人小氣道平滑肌細胞

人小氣道平滑肌細胞

商品屬性：

細胞簡介：

人小氣道平滑肌分離自小氣道組織；臨床上通常將內(nèi)徑小于2mm的小細支氣管稱為小氣道。小氣道具有氣流阻力小，但易阻塞的特點。在平靜吸氣時，空氣進入狹窄的鼻咽部，產(chǎn)生渦流。由于小氣道已無軟骨支持，在脫離纖維鞘嵌入肺組織后，管腔通暢性不象軟骨性氣道，易于受胸腔的壓力變化的影響。小氣道上皮細胞形成連續(xù)呼吸道內(nèi)層，作為隔絕外界有害物質(zhì)的物理和功能屏障發(fā)揮著的作用。小氣道位于肺泡和氣管的交界處，這些細胞在功能上能夠調(diào)節(jié)免疫反應、產(chǎn)生化學因子進行宿主防御、表達粘附分子，并可能通過HLA-DR表達呈遞抗原；它們還能產(chǎn)生液體有助于肺液的平衡。許多呼吸道疾病，如哮喘、支氣管炎、慢性阻塞性肺病和囊性纖維化，都涉及呼吸道表面上皮細胞的破壞；小氣道上皮細胞的培養(yǎng)可為防止呼吸道擴增疾病和重塑提供新的治療選擇。小氣道平滑肌細胞原代分離培養(yǎng)3天后，可見細胞貼壁伸展，細胞形態(tài)大小不一，呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細胞匯合，多數(shù)細胞伸展呈長梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長，高低起伏；細胞密度低時，常交織成網(wǎng)狀；密度高時，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態(tài)學特征和生長特點。小氣道的生理功能特點：①小氣道阻力??；②氣流速度慢；③可調(diào)節(jié)控制通氣與血流比例。小氣管平滑肌細胞主要功能：①保持氣道張力維持小氣道形態(tài)；②肺小氣道進行氣體交換，病變可引起換氣功能障礙；③炎癥、痰液阻塞或當氣道外壓大于氣道內(nèi)壓時容易造成小氣道閉合、萎陷。小氣管平滑肌細胞與主要病生理變化：①支氣管炎；②肺氣腫；③慢性阻塞性肺疾病。

原代細胞的培養(yǎng)條件：

　　一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)

　　1、細胞要通過充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；

　　2、細胞接種時濃度要稍大一些，至少為5×108細胞/L；

　　3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；

　　4、 胎牛血清濃度為10%-80%

　　5、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

　　6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落，漂??；

　　7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應將原代細胞換液；

　　8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時，應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。

　　二、懸浮細胞培養(yǎng)

　　1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞；

　　2、短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行；

　　3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi)，進行分瓶試驗；

　　4、長期培養(yǎng)時，淋巴細胞中要加入生長因子，白血病細胞中要加入少量的原患者血清，以利細胞生長；

　　5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次；

　　6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。

方法簡介：

公司實驗室分離的人小氣道平滑肌采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測：

公司實驗室分離的人小氣道平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)優(yōu)良

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

細胞傳代及凍存：

原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：

　　① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

　?、?消化培養(yǎng)法

　　③ 懸浮細胞培養(yǎng)法

　　對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

　　④器官培養(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠可溶性E選擇素(sE-selectin)試劑盒   96T/48T

小鼠可溶性Endoglin(ENG/sCD105)試劑盒   96T/48T

小鼠顆粒酶B(Gzms-B)試劑盒   96T/48T

小鼠顆粒酶A(Gzms-A)試劑盒   96T/48T

小鼠凝溶膠蛋白(Gelsolin)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human blood coagulation factor XII (F XII) ELISA Kit 人Ⅻ(FⅫ)試劑盒

Humanpro-gasin-releasingpeptide,ProGRPELISAKit 人胃泌素釋放肽前體(ProGRP)試劑盒 96T/48T 進口分裝

Human20-hydroxyeicosateaenoicacid,12-HETE試劑盒人12羥二十烷四烯酸(12-HETE)試劑盒規(guī)格：96T/48T

真菌/酵母纖維二糖酶(cellobiase)活性比色法定量試劑盒20次

MouseApolipoproteinH,Apo-HELISAKit小鼠載脂蛋白H(Apo-H)試劑盒規(guī)格：96T/48T

3號染色體開放閱讀框17抗體

蛋白激酶C抗體

CST6重組小鼠 Cystatin E / CST6 蛋白 Protein

半胱蛋白酶抑制劑3(CST3)重組蛋白 Recombinant Cystatin 3 (CST3)

CSNK2A2重組人 CSNK2A2 / CK2A2 蛋白 Protein

CSNK1G2 Protein Human 重組人 CSNK1G2 蛋白

KLRC1 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 NKG2A / NKG2 / CD159A / KLRC1 蛋白 (Fc 標簽)

Angiotensin II receptor(Ang II 0.5mgAngiotensin II receptor(Ang II ) 血管緊張素Ⅱ受體(抗原)

CSNK1G2 Protein Human 重組人 CSNK1G2 蛋白

FZD10重組小鼠 Frizzled-10 / FZD10 蛋白 (Fc 標簽)(Fc 標簽) Protein

IL20RB Protein Rat 重組大鼠 IL20RB 蛋白 (Fc 標簽)

TEK重組人 Tie2 / CD202b / TEK 蛋白 (His & GST 標簽) Protein

人小氣道平滑肌細胞大鼠三葉因子3(TFF3)試劑盒 ，英文名： TFF3 ELISA Kit

Mouse signal ansduction molecule (Smad1) ELISA Kit 小鼠信號轉(zhuǎn)導分子(Smad1)試劑盒

Ratcalcitoningenerelatedpeptide,CGRPELISAKit 大鼠降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforHABPELISAKit大鼠透明質(zhì)酸結(jié)合蛋白

細胞半胱蛋白酶-7(CASPASE-7)活性熒光定量試劑盒20次

Ratverylateappearingaigen,VLAELISAKit大鼠遲現(xiàn)抗原(VLA)試劑盒規(guī)格：96T/48T