詳細介紹
本網(wǎng)站銷售的化學產品僅供科學研究或工業(yè)應用,不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療!
產品名稱:小鼠皮膚肥大細胞
組織來源:皮膚組織
產品規(guī)格:5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 懸浮
細胞形態(tài) 圓形
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞簡介:
小鼠皮膚肥大分離自皮膚組織;皮膚肥大細胞廣泛分布于皮膚微血管周圍,分泌多種細胞因子,參與免疫調節(jié)(T細胞、B細胞、APC細胞活化)。皮膚肥大細胞表達MHC分子、B7分子,具有APC功能。表達大量的IgE-Fc受體,釋放過敏介質。具有弱吞噬功能,和血液的嗜堿粒細胞同樣,具有強嗜堿性顆粒的組織細胞。存在于血液中的這類顆粒,含有肝素、組織胺、5-羥色胺,由細胞崩解釋放出顆粒以及顆粒中的物質,可在組織內引起速發(fā)型過敏反應(炎癥)。由于在肥大細胞上結合的IgE抗體和抗原的接觸,使細胞多陷于崩壞。肥大細胞呈圓形或卵圓形,細胞核小,呈圓形或橢圓形,染色淺,位于細胞中央。細胞常成堆或單個分布于血管附近。細胞呈圓形或卵圓形,細胞質中充滿大小一致、染成藍紫色的顆粒,均勻分布在核周圍。
方法簡介:
公司實驗室分離的小鼠皮膚肥大采用膠原酶-混合消化法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
公司實驗室分離的小鼠皮膚肥大經MCG-35免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)步驟:
一、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或將細胞懸液加入6cm皿中),培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
二、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
a)、對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細胞,脫落后吸出,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補加培養(yǎng)液,將細胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b)、對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄上清液,補加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
收到細胞如何處理?
1、首先,觀察細胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有,請拍照,并及時與技術支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù))。
2、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題,部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內靜置培養(yǎng)2-4小時,以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
3、仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關信息,如貼壁特性(貼壁/懸?。?、細胞形態(tài)、所用基礎培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后,取出細胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù));建議細胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細胞:若細胞生長密度超過80%,可正常傳代;若未超過80%,移除細胞培養(yǎng)瓶內培養(yǎng)基,預留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細胞:將細胞培養(yǎng)瓶內液體全部轉移至50ml無菌離心管內,1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時,若細胞密度超過80%,可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內培養(yǎng),補加培養(yǎng)基至5ml;若細胞密度未超過80%,將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作
公司正在出售的產品:
小鼠孕 英文名稱: Progesterone 規(guī)格: 英文縮寫: PROG
小鼠1型前膠原羧基端原肽 英文名稱: Mouse C-Terminal Propeptide of type I collagen 規(guī)格: 英文縮寫: PICP
小鼠甲狀旁腺激素 英文名稱: Mouse Parathormone 規(guī)格: 英文縮寫: PTH
小鼠過氧化物酶體增殖物活化受體γ 英文名稱: Mouse Peroxisome Proliferators Activated Receptor γ 規(guī)格: 英文縮寫: PPARγ
小鼠血纖蛋白原降解產物(FDP)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat telomerase (TE) ELISA Kit 大鼠端粒酶(TE)試劑盒
Humanαmannosidase,αManaseELISAKit 人α甘露糖苷酶(αManase)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitfor(MMP-7(HumanMaixmetalloproteinase7)ELISAkit人基質金屬蛋白酶7
印跡覆膜結合(BLOTOVERLAYBINDING)同位素試劑盒5次
MouseIerleukin3,IL-3ELISAKit小鼠白介素3(IL-3)試劑盒規(guī)格:96T/48T
Kelch樣蛋白15抗體
EMID2蛋白抗體
CCL21重組食蟹猴 CCL21 / 6Ckine 蛋白 Protein
MMP-14(Matrix metalloproteinase-14 0.5mgMMP-14(Matrix metalloproteinase-14) 金屬基質蛋白酶-14
FGF21重組人 FGF21 蛋白 Protein
CD300LG Protein Human 重組人 CLM-9 / TREM4 / CD300LG 蛋白
IL27 Protein Mouse 重組小鼠 IL27 / Interleukin-27 蛋白
MMP-14(Matrix metalloproteinase-14 0.5mgMMP-14(Matrix metalloproteinase-14) 金屬基質蛋白酶-14
CD300LG Protein Human 重組人 CLM-9 / TREM4 / CD300LG 蛋白
CCL21重組食蟹猴 CCL21 / 6Ckine 蛋白 Protein
IL27 Protein Mouse 重組小鼠 IL27 / Interleukin-27 蛋白
FGF21重組人 FGF21 蛋白 Protein
小鼠皮膚肥大細胞大鼠鈣結合蛋白(CR)試劑盒 ,英文名: CR ELISA Kit
Porcine factor related apoptosis (FAS/CD95) ELISA Kit 豬凋亡相關因子(FAS/CD95)試劑盒
轉基因植物TE基因核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
CLIAKitforMCF(Humanmacrophagechemotaticfactor)ELISAKit人巨噬細胞趨化因子
體液血管緊張素Ⅰ轉化酶1(ACE1)活性熒光定量試劑盒20次
ELISAKitGH馬生長激素