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小鼠鞏膜成纖維細(xì)胞

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
貨號(hào) YS-01X7740 主要用途 僅供科研研究實(shí)驗(yàn)
小鼠鞏膜成纖維細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品:MCART2蛋白抗體 同源三聚體鋅指蛋白ZHX3抗體 TIP30蛋白抗體 小鼠骨髓來(lái)源巨噬細(xì)胞 大鼠牙乳頭細(xì)胞 Hs 695T人黑素瘤細(xì)胞 HeLa.S3人宮頸癌細(xì)胞

詳細(xì)介紹

小鼠鞏膜成纖維細(xì)胞

小鼠鞏膜成纖維細(xì)胞

商品屬性:

組織來(lái)源

產(chǎn)品規(guī)格

細(xì)胞形態(tài)

貨號(hào)

鞏膜組織

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

成纖維細(xì)胞樣

YS-01X7740

細(xì)胞簡(jiǎn)介:

小鼠鞏膜成纖維分離自鞏膜組織,鞏膜是眼球壁的主要組成之一。是眼球纖維膜的后5/6部分。前方聯(lián)接角膜,后方與視神經(jīng)的鞘膜延續(xù)。鞏膜在視神經(jīng)穿出部附近最厚,愈前愈薄,在肌腱附著處又復(fù)增厚。其與角膜交界處,外面有環(huán)形的角膜溝,深部有鞏膜靜脈竇。小兒的鞏膜為淺藍(lán)色,成年為白色,老年因脂肪沉著而帶黃色。鞏膜結(jié)構(gòu)堅(jiān)韌,有支持和保護(hù)眼內(nèi)組織的作用。成纖維細(xì)胞是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分,由胚胎時(shí)期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來(lái);成纖維細(xì)胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細(xì)胞功能活動(dòng)旺盛,細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性,具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動(dòng),在一定條件下,它可以實(shí)現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化;成纖維細(xì)胞對(duì)不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的肺成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養(yǎng)基中。30min細(xì)胞貼壁,其中部分開(kāi)始伸出偽足,表現(xiàn)為小的突起;6h后細(xì)胞基本貼壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長(zhǎng),不聚集成團(tuán);細(xì)胞生長(zhǎng)迅速,5-7天即呈融合狀態(tài),細(xì)胞排列緊密,有的交叉重疊生長(zhǎng),平坦、胞體較大,細(xì)胞質(zhì)透明,細(xì)胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細(xì)胞融合,并彼此連接成網(wǎng)狀;細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。

方法簡(jiǎn)介:

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠鞏膜成纖維采用混合膠原酶消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測(cè):

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠鞏膜成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin

換液頻率 每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣

傳代特性 可傳1-3代左右

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO25%

小鼠鞏膜成纖維細(xì)胞

細(xì)胞傳代及凍存:

細(xì)胞傳代步驟細(xì)胞凍存步驟
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:

  ① 組織塊培養(yǎng)法

  組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。

 ?、?消化培養(yǎng)法

 ?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

  對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

  ④器官培養(yǎng)

  器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

小鼠鞏膜成纖維細(xì)胞


公司正在出售的產(chǎn)品:

胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白-1   英文名稱(chēng):   insulin-like growth factors binding protein-1   規(guī)格:      英文縮寫(xiě):   IGFBP-1

胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白-2   英文名稱(chēng):   insulin-like growth factors binding protein-2   規(guī)格:      英文縮寫(xiě):   IGFBP-2

胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白-3   英文名稱(chēng):   insulin-like growth factors binding protein-3   規(guī)格:      英文縮寫(xiě):   IGFBP-3

胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白-4   英文名稱(chēng):   insulin-like growth factors binding protein-4   規(guī)格:      英文縮寫(xiě):   IGFBP-4

鴨脂肪酸合成酶(FAS)試劑盒

Human ai smooth muscle aibody (ASMA) ELISA Kit 人抗平滑肌抗體(ASMA)試劑盒

HumaninhibinB,INH-BELISAKit 人抑制素B(INH-B)試劑盒 進(jìn)口分裝

CLIAKitforACTH(mouseadrencocoicoopichormone)ELISAKit小鼠促腎上腺皮質(zhì)激素

血液組織纖維型蛋白溶酶原激活劑(tPA)活性化學(xué)發(fā)光法定量試劑盒20

MouseProAialNaiureticPeptide,Pro-ANPELISAKit小鼠前心肽(Pro-ANP)試劑盒

ZC3H7A蛋白抗體

一氧化氮合成酶-3(內(nèi)皮型)抗體

ENPEP重組小鼠 ENPEP / Aminopeptidase A 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

彈性蛋白酶4(ELA4)重組蛋白 Recombinant Elastase 4 (ELA4)

JTB重組人 Jumping Translocation Breakpoint / JTB 蛋白  Protein

CALML5 Protein Human 重組人 CALML5 / CLSP 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)

FGFR1 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 FGFR1 / CD331 蛋白

彈性蛋白酶4(ELA4)重組蛋白 Recombinant Elastase 4 (ELA4)

CALML5 Protein Human 重組人 CALML5 / CLSP 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)

ENPEP重組小鼠 ENPEP / Aminopeptidase A 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

FGFR1 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 FGFR1 / CD331 蛋白

JTB重組人 Jumping Translocation Breakpoint / JTB 蛋白  Protein

小鼠鞏膜成纖維細(xì)胞大鼠胱硫醚γ裂解酶(CSE)試劑盒 ,英文名: CSE ELISA Kit

Rabbit collagen type II (Col II) ELISA Kit 兔子Ⅱ型膠原(Col )試劑盒

鼻病毒(RV)核酸試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?span>) 48T

CLIAKitforMMP-2/GelatinaseA(HumanMaixmetalloproteinase2/GelatinaseA)ELISAkit人基質(zhì)金屬蛋白酶2/明膠酶A

體液基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP-2)活性熒光定量試劑盒20

ELISAKitT3犬三甲狀腺原

原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:

  一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)

  1、細(xì)胞要通過(guò)充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;

  2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L;

  3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);

  4、 胎牛血清濃度為10%-80%

  5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

  6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂?。?/p>

  7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;

  8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。

  二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)

  1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞;

  2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;

  3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗(yàn);

  4、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí),淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長(zhǎng);

  5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;

  6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行


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