詳細(xì)介紹
本網(wǎng)站銷(xiāo)售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,不直接用于食品、藥品、臨床或動(dòng)物的診斷或治療!
產(chǎn)品名稱(chēng):人子宮內(nèi)膜干細(xì)胞
組織來(lái)源:子宮組織
產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳3代左右
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
人子宮內(nèi)膜干分離自子宮組織;子宮是孕育胎兒的器官,位于盆腔中部,膀胱與直腸之間,其位置可隨膀胱與直腸的充盈程度或體位而有變化。子宮的正常位置主要依靠子宮諸韌帶、盆膈、尿生殖膈及會(huì)陰中心腱等結(jié)構(gòu)維持,這些結(jié)構(gòu)受損或松弛時(shí),可以引起子宮脫垂。子宮內(nèi)膜即黏膜,由上皮(屬單層柱狀上皮,有分泌細(xì)胞和纖毛細(xì)胞二種)和固有膜(由結(jié)締組織構(gòu)成,其內(nèi)有大量的星形細(xì)胞,稱(chēng)為基質(zhì)細(xì)胞)組成,子宮內(nèi)膜可分為淺表的功能膜和深部的基底層,功能層較厚,約占內(nèi)膜厚度的4/5;基底層較薄較致密,約占1/5,功能層可剝脫,而基底層剝脫。子宮內(nèi)膜構(gòu)成雌性哺乳動(dòng)物子宮壁的最內(nèi)層,位于子宮腔面,在動(dòng)物生殖生理活動(dòng)中占有重要地位。子宮和子宮內(nèi)膜是維持雌性動(dòng)物生理功能和生育能力的重要器官,子宮內(nèi)膜的再生修復(fù)是子宮的重要生理功能。間充質(zhì)干細(xì)胞(mesenchymal stem cells,MSCs)來(lái)源于胚胎時(shí)期的中胚層組織,具有很強(qiáng)的自我復(fù)制和多向分化潛能,具有向脂肪細(xì)胞、成骨細(xì)胞、軟骨細(xì)胞及肌細(xì)胞等多種終末細(xì)胞定向分化的能力,運(yùn)用 MSCs來(lái)修復(fù)軟骨損傷具有很好的應(yīng)用前景,目前已能夠從骨髓、脂肪、滑膜、骨骼、肌肉等組織以及羊水、臍帶、臍帶血中分離和制備間充質(zhì)干細(xì)胞。體外培養(yǎng)的子宮內(nèi)膜干細(xì)胞細(xì)胞對(duì)于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。
方法簡(jiǎn)介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人子宮內(nèi)膜干采用膠原酶消化法、低密度稀釋克隆制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè):
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人子宮內(nèi)膜干經(jīng)CD90免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)步驟:
一、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中),培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
二、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a)、對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞,脫落后吸出,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液,將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b)、對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄上清液,補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠白介素1(IL-1)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠白介素1β(IL-1β)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠肌紅蛋白(MYO/MB)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠血栓素B2(TXB2)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠壞死因子樣弱凋亡因子(TWEAK)試劑盒 96T/48T
Ai human small nuclear ribonucleoprotein /Sm aibody (sNP/Sm) ELISA Kit 人抗小核糖核蛋白/Sm抗體(sNP/Sm)試劑盒
HumanE2/ubiquitin-conjugatingenzyme,E2/UBCEELISAKit 人泛素結(jié)合酶(E2/UBCE)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforACA-IgAELISAKit大鼠抗心0脂抗體IgA
一步法PCR反應(yīng)液20次
Mouseosteoclastdiffereiationfactor,ODFELISAKit小鼠破骨細(xì)胞分化因子(ODF)試劑盒規(guī)格:96T/48T
FBXW12蛋白抗體
核膜糖蛋白210抗體
TNFRSF14重組食蟹猴 HVEM / TNFRSF14 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
MADCAM-1 黏膜選址素(抗原 0.5mgMADCAM-1 黏膜選址素(抗原)
FCGR2A重組人 CD32a / FCGR2A 蛋白 (167 His, His 標(biāo)簽) Protein
ERH Protein Human 重組人 ERH / DROER 蛋白
MAPK1 Protein Mouse 重組小鼠 ERK2 / MAPK1 / MAPK2 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)
MADCAM-1 黏膜選址素(抗原 0.5mgMADCAM-1 黏膜選址素(抗原)
ERH Protein Human 重組人 ERH / DROER 蛋白
TNFRSF14重組食蟹猴 HVEM / TNFRSF14 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
MAPK1 Protein Mouse 重組小鼠 ERK2 / MAPK1 / MAPK2 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)
FCGR2A重組人 CD32a / FCGR2A 蛋白 (167 His, His 標(biāo)簽) Protein
人子宮內(nèi)膜干細(xì)胞大鼠能受體β1(ADRβ1)試劑盒 ,英文名: ADRβ1 ELISA Kit
Mouse iercellular adhesion molecule 1 (ICAM-1/CD54) ELISA Kit 小鼠細(xì)胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)試劑盒
RatTissue-typePlasiminogenActilyse,t-PAELISAKit 大鼠組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHBsAg(立可讀)乙型肝表面抗原
細(xì)胞β-半乳糖苷酶活性原位染色試劑盒100次
Sophorajaponicaagglinin,SJAELISAKit槐凝集素(SJA)試劑盒規(guī)格:96T/48T
收到細(xì)胞如何處理?
1、首先,觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有,請(qǐng)拍照,并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù))。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題,部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落;先不要打開(kāi)培養(yǎng)瓶蓋,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí),以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū),了解細(xì)胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸?。⒓?xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)。
5、貼壁細(xì)胞:若細(xì)胞生長(zhǎng)密度超過(guò)80%,可正常傳代;若未超過(guò)80%,移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細(xì)胞:將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無(wú)菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時(shí),若細(xì)胞密度超過(guò)80%,可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng),補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml;若細(xì)胞密度未超過(guò)80%,將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作