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基因?qū)雰x是怎樣進行工作的？
閱讀：828 發(fā)布時間：2022-1-19
基因?qū)雰x是生物領(lǐng)域研究中的一種常用的儀器。該設(shè)備整機一體化設(shè)計，操作簡單，顯示直觀，微處理器控制的脈沖放電采用人機對話界面，操作簡單、直觀、細化了電容、電阻的設(shè)定范圍，使細胞的電穿孔實驗在相關(guān)條件下有了更廣泛的選擇。廣泛應(yīng)用于各種動物、植物細胞和微生物的電穿孔，也可作細胞雜交、融合、基因?qū)氲难芯俊?br />
基因?qū)雰x的工作原理：
采用細胞電轉(zhuǎn)染(電轉(zhuǎn))的原理，也叫細胞電穿孔(electroporation)，是把外源大分子物質(zhì)DNA、RNA、siRNA、蛋白質(zhì)等以及一些小分子導入細胞膜內(nèi)部的重要方法。在瞬間強大電場的作用下，溶液中細胞的細胞膜具有了一定的通透性，帶電的外源物質(zhì)以類似電泳的方式進入細胞膜。由于細胞膜磷脂雙分子層的電阻很大，細胞外部電流場產(chǎn)生的細胞兩極電壓都被細胞膜承受，細胞質(zhì)內(nèi)分到的電壓可以忽略不計，細胞質(zhì)內(nèi)部幾乎沒有電流，因此也決定了正常范圍內(nèi)的電轉(zhuǎn)過程中細胞毒性很小。電場使DNA等物質(zhì)進入細胞膜后只能停止在細胞膜附近，隨后細胞本身的機制可以允許這些物質(zhì)到細胞核等處。由于電轉(zhuǎn)技術(shù)依靠的是物理方法，細胞表面的分子特性對電轉(zhuǎn)影響比較小。相比化學轉(zhuǎn)染方法和病毒載體轉(zhuǎn)染方法，電轉(zhuǎn)可以用在所有的細胞種類上，而且容易定量控制。
儀器若長期末使用在重新使用時，應(yīng)先低壓充電、放電，逐步升高電壓，直至額定值。在儀器使用時,應(yīng)先通電予熱10 -15min設(shè)置數(shù)據(jù)，進行幾次充電放電空操作后才可正式進行導入操作。