詳細(xì)介紹
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號 |
髂動脈 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 內(nèi)皮細(xì)胞樣 | YS-01X7309 |
細(xì)胞簡介:
人髂動脈內(nèi)皮分離自髂動脈組織;髂總動脈位于人體的盆腔,人的髂總動脈有兩條,也就是臨床上左右兩條分支,它是由腹部最主要的動脈演化而來,由腹部的腹主動脈沿著人體的脊柱方向向下進(jìn)行,到達(dá)第4腰椎后開始分成兩支,這就是左右髂總動脈。動脈是介于心室與毛細(xì)血管之間的管道,它接近心室的部分,管徑大,管壁較厚。經(jīng)過反復(fù)分支,管徑逐漸變小,管壁變薄,最后形成與毛細(xì)血管構(gòu)造相似的毛細(xì)血管前小動脈,與毛細(xì)血管相接。動脈的管徑大小和管壁的厚薄,雖相差很大,但構(gòu)造上均有共同之處。一般均由3層膜組成,最內(nèi)層稱為內(nèi)膜,由內(nèi)皮及縱行排列的結(jié)締組織構(gòu)成;中間的一層稱為中膜,由環(huán)形排列的組織構(gòu)成;最外的一層叫外膜,由縱行排列的結(jié)締組織構(gòu)成。動脈內(nèi)皮細(xì)胞是覆蓋在主動脈內(nèi)面的單層細(xì)胞,可分泌一系列血管活性物質(zhì)而保持血管穩(wěn)態(tài),當(dāng)其受到炎癥或其它因素刺激后穩(wěn)態(tài)被破壞而導(dǎo)致一些心血管疾病的發(fā)生。因此,動脈內(nèi)皮細(xì)胞已成為研究心血管疾病發(fā)病機(jī)制及治療藥物的工具。內(nèi)皮細(xì)胞或血管內(nèi)皮是一薄層的專門上皮細(xì)胞,由一層扁平細(xì)胞所組成。它形成血管的內(nèi)壁,是血管管腔內(nèi)血液及其他血管壁(單層鱗狀上皮)的接口。內(nèi)皮細(xì)胞是沿著整個循環(huán)系統(tǒng),由心臟直至最小的微血管。
方法簡介:
公司實驗室分離的人髂動脈內(nèi)皮采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法、并通過內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實驗室分離的人髂動脈內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
包被條件 PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%)
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 內(nèi)皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細(xì)胞傳代及凍存:
細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
兔脂蛋白α(Lp-α)ELISAKit ELISA. 96T/48T
兔載脂蛋白E(Apo-E)ELISAKit ELISA. 96T/48T
兔載脂蛋白B100(apo-B100)ELISAKit ELISA. 96T/48T
兔轉(zhuǎn)化生長因子β2(TGFβ2)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat eosinophil chemotactic protein Eotaxin 1 (Eotaxin 1/CCL11) ELISA Kit 大鼠嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白Eotaxin 1(Eotaxin 1/CCL11)試劑盒
HumanEndomeiumAibody,EMAbELISAKit 人抗子宮內(nèi)膜抗體(EMAb)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanChlamydiaachomatis,CT試劑盒人沙眼衣原體抗體(CT)試劑盒規(guī)格:96T/48T
轉(zhuǎn)基因玉米TC1507品系試劑盒20次
HumansecretoryimmunoglobulinA,SIgAELISAKit人分泌型免疫球蛋白A(SIgA)試劑盒規(guī)格:96T/48T
鋅指蛋白348抗體
KIAA0232蛋白抗體
IFNA4重組小鼠 IFNA4 / Interferon alpha-4 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
HtrA絲肽酶4(HTRA4)重組蛋白 Recombinant HtrA Serine Peptidase 4 (HTRA4)
TMEM27重組人 TMEM27 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
GRK6 Protein Human 重組人 GRK6 / GPRK6 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)
PVR Protein Rat 重組大鼠 CD155 / PVR / NECL5 蛋白
β-位淀粉樣前體蛋白裂解酶1(βACE1)重組蛋白 Recombinant Beta-Site APP Cleaving Enzyme 1 (bACE1)
GRK6 Protein Human 重組人 GRK6 / GPRK6 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)
MCAM重組小鼠 CD146 / MCAM 蛋白 Protein
NRP1 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 Neuropilin-1 / NRP1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
BPHL重組人 BPHL 蛋白 Protein
人髂動脈內(nèi)皮細(xì)胞大鼠胃泌素抑制肽(GIP)試劑盒 ,英文名: GIP ELISA Kit
Mouse aquaporin 1 (AQP-1) ELISA Kit 小鼠水通道蛋白1(AQP-1)試劑盒
Mouseaidiuretichormone/vasopressin/argininevasopressin,ADH/VP/AVPELISAKit 小鼠抗利尿激素/血管加壓素/精加壓素(ADH/VP/AVP)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHSF-1(HumanHeatShockFactor1)ELISAKit人熱休克因子1
細(xì)胞NADPH氧化酶活性比色法定量試劑盒20次(10樣本)
ELISAKitIFN-γ大鼠γ干擾素
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細(xì)胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂??;
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細(xì)胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗;
4、長期培養(yǎng)時,淋巴細(xì)胞中要加入生長因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長;
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時才能進(jìn)行。