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兔外周血巨噬細(xì)胞

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更新時(shí)間:2024-11-04 09:32:45瀏覽次數(shù):101

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
貨號(hào) YS-01X7152 主要用途 僅供科研研究實(shí)驗(yàn)
兔外周血巨噬細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品:低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白5+6抗體 FRMD3蛋白抗體 SLU7蛋白抗體 兔心臟微血管內(nèi)皮細(xì)胞 人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 NCI-H1672 [H1672] 人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞 HMy2.CIR (人B淋巴母細(xì)胞)

詳細(xì)介紹

兔外周血巨噬細(xì)胞

兔外周血巨噬細(xì)胞

商品屬性:

組織來源

產(chǎn)品規(guī)格

細(xì)胞形態(tài)

貨號(hào)

外周血

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

巨噬細(xì)胞樣

YS-01X7152

細(xì)胞簡(jiǎn)介:

兔外周血巨噬分離自外周血;外周血是除骨髓之外的血液,臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細(xì)胞釋放到血液中,再在從血液中提取分離得到造血干細(xì)胞,我們把這樣得到的干細(xì)胞稱為外周血干細(xì)胞,在二十一世紀(jì)初人類開始的生命方舟計(jì)劃中提出外周血這一新概念。巨噬細(xì)胞屬免疫細(xì)胞,有多種功能,是研究細(xì)胞吞噬、細(xì)胞免疫和分子免疫學(xué)的重要對(duì)象。巨噬細(xì)胞較易獲得,便于培養(yǎng),并可進(jìn)行純化。巨噬細(xì)胞屬不繁殖細(xì)胞群,在條件適宜下可生活2-3周,多用做原代培養(yǎng),難以長(zhǎng)期生存。巨噬細(xì)胞(Macrophages)是一種位于組織內(nèi)的白血球,源自單核細(xì)胞,而單核細(xì)胞又來源于骨髓中的前體細(xì)胞。巨噬細(xì)胞和單核細(xì)胞皆為吞噬細(xì)胞,在脊椎動(dòng)物體內(nèi)參與非特異性防衛(wèi)(先天性免疫)和特異性防衛(wèi)(細(xì)胞免疫)。它們的主要功能是以固定細(xì)胞或游離細(xì)胞的形式對(duì)細(xì)胞殘片及病原體進(jìn)行噬菌作用(即吞噬以及消化),并激活淋巴球或其他免疫細(xì)胞,令其對(duì)病原體作出反應(yīng)。

方法簡(jiǎn)介:

公司實(shí)驗(yàn)室分離的兔外周血巨噬采用取外周血、通過密度梯度離心法、差速貼壁、細(xì)胞因子誘導(dǎo)法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測(cè):

公司實(shí)驗(yàn)室分離的兔外周血巨噬經(jīng)CD68免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBVHCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、PenicillinStreptomycin

換液頻率 每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 巨噬細(xì)胞樣

傳代特性 屬于終末分化細(xì)胞;屬于不增殖細(xì)胞群

消化液 (12mM

培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO25%

兔外周血巨噬細(xì)胞

細(xì)胞傳代及凍存:

細(xì)胞傳代步驟細(xì)胞凍存步驟
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:

  ① 組織塊培養(yǎng)法

  組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。

  ② 消化培養(yǎng)法

 ?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

  對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

  ④器官培養(yǎng)

  器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

兔外周血巨噬細(xì)胞


公司正在出售的產(chǎn)品:

小鼠絨毛膜β(β-CG)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠性激素結(jié)合球蛋白(SHBG)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠脫氫表雄S7(DHEA-S7)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠脫氫表雄(DHEA)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠生長(zhǎng)調(diào)節(jié)致癌基因β/黑素瘤生激因子(GROβ/CXCL2/MGSA)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human immunoglobulin G receptor Fc section III (Fc gamma R III /CD16) ELISA Kit G Fc段受體Ⅲ(FcγR/CD16)試劑盒

Humanmyelinbasicprotein,MBPELISAKit 人髓0脂堿性蛋白(MBP)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

EquineImmunoglobulinE,IgE試劑盒馬免疫球蛋白E(IgE)試劑盒規(guī)格:96T/48T

真菌/酵母β-(β-AMYLASE)活性DNS比色法定量試劑盒20

MouseCoisolELISAKit小鼠(Coisol)試劑盒規(guī)格:96T/48T

AF750標(biāo)記的促腎上腺皮質(zhì)激素受體

熱休克蛋白71抗體

NOV重組食蟹猴 / 恒河猴 CCN3 / NOV 蛋白 Protein

IGFBP-2 (Insulin-like Growth Factor Binding Protein 2 0.5mgIGFBP-2 (Insulin-like Growth Factor Binding Protein 2) 胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白-2(多肽)

CCL8重組人 CCL8 / MCP-2 蛋白 (SUMO 標(biāo)簽) Protein

CNPY2 Protein Human 重組人 CNPY2 蛋白

CHODL Protein Mouse 重組小鼠 CHODL / Chondrolectin 蛋白

IGFBP-2 (Insulin-like Growth Factor Binding Protein 2 0.5mgIGFBP-2 (Insulin-like Growth Factor Binding Protein 2) 胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白-2(多肽)

CNPY2 Protein Human 重組人 CNPY2 蛋白

NOV重組食蟹猴 / 恒河猴 CCN3 / NOV 蛋白 Protein

CHODL Protein Mouse 重組小鼠 CHODL / Chondrolectin 蛋白

CCL8重組人 CCL8 / MCP-2 蛋白 (SUMO 標(biāo)簽) Protein

兔外周血巨噬細(xì)胞大鼠極低密度脂蛋白受體(VLDLR)試劑盒 ,英文名: VLDLR ELISA Kit

Mouse tumor necrosis factor related apoptosis inducing ligand 1 (AIL-R1) ELISA Kit 小鼠腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體1(AIL-R1)試劑盒

RatOsteoprotegerinLigand,OPGLELISAKit 大鼠骨保護(hù)素配體(OPGL)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforFDPELISAKit大鼠血纖蛋白原降解產(chǎn)物

細(xì)胞基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP-3)活性熒光定量試劑盒20

ratNoradrenaline,NAELISAKit大鼠去甲(NA)試劑盒規(guī)格:96T/48T

原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:

  一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)

  1、細(xì)胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;

  2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L;

  3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);

  4、 胎牛血清濃度為10%-80%

  5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

  6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂??;

  7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;

  8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。

  二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)

  1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞;

  2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;

  3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗(yàn);

  4、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí),淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長(zhǎng);

  5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;

  6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行


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