詳細(xì)介紹
本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,不直接用于食品、藥品、臨床或動(dòng)物的診斷或治療!
產(chǎn)品名稱:兔骺軟骨細(xì)胞
組織來源:生長板組織
產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每3-4天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 梭形、多角形
傳代特性 可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)優(yōu)良
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細(xì)胞簡介:
兔骺軟骨分離自骨骺生長板;骨骺生長板位于長骨兩端骨骺和骨干之間的軟骨組織,其中的骺軟骨細(xì)胞可分裂、成熟、肥大,最終被骨組織所替換,對于長骨生長具有重要作用。幼稚的骺軟骨細(xì)胞位于軟骨組織的表層,單個(gè)分布、體積較小、呈橢圓形,長軸與軟骨表面平行,越向深層的骺軟骨細(xì)胞體積之間增大呈圓形,細(xì)胞核圓形或卵圓形,染色淺,細(xì)胞質(zhì)弱嗜堿性,常見數(shù)量不一的脂滴。成熟的骺軟骨細(xì)胞多2-8個(gè)成群分布于軟骨陷窩內(nèi),這些骺軟骨細(xì)胞由同一個(gè)母細(xì)胞分裂增殖而成,稱為同源細(xì)胞群。電鏡下,骺軟骨細(xì)胞有突起和皺褶,細(xì)胞質(zhì)內(nèi)有大量的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和發(fā)達(dá)的高爾基復(fù)合體及少量的線粒體。在組織切片中,骺軟骨細(xì)胞收縮為不規(guī)則形,在軟骨囊和細(xì)胞之間出現(xiàn)較大的腔隙。體外培養(yǎng)的骺軟骨細(xì)胞對于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。
方法簡介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的兔骺軟骨采用膠原酶-聯(lián)合消化并軟骨細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的兔骺軟骨經(jīng)Ⅱ型膠原蛋白免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)步驟:
一、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中),培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
二、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a)、對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞,脫落后吸出,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液,將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b)、對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄上清液,補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
收到細(xì)胞如何處理?
1、首先,觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有,請拍照,并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù))。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題,部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí),以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸浮)、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細(xì)胞:若細(xì)胞生長密度超過80%,可正常傳代;若未超過80%,移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細(xì)胞:將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時(shí),若細(xì)胞密度超過80%,可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml;若細(xì)胞密度未超過80%,將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作
公司正在出售的產(chǎn)品:
水土中亞鹽含量測定試劑盒 可見分光光度法 50管/48樣
血糖含量試劑盒 酶標(biāo)法 50管/48樣
動(dòng)植物組織葡萄糖含量試劑盒 酶標(biāo)法 50管/48樣
動(dòng)植物組織葡萄糖含量試劑盒 可見分光光度法 50管/48樣
豚鼠乙型肝病毒表面抗原(HBsAg)試劑盒 ,英文名: HBsAg ELISA Kit
Human protein tyrosine kinase (PTK/CD115) ELISA Kit 人蛋白酪激酶(PTK/CD115)試劑盒
Monkeyai-livercellmembraneaibody,LMAELISAKit 猴抗肝細(xì)胞膜抗體(LMA)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforBMP-4(HumanBonemorphogeneticprotein4)ELISAKi人骨成型蛋白4
細(xì)菌鎂離子濃度酶反應(yīng)光譜法定量試劑盒20次
rabbitmaixmetalloproteinase5,MMP-5ELISAKit兔子基質(zhì)金屬蛋白酶5(MMP-5)試劑盒規(guī)格:96T/48T
PerCP-Cy5.5標(biāo)記人CD69單克隆抗體
跨膜蛋白9超家族成員4抗體
GB重組巨細(xì)胞病毒 HCMV Glycoprotein B / gB 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
TNFAIP1(Tumor necrosis factor-alpha-induced protein 1 0.5mgTNFAIP1(Tumor necrosis factor-alpha-induced protein 1) 壞死因子α誘導(dǎo)蛋白1抗原
AGO2重組人 AGO2 / Argonaute 2 / EIF2C2 蛋白 Protein
IGFL2 Protein Human 重組人 IGFL2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
TGFBI Protein Human 重組人 TGFBI / BIGH3 蛋白
TNFAIP1(Tumor necrosis factor-alpha-induced protein 1 0.5mgTNFAIP1(Tumor necrosis factor-alpha-induced protein 1) 壞死因子α誘導(dǎo)蛋白1抗原
IGFL2 Protein Human 重組人 IGFL2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
GB重組巨細(xì)胞病毒 HCMV Glycoprotein B / gB 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
TGFBI Protein Human 重組人 TGFBI / BIGH3 蛋白
AGO2重組人 AGO2 / Argonaute 2 / EIF2C2 蛋白 Protein
兔骺軟骨細(xì)胞大鼠淋巴細(xì)胞功能關(guān)聯(lián)抗原1α(LFA1α)試劑盒 ,英文名: LFA1α ELISA Kit
Monkey ierleukin 2 receptor (IL-2R) ELISA Kit白介素2受體(IL-2R)試劑盒
RatLDL-ICELISAKit 大鼠低密度脂蛋白免疫復(fù)合物(LDL-IC)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforGAP(HumanGTPaseactivatingprotein)ELISAKit人GTP酶活化蛋白
細(xì)胞骨架(肌動(dòng)蛋白單體;G-ACTIN)紅色熒光染色試劑盒10次
RatproteinkinaseB,PKBELISAKit大鼠蛋白激酶B(PKB)試劑盒規(guī)格:96T/48T