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中級(jí)會(huì)員 | 第6年

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分子生物試劑
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如何確定分流進(jìn)樣的正確進(jìn)樣量？

時(shí)間：2024/7/2閱讀：663
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在傳統(tǒng)的分流注射過(guò)程中，我們經(jīng)?？吹竭^(guò)量的樣品被注射到熱的進(jìn)樣口中，結(jié)果給實(shí)驗(yàn)帶來(lái)一系列問(wèn)題：


01

這會(huì)導(dǎo)致無(wú)法再現(xiàn)的結(jié)果（峰面積波動(dòng)）、進(jìn)樣系統(tǒng)的磨損和污染

02

這種“反沖"的一個(gè)可能后果是鬼峰，在最壞的情況下，鬼峰會(huì)在隨后的色譜圖中長(zhǎng)時(shí)間出現(xiàn)

當(dāng)樣品反沖時(shí)，樣品蒸汽可能會(huì)進(jìn)入載氣的入口管線中。由于載氣管線處沒(méi)有加熱，樣品組分會(huì)冷凝，然后逐漸釋放并傳回進(jìn)樣口和色譜柱。這些將在色譜圖中以鬼峰呈現(xiàn)，并有可能長(zhǎng)期存在。

如果不管怎樣都出現(xiàn)這樣的問(wèn)題，則說(shuō)明您選擇了錯(cuò)誤的進(jìn)樣條件。






如何確定分流進(jìn)樣的正確進(jìn)樣量？

圖片


要確定分流進(jìn)樣的正確進(jìn)樣量，決定性因素是在快速蒸發(fā)過(guò)程中注入的樣品的汽化體積。襯管必須能夠全部容納汽化體積！




襯管容積

應(yīng)注意的是，任何內(nèi)部幾何形狀或填充物都會(huì)減少蒸氣云的可用體積。請(qǐng)記住，襯管已充滿載氣。

使用的溶劑

■  不同的溶劑，汽化體積會(huì)有很大的不同；

■  根據(jù)經(jīng)驗(yàn)：溶劑的極性越強(qiáng)，汽化體積就越大，以水為首。

進(jìn)樣口溫度和載氣壓力




以下是在 250°C、不同載氣壓力下，1 μL 的不同溶劑的汽化體積（以 μL 為單位）：




_
_
_

不同柱頭壓力下的

膨脹體積（µL）

溶劑

密度

(g/mL)

分子量

5 psig

10 psig

15 psig

庚烷

0.68

100

219

174

145

己烷

0.66

86

245

224

186

甲苯

0.87

92

303

242

201

乙酸乙酯

0.90

88

328

261

217

二氯甲烷

1.33

85

500

399

332

甲醇

0.79

32

792

629

525

水

1.00

18

1776

1418

1179







襯管的內(nèi)部容積決定了正確的進(jìn)樣體積

圖片

01

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圖片


02

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