詳細(xì)介紹
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號(hào) |
腦膜組織 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 成纖維細(xì)胞樣 | YS-01X7343 |
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
小鼠腦膜分離自腦膜組織;腦膜是顱骨與腦間的隔膜,一共有三層,由外向內(nèi)為硬腦膜、蛛網(wǎng)膜和軟腦膜。腦膜細(xì)胞圍繞著大腦,參與中樞神經(jīng)系統(tǒng)的正常發(fā)育,能穩(wěn)定腦軟膜表面的細(xì)胞外基質(zhì)、組織放射狀膠質(zhì)細(xì)胞網(wǎng)絡(luò)和小腦皮層分層結(jié)構(gòu)。
方法簡(jiǎn)介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠腦膜采用消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè):
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠腦膜經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細(xì)胞傳代及凍存:
細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠游離睪試劑盒 小鼠游離睪試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 小鼠游離睪試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠游離睪試劑盒、小鼠游離睪試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
小鼠幽門螺旋菌試劑盒 小鼠幽門螺旋菌試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 小鼠幽門螺旋菌試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠幽門螺旋菌試劑盒、小鼠幽門螺旋菌試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
小鼠抑瘤素M試劑盒 小鼠抑瘤素M試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 小鼠抑瘤素M試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠抑瘤素M試劑盒、小鼠抑瘤素M試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
小鼠乙型肝核心抗體試劑盒 小鼠乙型肝核心抗體試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 小鼠乙型肝核心抗體試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠乙型肝核心抗體試劑盒、小鼠乙型肝核心抗體試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
小鼠血栓素B2(TXB2)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat dopamine (DA) ELISA Kit 大鼠多巴胺(DA)試劑盒
Humanα-HydroxybyrateDehydrogenase,αHBDHELISAKit 人α羥基脫輕酶(αHBDH)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitfor(LDH)ELISAKit大鼠乳酸脫氫酶
熒光標(biāo)記法細(xì)胞端粒酶活性AP電泳分析試劑盒10次
MouseIerleukin23,IL-23ELISAKit小鼠白介素23(IL-23)試劑盒規(guī)格:96T/48T
FSD1蛋白抗體
C4.4A/LYPD3重組兔單克隆抗體
FGF9重組狗 FGF9 / FGF-9 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
NIK,NF-kappaB-Inducing Kinase NFkB誘導(dǎo)的激酶(抗原 0.5mgNIK,NF-kappaB-Inducing Kinase NFkB誘導(dǎo)的激酶(抗原)
PDE1B重組人 PDE1B 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein
CD33 Protein Human 重組人 CD33 / Siglec-3 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
PTN Protein Mouse 重組小鼠 Pleiotrophin / PTN / HB-GAM 蛋白
NIK,NF-kappaB-Inducing Kinase NFkB誘導(dǎo)的激酶(抗原 0.5mgNIK,NF-kappaB-Inducing Kinase NFkB誘導(dǎo)的激酶(抗原)
CD33 Protein Human 重組人 CD33 / Siglec-3 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
FGF9重組狗 FGF9 / FGF-9 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
PTN Protein Mouse 重組小鼠 Pleiotrophin / PTN / HB-GAM 蛋白
PDE1B重組人 PDE1B 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein
小鼠腦膜細(xì)胞大鼠甘露糖結(jié)合蛋白/甘露糖結(jié)合凝集素(MBP/MBL)試劑盒 ,英文名: MBP/MBL ELISA Kit
Porcine esadiol (E2) ELISA Kit 豬雌二醇(E2)試劑盒
瘧原蟲(Pm)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
CLIAKitforM-CSF(HumanMacrophageColony-StimulatingFactor)ELISAkit人巨噬細(xì)胞集落刺激因子
體液砷元素比色法定量試劑盒20次
ELISAKitC3bR綿羊補(bǔ)體片段3b受體
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂?。?/p>
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗(yàn);
4、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí),淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長(zhǎng);
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行