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詳細介紹
商品屬性：
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
心臟組織 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 內(nèi)皮細胞樣 | YS-01X7283 |
細胞簡介：
人心臟微血管內(nèi)皮分離自心臟組織；心臟是脊椎動物身體中最重要的一個器官，主要功能是為血液流動提供壓力，把血液運行至身體各個部分。心臟由心肌構(gòu)成，左心房、左心室、右心房、右心室四個腔組成。左右心房之間和左右心室之間均由間隔隔開，故互不相通，心房與心室之間有瓣膜（房室瓣），這些瓣膜使血液只能由心房流入心室，而不能倒流。心臟的作用是推動血液流動，向器官、組織提供充足的血流量，以供應(yīng)氧和各種營養(yǎng)物質(zhì)，并帶走代謝的終產(chǎn)物（如二氧化碳、無機鹽、尿素和尿酸等），使細胞維持正常的代謝和功能。心臟微血管內(nèi)皮細胞是組成心臟微血管腔面單層扁平上皮樣細胞，它所產(chǎn)生和分泌的生物活性物質(zhì)對維持血管張力、調(diào)節(jié)血壓、抗血栓形成等有重要作用，在心臟血管疾病的發(fā)病機制中有重要病理生理學(xué)意義。近年來大量研究表明，心肌微血管內(nèi)皮細胞的功能和病理改變直接影響心肌細胞功能，也是諸多毒素、炎癥因子及病毒等重要靶位，其作為體外研究的細胞模型在心肌缺血-再灌注發(fā)病機制和細胞間旁分泌細胞生長因子研究中起著重要作用。
原代細胞的培養(yǎng)條件：
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細胞要通過充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2、細胞接種時濃度要稍大一些，至少為5×108細胞/L；
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落，漂?。?/p>
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應(yīng)將原代細胞換液；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時，應(yīng)將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞；
2、短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行；
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi)，進行分瓶試驗；
4、長期培養(yǎng)時，淋巴細胞中要加入生長因子，白血病細胞中要加入少量的原患者血清，以利細胞生長；
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。
方法簡介：
公司實驗室分離的人心臟微血管內(nèi)皮采用膠原酶-混合消化法結(jié)合密度梯度離心法、最后通過內(nèi)皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測：
公司實驗室分離的人心臟微血管內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
包被條件 PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 內(nèi)皮細胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞傳代及凍存：
| 細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
| 如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
兔子巨噬細胞性蛋白1α試劑盒 兔子巨噬細胞性蛋白1α試劑盒 規(guī)格型號：96T/48T 兔子巨噬細胞性蛋白1α試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：兔子巨噬細胞性蛋白1α試劑盒、兔子巨噬細胞性蛋白1α 試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個月。
兔子抗中性粒細胞顆粒抗體試劑盒 兔子抗中性粒細胞顆?？贵w試劑盒 規(guī)格型號：96T/48T 兔子抗中性粒細胞顆?？贵w試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：兔子抗中性粒細胞顆粒抗體試劑盒、兔子抗中性粒細胞顆?？贵w試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個月。
兔子可溶性細胞間粘附分子1試劑盒 兔子可溶性細胞間粘附分子1試劑盒 規(guī)格型號：96T/48T 兔子可溶性細胞間粘附分子1試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：兔子可溶性細胞間粘附分子1試劑盒、兔子可溶性細胞間粘附分子1 試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個月。
兔子可溶性血管細胞粘附分子1試劑盒 兔子可溶性血管細胞粘附分子1試劑盒 規(guī)格型號：96T/48T 兔子可溶性血管細胞粘附分子1試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：兔子可溶性血管細胞粘附分子1試劑盒、兔子可溶性血管細胞粘附分子1 試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個月。
小鼠白介素23(IL-23)ELISA 試劑盒 96T/48T
People deoxidizing urine three phosphoric acid (DP) ELISA Kit 人脫氧尿三0酸(DP)試劑盒
HumanCalcitonin,CTELISAKit 人降鈣素(CT)試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humancarcinoembryonicaign,CEA試劑盒人癌胚抗原(CEA/CD66)試劑盒規(guī)格：96T/48T
重組腺病毒效價比色法定量試劑盒50次
HumansolubleClusterofdiffereiation86,sCD86ELISAKit人可溶性CD86(B7-2/sCD86)試劑盒規(guī)格：96T/48T
8號染色體開放閱讀框59抗體
低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白4抗體
GAG-P24重組人類免疫缺陷病毒Ⅰ型 HIV-1 p24 蛋白 (group M, subtype B, strain 92418) Protein
Thymosin Alpha-1 α-1 (-Thymosin alpha-1 0.5mgThymosin Alpha-1 α-1 (-Thymosin alpha-1)
OXSR1重組人 OXSR1 / OSR1 蛋白 (GST 標簽) Protein
GH1 Protein Human 重組人 GH1 / Growth hormone 1 蛋白
LAIR2 Protein Human 重組人 LAIR2 / CD306 蛋白
Thymosin Alpha-1 α-1 (-Thymosin alpha-1 0.5mgThymosin Alpha-1 α-1 (-Thymosin alpha-1)
GH1 Protein Human 重組人 GH1 / Growth hormone 1 蛋白
GAG-P24重組人類免疫缺陷病毒Ⅰ型 HIV-1 p24 蛋白 (group M, subtype B, strain 92418) Protein
LAIR2 Protein Human 重組人 LAIR2 / CD306 蛋白
OXSR1重組人 OXSR1 / OSR1 蛋白 (GST 標簽) Protein
人心臟微血管內(nèi)皮細胞大鼠軟骨糖蛋白39(GP39)試劑盒 ，英文名： GP39 ELISA Kit
Mouse bromodeoxyuridine (BrdU) ELISA Kit 小鼠溴脫氧核苷尿(BrdU)試劑盒
RatDehydroepiandrosterone,DHEAELISAKit 大鼠脫輕表雄酮(DHEA)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforHAELISAKit大鼠透明質(zhì)酸
細胞半乳糖總含量酶連續(xù)循環(huán)反應(yīng)比色法定量試劑盒20次
RatVascularEndothelialcellGrowthFactorD,VEGF-DELISAKit大鼠血管內(nèi)皮細胞生長因子D(VEGF-D)試劑盒規(guī)格：96T/48T
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