化工儀器網(wǎng)
詳細介紹
商品屬性：
組織來源 | 產品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
臍帶組織 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 成纖維細胞樣 | YS-01X7690 |
細胞簡介：
小鼠臍帶間充質干分離自臍帶；臍帶是哺乳類的連接胎兒和胎盤的管狀結構。原來是由羊膜包卷著卵黃囊和尿膜的柄狀伸長部而形成的。臍帶中通過尿膜的血管即臍動脈和臍靜脈，卵黃囊的血管即臍腸系膜動脈及臍腸系膜靜脈。當卵黃囊及其血管退化，臍動脈和臍靜脈就發(fā)達起來，在這些間隙中可以看到疏松的膠狀的間充質。在子宮中，子宮動脈在胎盤的母體部分出的毛細血管，與胎盤的子體部胎兒毛細血管靠近，在此處母體和胎兒的血液間進行CO2和O2，代謝產物即代謝廢物和營養(yǎng)物質的交換。臍動脈將胎兒來的廢物運送至胎盤，臍靜脈將O2和營養(yǎng)物質從胎盤運送給胎兒。最后由子宮靜脈將來自胎兒的代謝廢物運走，某種激素和抗體等也通過臍帶從母體移交給胎兒。臍帶中含有大量的干細胞，干細胞是生命的種子，它會分化成機體的各種細胞，結出各種不同的果實——血液細胞、神經細胞、骨骼細胞等。干細胞是具有自我更新、高度增殖和多項分化潛能的細胞群體；這些細胞可以通過分裂維持自身細胞的特性和數(shù)量，又可進一步分化為各種組織細胞，從而在組織修復等方面發(fā)揮積極作用。間充質干細胞（MSC）是一種具有高度自我更新和多向分化潛能的干細胞。在不同的誘導條件下，可分化為多種造血細胞以外的組織細胞，并具有造血支持、免疫調節(jié)、組織修復等作用；目前，多用于風濕免疫疾病的治療。間充質干細胞（MSCs）是一種具有自我更新和多向分化潛能的成體干細胞，存在于骨髓、脂肪組織、臍血及多種胎兒組織。它可分泌多種細胞因子及生長因子，促進造血干細胞（HSC）的增殖與分化。MSCs還具有免疫調節(jié)、抗炎和組織修復作用，可減輕移植物抗宿主病（GVHD）及其他移植相關并發(fā)癥。
原代細胞的培養(yǎng)條件：
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細胞要通過充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2、細胞接種時濃度要稍大一些，至少為5×108細胞/L；
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落，漂浮；
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應將原代細胞換液；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養(yǎng)1周時，應將細胞懸液經低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞；
2、短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行；
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內，進行分瓶試驗；
4、長期培養(yǎng)時，淋巴細胞中要加入生長因子，白血病細胞中要加入少量的原患者血清，以利細胞生長；
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。
方法簡介：
公司實驗室分離的小鼠臍帶間充質干采用組織貼塊法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測：
公司實驗室分離的小鼠臍帶間充質干經CD29、CD44免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞傳代及凍存：
| 細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
| 如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調節(jié)作用。
公司正在出售的產品：
鴨白介素1(IL-1)試劑盒 96T/48T
鴨γ干擾素(IFN-γ)試劑盒 96T/48T
鴨α干擾素(IFN-α)試劑盒 96T/48T
小鼠組織因子途徑抑制物(TFPI)試劑盒 96T/48T
小鼠轉化生長因子β2(TGFβ2)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human ai mated ciullinated vimein aibody (MCV) ELISA Kit 人抗突變型瓜波形蛋白抗體(MCV)試劑盒
Human1,5-anhydroglucitol,1,5-AGELISAKit 人1,5-脫水葡萄糖醇/1,5-脫水山梨(1,5-AG)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforACA-IgM(Humanai-cardiolipinaibodyIgM)ELISAKit人抗心0脂抗體IgM
藥品糖精(saccharin)含量紫外光譜法定量試劑盒20次
Mouseoxidizidedglathione,GSGSELISAKit小鼠氧化型(GSGS)試劑盒規(guī)格：96T/48T
LYPD2蛋白抗體
FAM91A1蛋白抗體
GHR重組小鼠 Growth Hormone Receptor / GHR / GHBP 蛋白 (His & Fc 標簽) Protein
CG6856-PA peptide CG6856-PA抗原 0.5mgCG6856-PA peptide CG6856-PA抗原
AKR1A1重組人 AKR1A1 蛋白 Protein
CAT Protein Human 重組人 CAT / Catalase 蛋白
IL13RA1 Protein Mouse 重組小鼠 IL-13Ra1 蛋白 (His & Fc 標簽)
CG6856-PA peptide CG6856-PA抗原 0.5mgCG6856-PA peptide CG6856-PA抗原
CAT Protein Human 重組人 CAT / Catalase 蛋白
GHR重組小鼠 Growth Hormone Receptor / GHR / GHBP 蛋白 (His & Fc 標簽) Protein
IL13RA1 Protein Mouse 重組小鼠 IL-13Ra1 蛋白 (His & Fc 標簽)
AKR1A1重組人 AKR1A1 蛋白 Protein
小鼠臍帶間充質干細胞大鼠鈣/鈣調素依賴性蛋白激酶2(CAMK 2)試劑盒 ，英文名： CAMK 2 ELISA Kit
Pulmonary surfacta associated protein A (SP-A) ELISA Kit 豬肺表面活性物質相關蛋白A(SP-A)試劑盒
轉基因植物EPSPS基因核酸試劑盒 48T
CLIAKitforMCAbELISAKit大鼠黑色素細胞抗體
體液血管緊張素Ⅰ轉化酶2(ACE2)活性熒光定量試劑盒20次
ELISAKitAβ1-40馬β淀粉樣蛋白1-40
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