詳細介紹
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
腦組織 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 梭形、多角形 | YS-01X7504 |
細胞簡介:
小鼠NG2分離自腦組織;大腦分左右兩個半球,大腦皮質(zhì)(灰質(zhì))覆蓋著每個大腦半球的大部分,它是神經(jīng)元胞體集中的地方。內(nèi)部則是由神經(jīng)纖維或髓鞘構成的白質(zhì)。每一個半球都有三個面,即外側面(約占整個皮質(zhì)面積的1/3)、內(nèi)側面和底面(占2/3的面積);半球表面有很多深淺不等的溝或裂,溝或裂之間的隆起叫回,它們大大增加了大腦的表面積;大腦外側面重要的溝、裂有大腦外側裂、頂枕裂和中央溝。由于三溝裂之界隔,使大腦皮質(zhì)組分為額葉、頂葉、顳葉、枕葉四大部分。NG2細胞是在發(fā)育和成年中樞神經(jīng)系統(tǒng)的灰質(zhì)和白質(zhì)束中發(fā)現(xiàn)的,因表達NG2蛋白多糖而得名。NG2細胞先前被假定代表少突膠質(zhì)細胞前體細胞,后來使用轉基因的研究表明,NG2細胞在體內(nèi)不僅能夠產(chǎn)生少突膠質(zhì)細胞,還能產(chǎn)生原漿性星形膠質(zhì)細胞以及某些情況下的神經(jīng)元。NG2細胞是中樞神經(jīng)系統(tǒng)中不同于神經(jīng)元、成熟少突膠質(zhì)細胞、星形膠質(zhì)細胞和小膠質(zhì)細胞的一類細胞亞群。此外,在發(fā)育和成年中樞神經(jīng)系統(tǒng)的多個區(qū)域,發(fā)現(xiàn)NG2細胞和神經(jīng)元之間存在的突觸聯(lián)系,暗示NG2細胞除了可能作為分化成多種細胞的可塑性前體細胞群,還可能會和神經(jīng)元聯(lián)系從而形成一個的神經(jīng)膠質(zhì)網(wǎng)絡。
方法簡介:
公司實驗室分離的小鼠NG2采用消化、專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實驗室分離的小鼠NG2經(jīng)NG2免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 梭形、多角形
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
豬熱休克蛋白40試劑盒 豬熱休克蛋白40試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 豬熱休克蛋白40試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:豬熱休克蛋白40試劑盒、豬熱休克蛋白40eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
豬熱休克蛋白20試劑盒 豬熱休克蛋白20試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 豬熱休克蛋白20試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:豬熱休克蛋白20試劑盒、豬熱休克蛋白20eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
豬去甲上腺素試劑盒 豬去甲上腺素試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 豬去甲上腺素試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:豬去甲上腺素試劑盒、豬去甲上腺素eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
豬腦素試劑盒 豬腦素試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 豬腦素試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:豬腦素試劑盒、豬腦素eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
豬神經(jīng)特異性烯醇化酶(NSE)試劑盒
Human kallikrein 6 (KLK 6) ELISA Kit 人6(KLK 6)試劑盒
GuineaPigIerleukin1receptoraagonist,IL-1raELISAkit 豚鼠白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)試劑盒 進口分裝
CLIAKitforANG(HumanAngiogenin)ELISAKit人血管生長素
血液脯(proline)含量比色法定量試劑盒20次
PorcineEndothelialniicoxidesyhase3,eNOS-3ELISAKit豬內(nèi)皮型合成酶3(eNOS-3)試劑盒
G蛋白P21 RAC2抗體
透明質(zhì)酸合成酶2抗體
BACE1重組人 BACE1 / ASP2 蛋白 Protein
角蛋白20(KRT20)重組蛋白 Recombinant Keratin 20 (KRT20)
COL9A1重組人 COL9A1 蛋白 Protein
B2M Protein Human 重組人 B2M / Beta-2-microglobulin 蛋白 (His 標簽)
HA Protein H3N2 重組甲型流感 H3N2 (A/Fujian/411/2002) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 標簽)
角蛋白20(KRT20)重組蛋白 Recombinant Keratin 20 (KRT20)
B2M Protein Human 重組人 B2M / Beta-2-microglobulin 蛋白 (His 標簽)
BACE1重組人 BACE1 / ASP2 蛋白 Protein
HA Protein H3N2 重組甲型流感 H3N2 (A/Fujian/411/2002) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 標簽)
COL9A1重組人 COL9A1 蛋白 Protein
小鼠NG2細胞大鼠黃體生成素釋放激素(LHRH)試劑盒 ,英文名: LHRH ELISA Kit
Rabbit peroxisome proliferator activated receptor gamma (PPAR- gamma) ELISA Kit 兔過氧化物酶體增殖因子活化受體γ(PPAR-γ)試劑盒
腦膜奈瑟菌A群(NM-A)核酸試劑盒 48T
CLIAKitforMousemucin-5subtypeB,MUC5BELISAkit小鼠粘蛋白/粘液素5B
體液胱(cystine)含量高效液相色譜法定量試劑盒20次
ELISAKit26SPSM人26S蛋白酶體
原代細胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂??;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進行分瓶試驗;
4、長期培養(yǎng)時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行