜ毎菢嫵苫拥募毎后w，是維持關節(jié)正常功能的重要組織結構，它包埋在顆粒狀無定性的基質中，基質內有分散的纖維分布?；び?span>A型（巨噬樣滑膜細胞）、B型（成纖維樣滑膜細胞）以及C型（樹突細胞樣滑膜細胞）細胞組成?；ぜ毎饕δ埽孩倩ぜ毎a(chǎn)生潤滑液成分，并且與關節(jié)腔的吸收和血液/潤滑液交換有關；②滑膜細胞增生，表現(xiàn)為不依賴于支持物生長，并且分泌大量的效應分子來促進炎癥和關節(jié)損壞；③是自身自分泌和旁分泌網(wǎng)絡中效應因子的一部分。
方法簡介：
公司實驗室分離的人滑膜采用混合酶消化法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測：
公司實驗室分離的人滑膜經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳5代左右；3代以內狀態(tài)最佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞傳代及凍存：
| 細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
| 如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
兔白介素6(IL-6)試劑盒 96T/48T
兔白介素17(IL-17)試劑盒 96T/48T
兔白介素1（IL-1）試劑盒 96T/48T
兔(ADR)試劑盒 96T/48T
小鼠Ⅲ型前膠原基端肽(PⅢ)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat cyclin D2 (Cyclin-D2) ELISA Kit 大鼠細胞周期素D2(Cyclin-D2)試劑盒
HumanHydrocoisone,HYDELISAKit 人輕化1(HYD)試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanComplemefragme5b,C5b試劑盒人補體片斷5b(C5b)試劑盒規(guī)格：96T/48T
組織CDK3/CYCLINE激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
Humanproteinase-aineuophilcytoplasmicaibody,PR3-ANCAELISAKit人蛋白酶3特異性抗中性粒細胞胞質抗體(PR3-ANCA)試劑盒規(guī)格：96T/48T
三磷酸肌醇3激酶B抗體
21號染色體開放閱讀框62抗體
IL1B重組兔 IL-1 beta / IL1B 蛋白 Protein
NKG2A/CD159a/KLRC1 NK細胞受體2A/自然殺傷細胞活化性受體2A抗原 0.5mgNKG2A/CD159a/KLRC1 NK細胞受體2A/自然殺傷細胞活化性受體2A抗原
FOLR1重組人 FOLR1 / Folate receptor alpha 蛋白 Protein
ICAM4 Protein Human 重組人 ICAM4 / CD242 蛋白 (Fc 標簽)
REG3B Protein Mouse 重組小鼠 REG3B / Pap1 蛋白
NKG2A/CD159a/KLRC1 NK細胞受體2A/自然殺傷細胞活化性受體2A抗原 0.5mgNKG2A/CD159a/KLRC1 NK細胞受體2A/自然殺傷細胞活化性受體2A抗原
ICAM4 Protein Human 重組人 ICAM4 / CD242 蛋白 (Fc 標簽)
IL1B重組兔 IL-1 beta / IL1B 蛋白 Protein
REG3B Protein Mouse 重組小鼠 REG3B / Pap1 蛋白
FOLR1重組人 FOLR1 / Folate receptor alpha 蛋白 Protein
人滑膜細胞大鼠血管內皮生長因子121(VEGF121)試劑盒 ，英文名： VEGF121 ELISA Kit
Mouse aldosterone (ALD) ELISA Kit 小鼠固酮(ALD)試劑盒
Mousesolubleierleukin-1receptorⅡ,IL-1sRⅡELISAkit 小鼠白介素1可溶性受體Ⅱ(IL-1sRⅡ)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforHumanarabinogalactanproteins,AGPsELISAKit人阿拉伯半乳糖蛋白
細胞EPHB3激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKitCETP大鼠酯轉移蛋白
原代細胞的培養(yǎng)條件：
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細胞要通過充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2、細胞接種時濃度要稍大一些，至少為5×108細胞/L；
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落，漂??；
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應將原代細胞換液；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時，應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞；
2、短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行；
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內，進行分瓶試驗；
4、長期培養(yǎng)時，淋巴細胞中要加入生長因子，白血病細胞中要加入少量的原患者血清，以利細胞生長；
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。
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