詳細(xì)介紹
商品屬性:
組織來(lái)源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號(hào) |
睪丸組織 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 成纖維細(xì)胞樣 | YS-01X7405 |
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
小鼠睪丸支持分離自睪丸;睪丸支持細(xì)胞又稱Sertoli細(xì)胞,在體內(nèi)呈不規(guī)則的高錐體形,細(xì)胞基部附著在基膜上,頂部伸至曲精小管腔面。它是生精細(xì)胞的支架,為其提供必需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),能合成與分泌雄激素結(jié)合蛋白,為其提供高濃度的雄激素環(huán)境等,還具有構(gòu)成血-睪屏障,形成睪丸內(nèi)微環(huán)境,調(diào)節(jié)發(fā)生等功能。睪丸支持細(xì)胞是睪丸的主要組成細(xì)胞,能分泌多種生長(zhǎng)因子和免疫抑制因子,不僅可為提供營(yíng)養(yǎng)支持和免疫保護(hù),也能對(duì)其他細(xì)胞,如胰島和神經(jīng)細(xì)胞提供營(yíng)養(yǎng)支持,而且當(dāng)其與胰島或神經(jīng)細(xì)胞共移植時(shí),也能夠?yàn)檫@些細(xì)胞提供免疫保護(hù),提高植活率。因此,睪丸支持細(xì)胞在細(xì)胞移植中具有廣泛的應(yīng)用前景。制備高活率的Sertoli不僅對(duì)Sertoli的基礎(chǔ)研究有重要價(jià)值,而且在發(fā)生等領(lǐng)域有重要意義。
方法簡(jiǎn)介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠睪丸支持采用膠原酶消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè):
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠睪丸支持經(jīng)Fas-L免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳3代左右
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細(xì)胞傳代及凍存:
細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白 -4(IGFBP-4) 作用: ELISA 規(guī)格: 進(jìn)口分裝
免疫球蛋白 IgA(IgA) 作用: ELISA 規(guī)格: 進(jìn)口分裝
免疫球蛋白 IgE(IgE) 作用: ELISA 規(guī)格: 進(jìn)口分裝
免疫球蛋白 IgG(IgG) 作用: ELISA 規(guī)格: 進(jìn)口分裝
鴨脂肪甘油三酯酯酶(ATGL)試劑盒
Human ai Punje cell aibodies / ai Yo aibody (PCA-1/Yo) ELISA Kit 人抗浦肯野細(xì)胞抗體/抗Yo抗體(PCA-1/Yo)試劑盒
HumaeceptoractivatorofnuclearfactorkappaBligand,RANKLELISAKit 人核因子κB受體活化因子配基(RANKL)試劑盒 進(jìn)口分裝
CLIAKitforACTHELISAKit魚(yú)促腎上腺皮質(zhì)激素
血液組織纖維型蛋白溶酶原激活劑(tPA)活性熒光定量試劑盒20次
MousePlatelet-DerivedGrowthFactorSolubleReceptorα,PDGFsR-αELISAKit小鼠血小板衍生生長(zhǎng)因子可溶性受體α(PDGFsR-α)試劑盒
WD重復(fù)蛋白16抗體
氧化低密度脂蛋白單克隆抗體
IGFBP6重組小鼠 IGFBP6 / IBP-6 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
ABCG1 peptide 三0酸腺苷結(jié)合盒亞家族G1抗原 0.5mgABCG1 peptide 三0酸腺苷結(jié)合盒亞家族G1抗原
MMP19重組人 RASI-1 / MMP19 蛋白 Protein
CALML5 Protein Human 重組人 CALML5 / CLSP 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)
TNFRSF17 Protein Rat 重組大鼠 TNFRSF17 / BCMA 蛋白
ABCG1 peptide 三0酸腺苷結(jié)合盒亞家族G1抗原 0.5mgABCG1 peptide 三0酸腺苷結(jié)合盒亞家族G1抗原
CALML5 Protein Human 重組人 CALML5 / CLSP 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)
IGFBP6重組小鼠 IGFBP6 / IBP-6 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
TNFRSF17 Protein Rat 重組大鼠 TNFRSF17 / BCMA 蛋白
MMP19重組人 RASI-1 / MMP19 蛋白 Protein
小鼠睪丸支持細(xì)胞大鼠胱天蛋白酶3(Casp-3)試劑盒 ,英文名: Casp-3 ELISA Kit
Rabbit collagen type I (Col I) ELISA Kit 兔子Ⅰ型膠原(Col Ⅰ)試劑盒
(229E/NL63)核酸試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?span>) 48T
CLIAKitforMMP-3ELISAkit大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶3
體液基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP-2)琥珀酰明膠法比色定量試劑盒20次
ELISAKienin犬腎素
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過(guò)充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂??;
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗(yàn);
4、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí),淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長(zhǎng);
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行