詳細介紹
商品屬性:
組織來源 | 產品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
結腸癌組織 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 梭形、多角形 | YS-01X7431 |
細胞簡介:
人結腸癌組織源分離自患有結腸癌病人的結腸癌組織;結腸癌是常見的發(fā)生于結腸部位的消化道惡性腫瘤,好發(fā)于直腸與乙狀結腸交界處,以40~50歲年齡組發(fā)病率最高,男女之比為2~3:1。發(fā)病率占胃腸道腫瘤的第3位。結腸癌主要為腺癌、黏液腺癌、未分化癌。大體形態(tài)呈息肉狀、潰瘍型等。結腸癌可沿腸壁環(huán)行發(fā)展,沿腸管縱徑上下蔓延或向腸壁深層浸潤,除經淋巴管、血流轉移和局部侵犯外,還可向腹腔內種植或沿縫線、切口面擴散轉移。慢性結腸炎患者、結腸息肉患者、男性肥胖者等為易感人群。人結腸癌組織源細胞不僅廣泛應用于分子、細胞生物學和生物醫(yī)學基礎研究,如蛋白質組學、基因組學、細胞株(系)研究、DNA,RNA和遺傳學研究等,還可應用于當今熱門的生物醫(yī)藥產業(yè)如藥物篩選、藥物代謝和毒理研究、癌癥藥物的研究等。人結腸癌組織源細胞在生物醫(yī)藥領域有不可替代性作用。
方法簡介:
公司實驗室分離的癌組織源采用膠原酶消化、經Percoll離心純化制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
公司實驗室分離的人結腸癌組織源經檢測,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 梭形、多角形
傳代特性 可傳5代左右;3代以內狀態(tài)最佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調節(jié)作用。
公司正在出售的產品:
小鼠GRO(mouse GRO) 作用: ELISA 規(guī)格: 進口分裝
小鼠神經膠質細胞衍化營養(yǎng)因子(mouse GDNF) 作用: ELISA 規(guī)格: 進口分裝
小鼠生長因子(mouse GH) 作用: ELISA 規(guī)格: 進口分裝
小鼠心肌轉錄因子3(mouse GATA3) 作用: ELISA 規(guī)格: 進口分裝
小鼠骨成型蛋白受體1A(BMPR-1A)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human growth hormone releasing factor (GH-RF) ELISA Kit 人生長激素釋放因子(GH-RF)試劑盒
Humahymopein,TP-5ELISAKit 人五肽(TP-5)試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humanai-rubellavirusIgGaibody,ai-RVIgG試劑盒人抗風疹病毒IgG抗體(ai-RVIgG)試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物細胞周期G1期同步(SYNCHRONY)處理試劑盒10次
Humaubularbasememembraneaibogy,TBMELISAKit人抗腎小管基底膜抗體(TBM)試劑盒規(guī)格:96T/48T
生發(fā)中心激酶樣激酶抗體
AF488標記人CD16單克隆抗體
SMAD3重組小鼠 Smad3 蛋白 (His & GST 標簽) Protein
高遷移率族蛋白1(HMG1)重組蛋白 Recombinant High Mobility Group Protein 1 (HMG1)
SHPK重組人 CARKL / SHPK 蛋白 Protein
FAM45A Protein Human 重組人 CAMK1 / CaMKI-alpha 蛋白
CD200R1L Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD200RLa 蛋白
高遷移率族蛋白1(HMG1)重組蛋白 Recombinant High Mobility Group Protein 1 (HMG1)
FAM45A Protein Human 重組人 CAMK1 / CaMKI-alpha 蛋白
SMAD3重組小鼠 Smad3 蛋白 (His & GST 標簽) Protein
CD200R1L Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD200RLa 蛋白
SHPK重組人 CARKL / SHPK 蛋白 Protein
人結腸癌組織源細胞大鼠心營養(yǎng)素樣細胞因子1(CLCF1)試劑盒 ,英文名: CLCF1 ELISA Kit
Mouse heat shock protein 70 (HSP-70) ELISA Kit 小鼠熱休克蛋白70(HSP-70)試劑盒
MouseFibrinogenDegradationProduct,FDPELISAKit 小鼠血纖蛋白原降解產物(FDP)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforHumanai-macrophageaibodyELISAKit人抗巨噬細胞抗體
細胞FLT3激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKitGRH大鼠促生長激素釋放激素
原代細胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂??;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養(yǎng)1周時,應將細胞懸液經低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,進行分瓶試驗;
4、長期培養(yǎng)時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。