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本網(wǎng)站銷(xiāo)售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,不直接用于食品、藥品、臨床或動(dòng)物的診斷或治療!
產(chǎn)品名稱(chēng):雞卵泡基膜細(xì)胞
組織來(lái)源:雞卵泡組織
產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
雞卵泡基膜分離自雞卵泡組織;成熟卵泡是卵巢的組織結(jié)構(gòu)成分之一,卵泡腔很大,卵丘很明顯。卵泡內(nèi)膜細(xì)胞緊靠卵泡顆粒層,與顆粒層細(xì)胞之間有一層基膜相隔,內(nèi)膜細(xì)胞呈多邊形,胞質(zhì)清亮,胞核圓形,細(xì)胞間可見(jiàn)許多毛細(xì)血管,外膜細(xì)胞位于最外層,多呈梭形,與周?chē)Y(jié)締組織分界不明顯。卵泡(follicle)中卵母細(xì)胞四周有一層菱形或扁平細(xì)胞圍繞,在卵泡開(kāi)始發(fā)育、卵細(xì)胞成長(zhǎng)的同時(shí),周?chē)牧庑渭?xì)胞變?yōu)榱⒎叫?,并由單層增生成?fù)層,因其細(xì)胞漿內(nèi)含有顆粒,故稱(chēng)為顆粒細(xì)胞。初級(jí)卵泡的顆粒細(xì)胞為單層;次級(jí)卵泡的顆粒細(xì)胞增至復(fù)層;成熟卵泡的顆粒細(xì)胞展開(kāi)又變?yōu)閱螌?。顆粒細(xì)胞的胞核大而圓,著色深,細(xì)胞的游離面有許多細(xì)長(zhǎng)突起伸入放射帶的凹陷部。
方法簡(jiǎn)介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的雞卵泡基膜采用先機(jī)械分離后膠原酶反復(fù)消化法、并通過(guò)專(zhuān)用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè):
公司實(shí)驗(yàn)室分離的雞卵泡基膜經(jīng)3β-HSD免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)步驟:
一、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中),培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
二、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a)、對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀(guān)察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞,脫落后吸出,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液,將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b)、對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄上清液,補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
收到細(xì)胞如何處理?
1、首先,觀(guān)察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有,請(qǐng)拍照,并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù))。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀(guān)察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題,部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落;先不要打開(kāi)培養(yǎng)瓶蓋,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí),以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū),了解細(xì)胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸?。?、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)。
5、貼壁細(xì)胞:若細(xì)胞生長(zhǎng)密度超過(guò)80%,可正常傳代;若未超過(guò)80%,移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細(xì)胞:將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無(wú)菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時(shí),若細(xì)胞密度超過(guò)80%,可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng),補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml;若細(xì)胞密度未超過(guò)80%,將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶-2 英文名稱(chēng): maix metalloproteinase 2 規(guī)格: 英文縮寫(xiě): MMP-2
小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶-3 英文名稱(chēng): maix metalloproteinase 3 規(guī)格: 英文縮寫(xiě): MMP-3
小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶-9 英文名稱(chēng): maix metalloproteinase 9 規(guī)格: 英文縮寫(xiě): MMP-9
小鼠蘋(píng)果酸酶 英文名稱(chēng): Mouse Malic Enzyme 規(guī)格: 英文縮寫(xiě): ME
小鼠可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體(sEPCR)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat macrophage derived chemokine (MDC/CCL22) ELISA Kit 大鼠巨噬細(xì)胞來(lái)源的趨化因子(MDC/CCL22)試劑盒
Humanai-IgAaibodyELISAKit 人抗IgA抗體(ai-IgA-Ab)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanAgoiRelatedProtein,AGRP試劑盒人Agoi相關(guān)蛋白(AGRP)試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物N-糖基糖蛋白樹(shù)脂法化試劑盒5次
MouseADisiegrinAndMetalloprotease9,ADAM9ELISAKit小鼠解整合素樣金屬蛋白酶9(ADAM9)試劑盒規(guī)格:96T/48T
P選擇素/白細(xì)胞內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子3重組兔單克隆抗體
基質(zhì)金屬蛋白酶21抗體
HA重組甲型流感 H1N1 (A/Ohio/07/2009) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein
Recombinant EGFP protein 重組增強(qiáng)型綠色熒光 100ugRecombinant EGFP protein 重組增強(qiáng)型綠色熒光
IL3RA重組人 IL3RA / CD123 蛋白 Protein
DCUN1D2 Protein Human 重組人 DCUN1D2 蛋白
FZD5 Protein Human 重組人 Frizzled-5 / FZD5 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)
Recombinant EGFP protein 重組增強(qiáng)型綠色熒光 100ugRecombinant EGFP protein 重組增強(qiáng)型綠色熒光
DCUN1D2 Protein Human 重組人 DCUN1D2 蛋白
HA重組甲型流感 H1N1 (A/Ohio/07/2009) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein
FZD5 Protein Human 重組人 Frizzled-5 / FZD5 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)
IL3RA重組人 IL3RA / CD123 蛋白 Protein
雞卵泡基膜細(xì)胞大鼠不對(duì)稱(chēng)二甲基精酸(ADMA)試劑盒 ,英文名: ADMA ELISA Kit
Mouse p53 (p53) ELISA Kit 小鼠p53(p53)試劑盒
ELISA 小鼠多巴胺(mouse Dopamine) 進(jìn)口分裝
CLIAKitforLBP(Humanlipolysaccharidebindingprotein)ELISAKit人脂多糖結(jié)合蛋白
通用型vero毒素大腸桿菌志賀氏毒素-2(VTEC-Shigatoxin2)試劑盒20次
ELISAKitLv/Vn紅螯光殼螯蝦卵黃脂0蛋白