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詳細介紹
商品屬性：
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
肺靜脈組織 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 不規(guī)則細胞 | YS-01X7060 |
細胞簡介：
小鼠肺大靜脈內(nèi)皮分離自肺大靜脈組織；肺大靜脈在用肺呼吸的脊椎動物中，把動脈血由肺送回心臟的靜脈，是一個靜脈里流動脈血的血管。左右1對，共4條，兩條連接右肺，兩條連接左肺。肺靜脈異位引流是指肺靜脈未能直接與左心房連接，而與右心房或體靜脈系統(tǒng)連接的先天性心血管異位。肺靜脈淤血性肺動脈高壓，是由于肺靜脈內(nèi)血液淤滯而引起的肺動脈高壓。正常情況下，肺循環(huán)具有血壓低、阻力小和順應(yīng)性大的特點，肺動脈壓力高低取決于單位時間內(nèi)肺動脈血流量和肺血管的阻力，要維持肺循環(huán)的低壓、低阻的狀態(tài)，必須保證整個肺循環(huán)系統(tǒng)的暢通無阻，血液順利地由肺動脈經(jīng)毛細血管進入肺靜脈，再入左心室，經(jīng)過左心室收縮進入體循環(huán)，才能避免肺動脈內(nèi)壓力升高。細胞呈多邊形鵝卵石狀排列；該細胞在維持血管內(nèi)外的動態(tài)平衡、合成和分泌細胞因子和介質(zhì)、維持凝血和纖溶的動態(tài)平衡中起重要作用。
方法簡介：
質(zhì)量檢測：
本公司生產(chǎn)的小鼠肺大靜脈內(nèi)皮采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法、并通過內(nèi)皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10^5cells/瓶；經(jīng)CD31/vWF免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
M199、FBS、內(nèi)皮細胞生長添加劑、Heparin、Ascorbic Acid、Hydrocortisone、Penicillin、Streptomycin等
細胞傳代及凍存：
| 細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
| 如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
表達趨化因子 (TECK) 作用： ELISA 規(guī)格： 進口分裝
基質(zhì)淋巴細胞生成素 (TSLP) 作用： ELISA 規(guī)格： 進口分裝
型纖溶酶原激活因子 (uPA) 作用： ELISA 規(guī)格： 進口分裝
型纖溶酶原激活因子受體 (uPA-R) 作用： ELISA 規(guī)格： 進口分裝
小鼠乙酰受體抗體(AChRab)ELISA 試劑盒 96T/48T
Apoptosis of human soluble associated factor (sFAS/Apo-1) ELISA Kit 人可溶性凋亡相關(guān)因子(sFAS/Apo-1)試劑盒
Humaissuepolypeptidespecificaigen,TPSELISAKit 人組織多肽特異性抗原(TPS)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitfor5-HT(Mouse5-Hydroxyyptamine)ELISAKit小鼠5羥色胺
飲料氨含量光譜法定量試劑盒20次
MouseMacrophageInflammatoryProtein1β,MIP-1βELISAKit小鼠巨噬細胞性蛋白1β(MIP-1β/CCL4)試劑盒規(guī)格：96T/48T
DNA拓普西異構(gòu)酶Topo IIIα抗體
AbBy Fluor? 405標記的小腦肽2抗體
IL13RA2重組大鼠 IL13RA2 / IL13R 蛋白 (Fc 標簽) Protein
Erdj5/DNAJC10 Erdj5/DNAJC10多肽 0.5mgErdj5/DNAJC10 Erdj5/DNAJC10多肽
PIN1重組人 PIN1 / Rotamase Pin1 蛋白 Protein
CCNE1 Protein Human 重組人 CCNE1 / Cyclin-E1 蛋白 (His & GST 標簽)
CLU Protein Mouse 重組小鼠 Clusterin / Apolipoprotein J / Apo-J / CLU 蛋白
Erdj5/DNAJC10 Erdj5/DNAJC10多肽 0.5mgErdj5/DNAJC10 Erdj5/DNAJC10多肽
CCNE1 Protein Human 重組人 CCNE1 / Cyclin-E1 蛋白 (His & GST 標簽)
IL13RA2重組大鼠 IL13RA2 / IL13R 蛋白 (Fc 標簽) Protein
CLU Protein Mouse 重組小鼠 Clusterin / Apolipoprotein J / Apo-J / CLU 蛋白
PIN1重組人 PIN1 / Rotamase Pin1 蛋白 Protein
小鼠肺大靜脈內(nèi)皮細胞大鼠肝脂酶(HL)試劑盒 ，英文名： HL ELISA Kit
Porcine ierleukin 4 (IL-4) ELISA Kit 豬白介素4(IL-4)試劑盒
創(chuàng)傷弧菌(VV)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
CLIAKitforMDC/CCL22(HumanMacrophage-DerivedChemokine)ELISAkit人巨噬細胞來源的趨化因子
體液羥脯(HYP)比色法定量試劑盒20次
牛的牛血清白蛋白殘留檢測ELISAKit牛的牛血清白蛋白殘留檢測ELISAKit，牛的牛血清白蛋白殘留檢測ELISAKit，
原代細胞的培養(yǎng)條件：
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細胞要通過充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2、細胞接種時濃度要稍大一些，至少為5×108細胞/L；
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落，漂浮；
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應(yīng)將原代細胞換液；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時，應(yīng)將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞；
2、短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行；
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi)，進行分瓶試驗；
4、長期培養(yǎng)時，淋巴細胞中要加入生長因子，白血病細胞中要加入少量的原患者血清，以利細胞生長；
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行
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