詳細介紹
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
牙髓組織 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 成纖維細胞樣 | YS-01X7669 |
細胞簡介:
人牙髓干分離自滑膜組織;牙髓組織位于牙齒內(nèi)部的牙髓腔內(nèi)。牙髓腔的外形與牙體形態(tài)大致相似,牙冠部髓腔較大,稱髓室,牙根部髓腔較細小,稱根管,根尖部有小孔,稱根尖孔。牙髓組織主要包含神經(jīng)、血管,淋巴和結締組織,還有排列在牙髓外周的造牙本質細胞,其作用是造牙本質。牙髓因受到病源刺激物的作用不同以及機體抵抗力的差異,出現(xiàn)不同的病理變化,在臨床上會表現(xiàn)為一系列不同的癥狀和體征。牙髓充血狀況持續(xù)時間較長后,轉化為急性牙髓炎癥。間充質干細胞(mesenchymal stem cells,MSCs)來源于胚胎時期的中胚層組織,具有很強的自我復制和多向分化潛能,具有向脂肪細胞、成骨細胞、軟骨細胞及肌細胞等多種終末細胞定向分化的能力,運用 MSCs來修復軟骨損傷具有很好的應用前景,目前已能夠從骨髓、脂肪、滑膜、骨骼、肌肉等組織以及羊水、臍帶、臍帶血中分離和制備間充質干細胞。
方法簡介:
公司實驗室分離的人牙髓干采用膠原酶消化法、低密度稀釋克隆制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
公司實驗室分離的人牙髓干經(jīng)CD90免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳3-5代左右
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
兔內(nèi)皮型合成酶試劑盒 兔內(nèi)皮型合成酶試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 兔內(nèi)皮型合成酶試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:兔內(nèi)皮型合成酶試劑盒、兔內(nèi)皮型合成酶試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。
兔基質金屬蛋白酶1試劑盒 兔基質金屬蛋白酶1試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 兔基質金屬蛋白酶1試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:兔基質金屬蛋白酶1試劑盒、兔基質金屬蛋白酶1試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。
兔子白介素2試劑盒 兔子白介素2試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 兔子白介素2試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:兔子白介素2試劑盒、兔子白介素2試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。
人α2巨球蛋白試劑盒 人α2巨球蛋白試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 人α2巨球蛋白試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:人α2巨球蛋白試劑盒、人α2巨球蛋白試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。
小鼠N-乙酰-β-D-基葡萄糖苷酶(NAG)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat ferritin (FE) ELISA Kit 大鼠鐵蛋白(FE)試劑盒
HumanDehydroepiandrosteronesulfate,DHEA-SELISAKit 人脫輕表雄酮硫酸酯(DHEA-S)試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanCobravenomneuronalprotectivefactor,CVNPF試劑盒人神經(jīng)保護因子(CVNPF)試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織3-0酸甘油脫氫酶(GAPDH)活性酶動力比色法定量試劑盒20次
HumaegulatedonactivationinnormalT-cellexpressedandsecreted,RAESELISAKit人正常T細胞表達和分泌因子(RAES/CCL5)試劑盒規(guī)格:96T/48T
AF680標記的過氧化酶活化增生受體γ抗體
多巴胺受體相互作用蛋白1抗體
NMNAT1重組人 NMNAT1 / NMNAT 蛋白 Protein
SPAG5/map126 相關抗原5(多肽抗原 0.5mgSPAG5/map126 相關抗原5(多肽抗原)
GPC3重組人 Glypican 3 / GPC3 / OCI-5 蛋白 Protein
HIST2H4A Protein Human 重組人 Histone H4 / HIST2H4A 蛋白
PTPN1 Protein Human 重組人 PTP1B / PTPN1 蛋白
SPAG5/map126 相關抗原5(多肽抗原 0.5mgSPAG5/map126 相關抗原5(多肽抗原)
HIST2H4A Protein Human 重組人 Histone H4 / HIST2H4A 蛋白
NMNAT1重組人 NMNAT1 / NMNAT 蛋白 Protein
PTPN1 Protein Human 重組人 PTP1B / PTPN1 蛋白
GPC3重組人 Glypican 3 / GPC3 / OCI-5 蛋白 Protein
人牙髓干細胞大鼠肉毒堿棕櫚?;D移酶2(CPT2)試劑盒 ,英文名: CPT2 ELISA Kit
Mouse angiotensinogen (aGT) ELISA Kit 小鼠血管緊張素原(aGT)試劑盒
RatThyroglobulin,TGELISAKit 大鼠甲狀腺球蛋白(TG)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforGzms-A(MousegranzymesA)ELISAKit小鼠顆粒酶A
細胞長鏈羥脂酰脫氫酶(HYDROXYACYLCOADEHYDROGENASE)活性比色法定量試劑盒20次
Raturokinaseplasminogenactivator,uPAELISAKit大鼠型纖溶酶原激活物(uPA)試劑盒規(guī)格:96T/48T
原代細胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂浮;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進行分瓶試驗;
4、長期培養(yǎng)時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。