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小鼠腦成纖維細胞

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更新時間:2024-11-04 12:27:21瀏覽次數(shù):114

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
貨號 YS-01X7353 主要用途 僅供科研研究實驗
小鼠腦成纖維細胞公司正在出售的產(chǎn)品:巨核細胞白血病2抗體 鋅指蛋白348抗體 易位相關(guān)蛋白α/TRAP-α抗體 小鼠膀胱成纖維細胞 大鼠神經(jīng)小膠質(zhì)細胞 MDBK牛腎細胞 A375+EGFP人惡性黑色素瘤細胞+EGFP

詳細介紹

小鼠腦成纖維細胞

小鼠腦成纖維細胞

商品屬性:

組織來源

產(chǎn)品規(guī)格

細胞形態(tài)

貨號

腦組織

5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

成纖維細胞樣

YS-01X7353

細胞簡介:

小鼠腦成纖維分離自腦組織;大腦分左右兩個半球,大腦皮質(zhì)(灰質(zhì))覆蓋著每個大腦半球的大部分,它是神經(jīng)元胞體集中的地方。內(nèi)部則是由神經(jīng)纖維或髓鞘構(gòu)成的白質(zhì)。每一個半球都有三個面,即外側(cè)面(約占整個皮質(zhì)面積的1/3)、內(nèi)側(cè)面和底面(占2/3的面積);半球表面有很多深淺不等的溝或裂,溝或裂之間的隆起叫回,它們大大增加了大腦的表面積;大腦外側(cè)面重要的溝、裂有大腦外側(cè)裂、頂枕裂和中央溝。由于三溝裂之界隔,使大腦皮質(zhì)組分為額葉、頂葉、顳葉、枕葉四大部分。成纖維細胞(Fibroblast)是疏松結(jié)締組織的主要細胞成分,由胚胎時期的間充質(zhì)細胞分化而來;成纖維細胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),其細胞核呈規(guī)則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛,細胞質(zhì)嗜弱堿性,具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動,在一定條件下,它可以實現(xiàn)跟纖維細胞的互相轉(zhuǎn)化;成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的腦成纖維細胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養(yǎng)基中。30min細胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現(xiàn)為小的突起;6h后細胞基本貼壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長,不聚集成團;細胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態(tài),細胞排列緊密,有的交叉重疊生長,平坦、胞體較大,細胞質(zhì)透明,細胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細胞融合,并彼此連接成網(wǎng)狀;細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。

原代細胞的培養(yǎng)條件:

  一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)

  1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;

  2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;

  3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);

  4、 胎牛血清濃度為10%-80%

  5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

  6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂??;

  7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細胞換液;

  8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應(yīng)將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。

  二、懸浮細胞培養(yǎng)

  1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞;

  2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行;

  3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進行分瓶試驗;

  4、長期培養(yǎng)時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;

  5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;

  6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。

方法簡介:

公司實驗室分離的小鼠腦成纖維采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測:

公司實驗室分離的小鼠腦成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBVHCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳3代左右

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO25%

小鼠腦成纖維細胞

細胞傳代及凍存:

細胞傳代步驟細胞凍存步驟
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:

  ① 組織塊培養(yǎng)法

  組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

  ② 消化培養(yǎng)法

 ?、?懸浮細胞培養(yǎng)法

  對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

 ?、芷鞴倥囵B(yǎng)

  器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

小鼠腦成纖維細胞


公司正在出售的產(chǎn)品:

粒細胞彈性蛋白酶   英文名稱:   Neuophil elastase   規(guī)格:      英文縮寫:   NE

神經(jīng)絲蛋白   英文名稱:   neurofilame protein   規(guī)格:      英文縮寫:   NF

神經(jīng)絲蛋白   英文名稱:   neurofilame protein   規(guī)格:      英文縮寫:   NF

核轉(zhuǎn)錄因子NF-KB   英文名稱:   Nuclear anscription Factor NF-KB   規(guī)格:      英文縮寫:   NF-KB

豬傳染性胃腸病毒抗體(TGEV)試劑盒

Human macrophage migration inhibitory factor (MIF) ELISA Kit 人巨噬細胞移動抑制因子(MIF)試劑盒

swinemajorhistocompatibilitycomplex,MHC/SLAELISAKit 豬主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類(MHC/SLA)試劑盒 進口分裝

CLIAKitforALP(Mousealkalinephosphatase)ELISAKit小鼠堿性0酸酶

血液含量比色法定量試劑盒20

Mouseα2-Aiplasmin,α2-APELISAKit小鼠α2抗纖溶酶(α2-AP)試劑盒

FBXW5蛋白抗體

APC標記小鼠CD45R單克隆抗體

CTLA4重組食蟹猴 CTLA4 / CD152 蛋白 (His 標簽) Protein

LFABP/FABP-1(Liver Fatty acid binding protein 0.5mgLFABP/FABP-1(Liver Fatty acid binding protein) 肝臟型脂肪酸結(jié)合蛋白抗原

SEMA4A重組人 Semaphorin 4A / SEMA4A / Semaphorin B 蛋白  Protein

ALDH4A1 Protein Human 重組人 ALDH4A1 蛋白

MFI2 Protein Mouse 重組小鼠 MFI2 / CD228 / melanotransferrin 蛋白

LFABP/FABP-1(Liver Fatty acid binding protein 0.5mgLFABP/FABP-1(Liver Fatty acid binding protein) 肝臟型脂肪酸結(jié)合蛋白抗原

ALDH4A1 Protein Human 重組人 ALDH4A1 蛋白

CTLA4重組食蟹猴 CTLA4 / CD152 蛋白 (His 標簽) Protein

MFI2 Protein Mouse 重組小鼠 MFI2 / CD228 / melanotransferrin 蛋白

SEMA4A重組人 Semaphorin 4A / SEMA4A / Semaphorin B 蛋白  Protein

小鼠腦成纖維細胞大鼠肝受體同源物1(LRH1)試劑盒 ,英文名: LRH1 ELISA Kit

Rat alpha 1 microglobulin (alpha 1-MG) ELISA Kit 大鼠α1微球蛋白(α1-MG)試劑盒

RatAngiopoietin1,ANG-1ELISAKit 大鼠血管生成素1(ANG-1)試劑盒 進口分裝

CLIAKitforE2(MouseEsadiol)ELISAKit小鼠雌二醇

細胞培養(yǎng)污染性支原體M.arginini鑒定16SrDNAPCR擴增試劑盒20

RatInhibinbindingprotein,INHBPELISAKit大鼠抑制素結(jié)合蛋白(INHBP)試劑盒


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