詳細介紹
商品屬性:
組織來源 | 產品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
胎盤組織 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 成纖維細胞樣 | YS-01X7444 |
細胞簡介:
小鼠滋養(yǎng)層干分離自胎盤組織;胎盤(placenta)是哺乳動物妊娠期間由胚胎的胚膜和母體子宮內膜聯(lián)合長成的母子間交換物質的過渡性器官,由羊膜、葉狀絨毛膜和底蛻膜構成。胎兒在子宮中發(fā)育,依靠胎盤從母體取得營養(yǎng),而雙方保持相當的獨立性。胎盤還產生多種維持妊娠的激素,是一個重要的內分泌器官。有些爬行類和魚類也以胎生方式繁殖后代,胚胎生長出一些輔助結構如卵黃囊、鰓絲等與母體組織緊密結合,以達到母子間物質的交換,這樣的結構稱假胎盤。滋養(yǎng)層干細胞是胎盤組織細胞的祖細胞,與胚胎著床和胎盤的形成密切相關。胚胎著床和胎盤形成是母體與胎兒建立聯(lián)系的關鍵時期,此時期滋養(yǎng)層細胞增殖速度快,滋養(yǎng)層干細胞自我更新和分化旺盛,與多種妊娠相關疾病的發(fā)生、發(fā)展及其增殖、功能調節(jié)的失常有密切關系。在哺乳動物胚胎發(fā)育過程中,胚胎細胞次分化形成內細胞團和滋養(yǎng)外胚層。滋養(yǎng)層干細胞是胎盤細胞的前體細胞,在胎盤發(fā)育中有重要作用。
原代細胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂?。?/p>
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養(yǎng)1周時,應將細胞懸液經低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,進行分瓶試驗;
4、長期培養(yǎng)時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。
方法簡介:
公司實驗室分離的小鼠滋養(yǎng)層干采用囊胚組織貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
公司實驗室分離的小鼠滋養(yǎng)層干經HLA-E(白細胞抗原)免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳2-3代左右
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數板計數。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調節(jié)作用。
公司正在出售的產品:
土壤纖維素酶(S-CL)測試盒 可見分光光度法 50管/24樣
土壤酶(S-CAT)測試盒 紫外分光光度法 50管/24樣
土壤還原酶(S-)測試盒 可見分光光度法 50管/24樣
土壤蔗糖酶(S-SC)測試盒 可見分光光度法 50管/24樣
小鼠26S蛋白酶體(26S PSM)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human pepsinogen A (PG-A) ELISA Kit 人原A(PG-A)試劑盒
HumanUlaSensitiveProstateSpecificAigen,PSAUSELISAKit 人超敏前列腺特異性抗原(PSA-US)試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humanconnectivetissuegrowthfactor,CTGF試劑盒人結締組織生長因子(CTGF)試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織CDK5/P35激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
HumanProteinZELISAKit人蛋白Z(ProteinZ)試劑盒規(guī)格:96T/48T
Kelch樣蛋白17抗體
谷脫氫酶2抗體
GLYCOPROTEIN重組蘇丹埃博拉病毒 Glycoprotein / GP 蛋白 Protein
TIGAR humen (TP53- induced glycolysis and apoptosis-regulator 0.5mgTIGAR humen (TP53- induced glycolysis and apoptosis-regulator ) P53誘導糖酵解和凋亡調節(jié)因子蛋白(抗原)
CD7重組人 CD7 蛋白 Protein
IFNA2 Protein Human 重組人 Interferon alpha 2 / IFNA2 蛋白
ERAP2 Protein Human 重組人 LRAP / ERAP2 蛋白
TIGAR humen (TP53- induced glycolysis and apoptosis-regulator 0.5mgTIGAR humen (TP53- induced glycolysis and apoptosis-regulator ) P53誘導糖酵解和凋亡調節(jié)因子蛋白(抗原)
IFNA2 Protein Human 重組人 Interferon alpha 2 / IFNA2 蛋白
GLYCOPROTEIN重組蘇丹埃博拉病毒 Glycoprotein / GP 蛋白 Protein
ERAP2 Protein Human 重組人 LRAP / ERAP2 蛋白
CD7重組人 CD7 蛋白 Protein
小鼠滋養(yǎng)層干細胞大鼠遲現抗原(VLA)試劑盒 ,英文名: VLA ELISA Kit
Mouse 8 hydroxydeoxyguanosine (8-OHdG) ELISA Kit 小鼠8羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)試劑盒
ELISA 小鼠可溶性CD36分子(mouse sCD36) 進口分裝
CLIAKitforLEPR(HumanLeptieceptor)ELISAKit人瘦素受體
通用型HRP-DAB底物顯色試劑盒10次
ELISAKitFSH促卵泡素