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基因導入儀是怎樣進行工作的？
閱讀：946 發(fā)布時間：2022-1-19
基因導入儀是生物領域研究中的一種常用的儀器。該設備整機一體化設計，操作簡單，顯示直觀，微處理器控制的脈沖放電采用人機對話界面，操作簡單、直觀、細化了電容、電阻的設定范圍，使細胞的電穿孔實驗在相關條件下有了更廣泛的選擇。廣泛應用于各種動物、植物細胞和微生物的電穿孔，也可作細胞雜交、融合、基因導入的研究。
基因導入儀的工作原理：
采用細胞電轉染(電轉)的原理，也叫細胞電穿孔(electroporation)，是把外源大分子物質DNA、RNA、siRNA、蛋白質等以及一些小分子導入細胞膜內部的重要方法。在瞬間強大電場的作用下，溶液中細胞的細胞膜具有了一定的通透性，帶電的外源物質以類似電泳的方式進入細胞膜。由于細胞膜磷脂雙分子層的電阻很大，細胞外部電流場產生的細胞兩極電壓都被細胞膜承受，細胞質內分到的電壓可以忽略不計，細胞質內部幾乎沒有電流，因此也決定了正常范圍內的電轉過程中細胞毒性很小。電場使DNA等物質進入細胞膜后只能停止在細胞膜附近，隨后細胞本身的機制可以允許這些物質到細胞核等處。由于電轉技術依靠的是物理方法，細胞表面的分子特性對電轉影響比較小。相比化學轉染方法和病毒載體轉染方法，電轉可以用在所有的細胞種類上，而且容易定量控制。
儀器若長期末使用在重新使用時，應先低壓充電、放電，逐步升高電壓，直至額定值。在儀器使用時,應先通電予熱10 -15min設置數(shù)據(jù)，進行幾次充電放電空操作后才可正式進行導入操作。