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本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療!
產(chǎn)品名稱:人臍動脈內(nèi)皮細胞
組織來源:臍帶組織
產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息:
包被條件 PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%)
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 內(nèi)皮細胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞簡介:
人臍動脈內(nèi)皮分離自臍帶組織;它是臍動脈的重要結(jié)構(gòu)組成細胞之一,在機體的正常生理過程中發(fā)揮著重要作用。臍帶是哺乳類的連接胎兒和胎盤的管狀結(jié)構(gòu),臍帶中通過尿膜的血管即臍動脈和臍靜脈,卵黃囊的血管即臍腸系膜動脈及臍腸系膜靜脈。在子宮中,子宮動脈在胎盤的母體部分出的毛細血管,與胎盤的子體部胎兒毛細血管靠近,在此處母體和胎兒的血液間進行CO2和O2,代謝產(chǎn)物即代謝廢物和營養(yǎng)物質(zhì)的交換。臍動脈將胎兒產(chǎn)生的廢物運送至胎盤,臍靜脈將O2和營養(yǎng)物質(zhì)從胎盤運送給胎兒。
方法簡介:
公司實驗室分離的人臍動脈內(nèi)皮采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法、并通過內(nèi)皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實驗室分離的人臍動脈內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)步驟:
一、復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?cm皿中),培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
二、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
a)、對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細胞,脫落后吸出,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補加培養(yǎng)液,將細胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b)、對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄上清液,補加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
收到細胞如何處理?
1、首先,觀察細胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有,請拍照,并及時與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù))。
2、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題,部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時,以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
3、仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸?。?、細胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后,取出細胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細胞:若細胞生長密度超過80%,可正常傳代;若未超過80%,移除細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細胞:將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時,若細胞密度超過80%,可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),補加培養(yǎng)基至5ml;若細胞密度未超過80%,將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作
公司正在出售的產(chǎn)品:
戊二 (25%) 100ml
Glaraldehydesolion 500ml
戊二 (50%) 100ml
Glaraldehydesolion 500ml
小鼠凋亡相關(guān)因子配體(FASL)ELISA 試劑盒
Human iggering receptor expressed on myeloid cells -1 (EM-1) ELISA Kit 人髓系細胞觸發(fā)受體-1(EM-1)試劑盒
HumanChlamydiaachomatis,CTELISAKit 人沙眼衣原體抗體(CT)試劑盒 進口分裝
Humanargininevasopressin,AVP試劑盒人精加壓素(AVP)試劑盒
植物源性食品花生(pean)試劑盒20次
Humahymus-leukemiaaigen,TLaELISAKit人白血病抗原(TLa)試劑盒
線粒體轉(zhuǎn)錄終止因子樣蛋白MTERFD3抗體
G蛋白偶聯(lián)受體C5B抗體
EPO重組小鼠 Erythropoietin / EPO 蛋白 (His 標簽) Protein
抵抗素(RETN)重組蛋白 Recombinant Resistin (RETN)
PMM2重組人 Phosphomannomutase 2 / PMM2 / CDG1 蛋白 (His 標簽) Protein
FES Protein Human 重組人 FES Kinase / Feline sarcoma oncogene 蛋白 (His & GST 標簽)
EPHA4 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 EphA4 蛋白 (His 標簽)
5-HTR3(5-hydroxytryptamine (serotonin 0.5mg5-HTR3(5-hydroxytryptamine (serotonin) receptor 3a) 5-羥色胺受體3抗原
FES Protein Human 重組人 FES Kinase / Feline sarcoma oncogene 蛋白 (His & GST 標簽)
CFD重組小鼠 Adipsin / Complement Factor D / CFD 蛋白 (His 標簽) Protein
EFNB2 Protein Rat 重組大鼠 Ephrin-B2 / EFNB2 蛋白 (His 標簽)
EPHB4重組人 EphB4 / HTK 蛋白 (aa 563-987, His & GST 標簽) Protein
人臍動脈內(nèi)皮細胞大鼠戊糖素(PTD)試劑盒 ,英文名: PTD ELISA Kit
Mouse ezrin / dear cyclophilin A (CyPA) ELISA Kit 小鼠嗜環(huán)蛋白/親環(huán)素A(CyPA)試劑盒
MouseIerleukin27,IL-27ELISAKit 小鼠白介素27(IL-27)試劑盒 進口分裝
CLIAKitforHSP-20(HumanHeatShockProtein20)ELISAKit人熱休克蛋白20
細胞MKK6激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKitIL-12/P70大鼠白介素12