ADAM MC自動細(xì)胞計數(shù)儀

ADAM MC自動細(xì)胞計數(shù)儀

它使用使用碘化丙啶染色靶細(xì)胞核的基于芯片的一次性試劑盒，ADAM無需擔(dān)心細(xì)胞的大小，形狀或聚集。取而代之的是，它使用熒光來對染色的細(xì)胞核進(jìn)行專門成像，并且每個樣品的平均22個獨立讀數(shù)總計3 µl讀數(shù)體積。

ADAM和流式細(xì)胞儀之間細(xì)胞活力的比較。將SK-OV，HeLa和NCI-H23細(xì)胞
分別用100和300µM H2O2處理3小時，然后通過ADAM和流式細(xì)胞儀進(jìn)行分析。
值給出為三個實驗的±SD。

使用碘化丙啶染色的CHO細(xì)胞，ADAM MC計數(shù)與使用C-Chip Disaposable血細(xì)胞計數(shù)器進(jìn)行的手動計數(shù)幾乎相同。實際上，由于玻璃血細(xì)胞計數(shù)器蓋玻片會浮起，導(dǎo)致更大的可變性，從而導(dǎo)致計數(shù)體積的較大差異。此外，錐蟲藍(lán)和碘化丙錠會染色細(xì)胞的不同成分。碘化丙啶和錐蟲藍(lán)的計數(shù)通常相差不到5％。

ADAM基于使用熒光染料碘化丙啶（PI）對哺乳動物細(xì)胞DNA進(jìn)行染色的方法。PI不會進(jìn)入具有完整細(xì)胞膜或活躍代謝的細(xì)胞。相反，膜受損或代謝不活躍的細(xì)胞無法阻止PI進(jìn)入細(xì)胞。結(jié)果，非活細(xì)胞的細(xì)胞核將僅被染色。亞當(dāng)提供1-2的兩種。技術(shù)–可行性測量染色解決方案。用于總細(xì)胞計數(shù)的AccuStain Solution T由熒光染料（PI）和裂解液組成。用于非活細(xì)胞計數(shù)的AccuStain Solution N由熒光染料和PBS組成。為了測量細(xì)胞的總濃度，必須破壞所有細(xì)胞的質(zhì)膜，以用PI染色所有細(xì)胞核。通過使用AccuStain Solution T處理可以實現(xiàn)破壞和染色的過程。在第二種溶液中，活細(xì)胞保持完整并且不被染色。僅對不存活的細(xì)胞進(jìn)行染色和檢測。處理后，準(zhǔn)備好的細(xì)胞將被裝入芯片。每次測量總細(xì)胞和無活力細(xì)胞后，活力將在Adam-MC軟件中自動計算。