人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞

人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品：NK細(xì)胞抑制性受體2DS3抗體 味覺受體蛋白家族2亞基7抗體 核糖核苷酸還原酶亞基R2抗體 人真皮成纖維細(xì)胞 人外周血單個核細(xì)胞 RKN人卵巢癌細(xì)胞 EB-3 (人Burkitt's淋巴瘤細(xì)胞)

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產(chǎn)品名稱：人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞

組織來源：羊膜

產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長特性：貼壁

細(xì)胞形態(tài)：成纖維細(xì)胞樣

傳代特性：可傳3-5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)優(yōu)良

消化液：0.25%

培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%

人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的優(yōu)良培養(yǎng)狀態(tài)。

細(xì)胞簡介：

人羊膜間充質(zhì)干分離自胎盤羊膜組織；胎盤(placenta)是哺乳動物妊娠期間由胚胎的胚膜和母體子宮內(nèi)膜聯(lián)合長成的母子間交換物質(zhì)的過渡性器官，由羊膜、葉狀絨毛膜和底蛻膜構(gòu)成。胎兒在子宮中發(fā)育，依靠胎盤從母體取得營養(yǎng)，而雙方保持相當(dāng)?shù)莫毩⑿?。胎盤還產(chǎn)生多種維持妊娠的激素，是一個重要的內(nèi)分泌器官。有些爬行類和魚類也以胎生方式繁殖后代，胚胎生長出一些輔助結(jié)構(gòu)如卵黃囊、鰓絲等與母體組織緊密結(jié)合，以達(dá)到母子間物質(zhì)的交換，這樣的結(jié)構(gòu)稱假胎盤。羊膜是胎盤的最內(nèi)層，與眼結(jié)膜組織結(jié)構(gòu)相似，含有眼表上皮細(xì)胞，包括結(jié)膜細(xì)胞和角膜上皮細(xì)胞生長所需要的物質(zhì)，其光滑，無血管、神經(jīng)及淋巴，具有一定的彈性；在電鏡下，其分為五層：上皮層、基底膜、致密層、纖維母細(xì)胞層和海綿層，羊膜基底膜和羊膜羊膜基質(zhì)層含有大量不同的膠元，主要為Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ型膠原和纖維粘連蛋白、層粘連蛋白等成份。羊膜細(xì)胞主要由羊膜上皮細(xì)胞和羊膜間充質(zhì)細(xì)胞組成，均具有多分化潛能，可轉(zhuǎn)化為神經(jīng)元，且還有合成、釋放生物活性物質(zhì)和神經(jīng)營養(yǎng)因子的功能。

方法簡介：

實驗室分離的人羊膜間充質(zhì)干采用 - 膠原酶混合酶消化后差速貼壁制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測：

實驗室分離的人羊膜間充質(zhì)干經(jīng)CD44免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)步驟：

一、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中），培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

二、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

a）、對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。

2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。

3.輕輕吹打細(xì)胞，脫落后吸出，在1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。

4. 按5-6ml/瓶補加培養(yǎng)液，將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。

b）、對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄上清液，補加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。

方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠生長激素釋放多肽(GHRP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠凝溶膠蛋白(Gelsolin)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠核因子κB受體活化因子配基(RANKL)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠血栓前體蛋白(TpP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠水通道蛋白2(AQP-2)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat maix metalloproteinase 10 (MMP-10) ELISA Kit 大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶10(MMP-10)試劑盒

HumanMucin-5subtypeAC,MUC5ACELISAKit 人粘蛋白/粘液素5AC(MUC5AC)試劑盒 96T/48T 進口分裝

DuckIerferonγ,IFN-γ試劑盒鴨γ干擾素(IFN-γ)試劑盒規(guī)格：96T/48T

載玻片細(xì)胞組蛋白熒光顯微鏡試劑盒10/20次

Mousediamineoxidase,DAOELISAKit小鼠氧化酶(DAO)試劑盒規(guī)格：96T/48T

APC標(biāo)記的單羧酸轉(zhuǎn)運蛋白2抗體

泛素特異性蛋白酶OTB1抗體

CES5A重組小鼠 CES5 / Carboxylesterase-5 蛋白 Protein

BCHE(butyrylcholinesterase 0.5mgBCHE(butyrylcholinesterase)CT 丁酰脂酶抗原(C端)

ENTPD5重組人 ENTPD5 蛋白 Protein

CLEC3B Protein Human 重組人 CLEC3B / Tetranectin 蛋白

COL4A3 Protein Rat 重組大鼠 COL4A3 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

BCHE(butyrylcholinesterase 0.5mgBCHE(butyrylcholinesterase)CT 丁酰脂酶抗原(C端)

CLEC3B Protein Human 重組人 CLEC3B / Tetranectin 蛋白

CES5A重組小鼠 CES5 / Carboxylesterase-5 蛋白 Protein

COL4A3 Protein Rat 重組大鼠 COL4A3 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

ENTPD5重組人 ENTPD5 蛋白 Protein

人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞大鼠熱休克蛋白β6(HSPβ6)試劑盒 ，英文名： HSPβ6 ELISA Kit

Mouse vascular endothelial cell growth factor receptor 1 (VEGFR-1) ELISA Kit 小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子受體1(VEGFR-1)試劑盒

RatAquaporin5,AQP-5ELISAKit 大鼠水通道蛋白5(AQP-5)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforGTE-AGE(HumanGlomerulaissueexact-advancedglycosylationendproducts)ELISAKit人腎小球組織糖基化終末產(chǎn)物

細(xì)胞超長鏈脂酰脫氫酶(ACYLCOADEHYDROGENASE)活性比色法定量試劑盒20次

Rattumornecrosisfactor-relatedapoptosis-inducingligand4,AILR4ELISAKit大鼠腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體4(AIL-R4)試劑盒規(guī)格：96T/48T

收到細(xì)胞如何處理？

1、首先，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請拍照，并及時與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）。

2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運輸問題，部分貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。⒓?xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。

4、靜置完成后，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài)。

5、貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長密度超過80%，可正常傳代；若未超過80%，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。

6、懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時，若細(xì)胞密度超過80%，可將細(xì)胞懸液分至2個細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)，補加培養(yǎng)基至5ml；若細(xì)胞密度未超過80%，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時再進行傳代操作