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小鼠關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞

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更新時間:2024-11-04 11:24:39瀏覽次數(shù):114

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
貨號 YS-01X7318 主要用途 僅供科研研究實(shí)驗(yàn)
小鼠關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品:MED30蛋白抗體 GalNAc-T7蛋白抗體 跨膜蛋白176A抗體 小鼠呼吸道上皮細(xì)胞 大鼠心肌成纖維細(xì)胞 GM09197NIGMS人類遺傳細(xì)胞庫 三核苷酸擴(kuò)增細(xì)胞 lovo人結(jié)直腸癌細(xì)胞

詳細(xì)介紹

小鼠關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞

小鼠關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞

商品屬性:

組織來源

產(chǎn)品規(guī)格

細(xì)胞形態(tài)

貨號

關(guān)節(jié)軟骨組織

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

梭形、多角形

YS-01X7318

細(xì)胞簡介:

小鼠關(guān)節(jié)軟骨分離自關(guān)節(jié)軟骨組織;關(guān)節(jié)軟骨屬于透明軟骨,表面光滑、呈淡藍(lán)色、有光澤,它是由一種特殊的叫做致密結(jié)締組織的膠原纖維構(gòu)成的基本框架,這種框架呈半環(huán)形,類似拱形球門,其底端緊緊附著在下面的骨質(zhì)上,上端朝向關(guān)節(jié)面,這種結(jié)構(gòu)使關(guān)節(jié)軟骨緊緊與骨結(jié)合起來而不會掉下來,同時當(dāng)受到壓力時候,還可以有少許的變形,起到緩沖壓力的作用。在這些纖維之間,散在分布著軟骨細(xì)胞,軟骨細(xì)胞由淺層向深層逐漸由扁平樣至橢圓或圓形的細(xì)胞組成,這些軟骨細(xì)胞維持關(guān)節(jié)軟骨的正常代謝。關(guān)節(jié)軟骨沒有神經(jīng)支配,也沒有血管,其營養(yǎng)成分必須從關(guān)節(jié)液中取得,而其代謝廢物也必須排至關(guān)節(jié)液中,關(guān)節(jié)軟骨的這種營養(yǎng)代謝必須通過關(guān)節(jié)運(yùn)動,使關(guān)節(jié)軟骨不斷的受到壓力刺激才行,所以關(guān)節(jié)運(yùn)動對于維持關(guān)節(jié)軟骨的正常結(jié)構(gòu)起重要的作用。關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞位于關(guān)節(jié)軟骨陷窩內(nèi)。幼稚的關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞位于關(guān)節(jié)軟骨組織的表層,單個分布、體積較小、呈橢圓形,長軸與關(guān)節(jié)軟骨表面平行,越向深層的關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞體積之間增大呈圓形,細(xì)胞核圓形或卵圓形、染色淺,細(xì)胞質(zhì)弱嗜堿性,常見數(shù)量不一的脂滴。成熟的關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞多2-8個成群分布于關(guān)節(jié)軟骨陷窩內(nèi),這些關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞由同一個母細(xì)胞分裂增殖而成,稱為同源細(xì)胞群。電鏡下,關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞有突起和皺褶,細(xì)胞質(zhì)內(nèi)有大量的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和發(fā)達(dá)的高爾基復(fù)合體及少量的線粒體。在組織切片中,關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞收縮為不規(guī)則形,在軟骨囊和細(xì)胞之間出現(xiàn)較大的腔隙。體外培養(yǎng)的關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞對于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。

方法簡介:

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠關(guān)節(jié)軟骨采用膠原酶聯(lián)合消化制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測:

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠關(guān)節(jié)軟骨經(jīng)Ⅱ型膠原蛋白免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin

換液頻率 每3-4天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 梭形、多角形

傳代特性 可傳2-3代左右

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%

小鼠關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞

細(xì)胞傳代及凍存:

細(xì)胞傳代步驟細(xì)胞凍存步驟
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:

  ① 組織塊培養(yǎng)法

  組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。

 ?、?消化培養(yǎng)法

 ?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

  對于懸浮生長的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

 ?、芷鞴倥囵B(yǎng)

  器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

小鼠關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞


公司正在出售的產(chǎn)品:

血紅素氧化酶   英文名稱:   heme oxygenase-1   規(guī)格:      英文縮寫:   HO-1

熱休克蛋白27   英文名稱:   Heat shock protein 27   規(guī)格:      英文縮寫:   HSP27

熱休克蛋白70   英文名稱:   Heat shock protein 70   規(guī)格:      英文縮寫:   HSP70

HA絲酸肽酶1   英文名稱:   high temperature requireme A   規(guī)格:      英文縮寫:   Ha 1

小鼠載脂蛋白A1(apo-A1)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human ai neuophil granules aibody (ANGA) ELISA Kit 人抗中性粒細(xì)胞顆??贵w(ANGA)試劑盒

Humanclusterin,CLUELISAKit 人凝聚素(CLU)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitfor8-OHdG(Mouse8-Hydroxy-desoxyguanosine)ELISAKit小鼠8羥基脫氧鳥苷

乙酸待測樣品處理試劑盒20

Mousemyeloperoxidase,MPOELISAKit小鼠髓過氧化物酶(MPO)試劑盒規(guī)格:96T/48T

13號染色體開放閱讀框38抗體

整合素β1CD29)重組兔單克隆抗體

CALM2重組人 Calmodulin 2 / CALM2 蛋白 Protein

Substance P Receptor (Neurokinin receptor1;Tachykinin receptor1 0.5mgSubstance P Receptor (Neurokinin receptor1;Tachykinin receptor1) P物質(zhì)受體(抗原)

SERPINA7重組人 SerpinA7 / TBG 蛋白 Protein

CCL2 Protein Human 重組人 CCL2 / MCP-1 / MCP1 蛋白

TIMP1 Protein Human 重組人 TIMP-1 / TIMP1 蛋白

Substance P Receptor (Neurokinin receptor1;Tachykinin receptor1 0.5mgSubstance P Receptor (Neurokinin receptor1;Tachykinin receptor1) P物質(zhì)受體(抗原)

CCL2 Protein Human 重組人 CCL2 / MCP-1 / MCP1 蛋白

CALM2重組人 Calmodulin 2 / CALM2 蛋白 Protein

TIMP1 Protein Human 重組人 TIMP-1 / TIMP1 蛋白

SERPINA7重組人 SerpinA7 / TBG 蛋白 Protein

小鼠關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞大鼠骨成型蛋白受體Ⅱ(BMPR-)試劑盒 ,英文名: BMPR- ELISA Kit

Porcine procollagen I carboxy terminal peptide (P I CP) ELISA Kit 豬Ⅰ型前膠原羧基端肽(PCP)試劑盒

流感嗜血桿菌(Hi)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

CLIAKitforMLC(HumanMyosinlightChain)ELISAKit人肌球蛋白輕鏈

體液脊髓過氧化酶(MPO)活性(DTNB)高質(zhì)敏感比色法定量試劑盒20

ELISAKitHCⅡ犬肝素輔因子Ⅱ

原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:

  一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)

  1、細(xì)胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;

  2、細(xì)胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L;

  3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);

  4、 胎牛血清濃度為10%-80%

  5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

  6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂??;

  7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;

  8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。

  二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)

  1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細(xì)胞;

  2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;

  3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗(yàn);

  4、長期培養(yǎng)時,淋巴細(xì)胞中要加入生長因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長;

  5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;

  6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時才能進(jìn)行


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