詳細(xì)介紹
商品屬性:
組織來(lái)源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號(hào) |
前列腺 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 成纖維細(xì)胞樣 | YS-01X7703 |
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
人前列腺基質(zhì)分離自前列腺組織;前列腺(Prostate)是雄性的性腺器官;前列腺是不成對(duì)的實(shí)質(zhì)性器宮,由腺組織和肌組織構(gòu)成。前列腺如栗子,底朝上,與膀胱相貼,尖朝下,抵泌尿生殖膈,前面貼恥骨聯(lián)合,后面依直腸。前列腺腺體的中間有尿道穿過(guò),扼守著尿道上口,所以,前列腺有問(wèn)題時(shí),排尿首先受影響。前列腺是機(jī)體非常少有的,具有內(nèi)、外雙重分泌功能的性分泌腺。作為外分泌腺,前列腺每天分泌前列腺液,是構(gòu)成精液主要成分;作為內(nèi)分泌腺,前列腺分泌的激素稱為“前列腺素"。常見疾病為良性前列腺增生,在病理學(xué)上良性前列腺增生癥又稱前列腺結(jié)節(jié)狀增生,是前列腺中最常見的產(chǎn)生癥狀的瘤樣病變,結(jié)節(jié)開始發(fā)生可能是基質(zhì)細(xì)胞自發(fā)逆轉(zhuǎn)至胚胎階段,其生長(zhǎng)潛力可能是基質(zhì)-上皮之間的相互協(xié)同作用所致,最終形成前列腺增生?;|(zhì)細(xì)胞是器官中結(jié)締組織細(xì)胞,起到為器官中實(shí)質(zhì)細(xì)胞提供支持和營(yíng)養(yǎng)的作用,成纖維細(xì)胞、炎癥細(xì)胞、免疫細(xì)胞以及周皮細(xì)胞都是常見的基質(zhì)細(xì)胞類型?;|(zhì)細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞的相互作用在腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)過(guò)程中具有重要作用。體外培養(yǎng)人前列腺基質(zhì)細(xì)胞對(duì)治療前列腺增生有重要的研究意義。
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過(guò)充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂??;
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗(yàn);
4、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí),淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長(zhǎng);
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。
方法簡(jiǎn)介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人前列腺基質(zhì)采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè):
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人前列腺基質(zhì)經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
包被條件 貼壁不包被
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)最佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細(xì)胞傳代及凍存:
細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。
② 消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
兔主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ類(MHCⅡ/RLAⅡ)試劑盒 96T/48T
兔主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類(MHCⅠ/RLAⅠ)試劑盒 96T/48T
兔壞死因子α(TNF-α)試劑盒 96T/48T
兔脂蛋白α(Lp-α)試劑盒 96T/48T
小鼠β甘露糖苷酶(β Manase)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human vitamin C (VC) ELISA Kit 人C(VC)試劑盒
Humancalmodulin,CAMELISAKit 人鈣調(diào)素(CAM)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humanchemerin試劑盒人chemerin試劑盒規(guī)格:96T/48T
轉(zhuǎn)基因玉米NK603品系試劑盒20次
Humanserineprotease,PRSSELISAKit人絲蛋白酶(PRSS)試劑盒規(guī)格:96T/48T
鋅指蛋白693抗體
LRIT3蛋白抗體
SEMA4D重組大鼠 Semaphorin 4D / SEMA4D / CD100 蛋白 Protein
FOXJ1/HFH-4 peptide 插頭蛋白J1抗原 0.5mgFOXJ1/HFH-4 peptide 插頭蛋白J1抗原
SULT1A1重組人 SULT1A1 / STP1 蛋白 Protein
GPX7 Protein Human 重組人 GPX7 / Glutathione Peroxidase 7 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
EPHB4 Protein Mouse 重組小鼠 EphB4 / HTK 蛋白
FOXJ1/HFH-4 peptide 插頭蛋白J1抗原 0.5mgFOXJ1/HFH-4 peptide 插頭蛋白J1抗原
GPX7 Protein Human 重組人 GPX7 / Glutathione Peroxidase 7 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
SEMA4D重組大鼠 Semaphorin 4D / SEMA4D / CD100 蛋白 Protein
EPHB4 Protein Mouse 重組小鼠 EphB4 / HTK 蛋白
SULT1A1重組人 SULT1A1 / STP1 蛋白 Protein
人前列腺基質(zhì)細(xì)胞大鼠胃動(dòng)蛋白1(GKN1)試劑盒 ,英文名: GKN1 ELISA Kit
Mouse aquaporin 4 (AQP-4) ELISA Kit 小鼠水通道蛋白4(AQP-4)試劑盒
Mousemonocytechemotacticprotein4,MCP-4ELISAkit 小鼠單核細(xì)胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforhs-CRP(HumanhighsensitivityC-ReactiveProtein)ELISAKit人超敏C反應(yīng)蛋白
細(xì)胞NAD依賴性甘油-3-0酸脫氫酶(NAD-Glyceraldehyde-3-PhosphateDehydrogenase;NAD-GAPDH)活性光譜法定量試劑盒20次
ELISAKitBTC大鼠β細(xì)胞素