化工儀器網(wǎng)
詳細介紹
商品屬性：
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
腦海馬體 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 神經(jīng)元細胞樣 | YS-01X7347 |
細胞簡介：
小鼠海馬神經(jīng)元分離自海馬體；海馬體(Hippocampus)，又名海馬回、海馬區(qū)、大腦海馬，海馬體主要負責記憶和學習。海馬神經(jīng)元細胞是海馬區(qū)的主要細胞組成，主要功能是參與近期記憶、情緒及內(nèi)臟功能調(diào)節(jié)、是老年性癡呆、癲癇等疾病的主要病灶之一。海馬屬于大腦的邊緣系統(tǒng)，在學習、記憶、情緒反應及神經(jīng)系統(tǒng)疾病的病理生理變化等方面有重要作用，而且海馬組織是中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)主要的神經(jīng)干細胞聚集區(qū)，具有高度序化板層結(jié)構(gòu)和神經(jīng)元相對獨立分布的特點，境界相對清晰，便于取材，因此，海馬神經(jīng)元體外培養(yǎng)模型被廣大基礎(chǔ)醫(yī)學和臨床醫(yī)學研究者當做理想的實驗模型。海馬神經(jīng)元細胞培養(yǎng)是研究神經(jīng)細胞生物學特性和外源干擾因素作用(細胞因子)的有效細胞模型，其在神經(jīng)生物學，發(fā)育生物學體外實驗研究中已被廣泛應用。
原代細胞的培養(yǎng)條件：
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細胞要通過充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2、細胞接種時濃度要稍大一些，至少為5×108細胞/L；
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落，漂?。?/p>
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應將原代細胞換液；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時，應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞；
2、短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行；
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi)，進行分瓶試驗；
4、長期培養(yǎng)時，淋巴細胞中要加入生長因子，白血病細胞中要加入少量的原患者血清，以利細胞生長；
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。
方法簡介：
公司實驗室分離的小鼠海馬神經(jīng)元采用消化法、神經(jīng)元專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選結(jié)合化學試劑抑制法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測：
公司實驗室分離的小鼠海馬神經(jīng)元經(jīng)β-Tubulin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
包被條件 PLL（0.1mg/ml）
培養(yǎng)基 含B-27 Supplement、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 神經(jīng)元細胞樣
傳代特性 屬于終末分化細胞；屬于不增殖細胞群
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞傳代及凍存：
| 細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
| 如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
小鼠血管緊張素原(aGT)試劑盒 96T/48T
小鼠血管緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)試劑盒 96T/48T
小鼠血管緊張素Ⅰ(Ang-Ⅰ)試劑盒 96T/48T
小鼠血管活性腸肽(VIP)試劑盒 96T/48T
小鼠纖溶酶/纖維蛋白溶酶(PL/Fbn)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat osteoprotegerin (OPG) ELISA Kit 大鼠骨保護素(OPG)試劑盒
Humandopamine-β-hydroxylase,DBHELISAKit 人多巴胺-β羥化酶(DBH)試劑盒 96T/48T 進口分裝
ChickenHeatShockProtein20,HSP-20試劑盒雞熱休克蛋白20(HSP-20)試劑盒規(guī)格：96T/48T
載玻片細胞CASPASE-9蛋白表達熒光顯微鏡試劑盒10/20次
MouseHelicobacterpyloriIgG,Hp-IgGELISAKit小鼠幽門螺旋菌IgG(Hp-IgG)試劑盒規(guī)格：96T/48T
1號染色體開放閱讀框54抗體
智力發(fā)育調(diào)節(jié)相關(guān)蛋白BRWD3抗體
CNDP1重組小鼠 CNDP1 蛋白 Protein
玻連蛋白(VTN)重組蛋白 Recombinant Vitronectin (VTN)
PPCDC重組人 PPC-DC / PPCDC 蛋白 Protein
CD96 Protein Human 重組人 CD96 蛋白
RBP4 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 RBP4 蛋白
Aggrecan 軟骨蛋白聚糖/可聚蛋白多糖抗原 0.5mgAggrecan 軟骨蛋白聚糖/可聚蛋白多糖抗原
CD96 Protein Human 重組人 CD96 蛋白
REG3D重組小鼠 REG3D 蛋白 Protein
IFNA4 Protein Rat 重組大鼠 IFNA4 / IFNα4 / Interferon alpha-4 蛋白 (Fc 標簽)
C7重組人 C7 / Complement component 7 蛋白 Protein
小鼠海馬神經(jīng)元細胞大鼠骨成型蛋白4(BMP-4)試劑盒 ，英文名： BMP-4 ELISA Kit
Pig aminoterminal propeptide of type III procollagen (P III ) ELISA Kit 豬Ⅲ型前膠原氨基端肽(PⅢ)試劑盒
2型脊髓灰質(zhì)病毒(PV-2)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
CLIAKitforMIS/AMH)ELISAKit大鼠繆勒管抑制物質(zhì)/抗繆勒管激素
體液離子(K)濃度化學比色法定量試劑盒20次
ELISAKitE犬雌激素
化工儀器網(wǎng)