離心管、PCR管、PCR板的相同點(diǎn)和區(qū)別
離心管、PCR管、PCR板的相同點(diǎn)和區(qū)別
離心管、PCR管、PCR板的相同點(diǎn)和區(qū)別
1985年,美國Perkin-Elmer Cetus公司發(fā)明了具有劃時(shí)代意義的聚合酶鏈反應(yīng)(Polymerase Chain Reaction,PCR),使人們夢寐以求的體外無限擴(kuò)增核酸片段的愿望成為現(xiàn)實(shí)。PCR技術(shù)類似于DNA的天然復(fù)制過程,其特異性依賴于與靶序列兩端互補(bǔ)的寡核苷酸引物。PCR由變性—退火—延伸三個(gè)基本反應(yīng)步驟構(gòu)成。這個(gè)反應(yīng)過程在PCR反應(yīng)容器中進(jìn)行。
隨著基因擴(kuò)增儀的不斷發(fā)展,其反應(yīng)容器也經(jīng)歷了從1.5ml到0.2ml(0.25ml)的離心管逐步發(fā)展成PCR專用的薄壁的0.2ml,0.1ml的PCR管。隨著pcr擴(kuò)增反應(yīng)數(shù)量的提高,逐步形成了PCR條、PCR板高通量的基因擴(kuò)增容器。
PCR儀(基因擴(kuò)增儀)其發(fā)展主要分為以下幾個(gè)階段。1、手動(dòng)/機(jī)械手式水浴基因擴(kuò)增儀;2、全自動(dòng)風(fēng)冷或半導(dǎo)體制冷的定性基因擴(kuò)增儀;3、終點(diǎn)法半定量PCR儀;4、實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀。
1、手動(dòng)/機(jī)械手式水浴基因擴(kuò)增儀時(shí)期,主要用1.5ml的離心管作為反應(yīng)體系,此時(shí)的pcr試劑(反應(yīng)體系)有50-100ul,且需要加封石蠟油防止反應(yīng)體系揮發(fā)。且反應(yīng)管在水浴中需要一定的高度。
2、全自動(dòng)風(fēng)冷或半導(dǎo)體制冷的定性基因擴(kuò)增儀;在這個(gè)儀器時(shí)代,儀器相對較小,0.2ml的離心管被廣泛i應(yīng)用,由于儀器為半導(dǎo)體制冷或風(fēng)冷,所以需要溫度的傳遞效率高,因此,專用的薄壁的0.2ml的pcr管應(yīng)運(yùn)而生。如果此時(shí)的儀器沒有熱蓋裝置,則然需要加液體石蠟覆蓋反應(yīng)體系。
3、終點(diǎn)法半定量PCR儀器應(yīng)用時(shí)代,因?yàn)樾枰ㄟ^光度計(jì)檢測反應(yīng)結(jié)果,因此對PCR管的薄壁要求和光線通透性要求更高,pcr管的薄壁性是必要的條件。此時(shí)的pcr管主要是0.2ml的薄壁管。
4、實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀儀器時(shí)代,此時(shí)普通PCR儀,梯度PCR儀,熒光定量PCR都有了熱蓋裝置,PCR反應(yīng)體系的效率也更高,反映體系基本在30ul以下,此時(shí)0.2mlPCR管和0.1mlPCR管被廣泛應(yīng)用,有的儀器采用毛細(xì)管作為PCR反應(yīng)容器。
隨著PCR技術(shù)的廣泛應(yīng)用,96孔或者384孔的PCR反應(yīng)板是多個(gè)微量PCR管的集成,是專門為批量反應(yīng)設(shè)計(jì)的??刹鸬腜CR板是由PCR條組成。
綜上所述:離心管按照其容量分好多種,常用的有1.5ml,2ml,5ml,15或者50ml,較小的1.5ml和2ml(250ul)在PCR技術(shù)應(yīng)用早期作為PCR管使用。隨著PCR技術(shù)的發(fā)展,微量離心管逐步被專用的薄壁、透明的0.2ml的專用PCR管替代,并逐步發(fā)展成0.2mlPCR管和0.1mlPCR管以及多孔的PCR板。
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