凱氏法測定氮需要三個步驟,即消解、蒸餾、滴定。KDY-9820型凱氏定氮儀可完成自動蒸餾過程。當(dāng)被測定樣品消解*后,上機完成下列化學(xué)反應(yīng):
(NH4)2S04+2NaOH 高溫蒸氣 Na2SO4+2H2O+2NH3↑
反應(yīng)中釋放的氨氣與水蒸氣一起經(jīng)過冷凝管冷凝后,被收集在裝有硼酸吸收液(含混合指示劑)的三角瓶中。再用滴定管進行滴定,依據(jù)酸滴定量,用下列公式計算含氮量及粗蛋白含量。
含氮量:N(%)=1.401×M/ W(V-V0)
粗蛋白含量:P(%)=N(%)×C
式中:M----標(biāo)準(zhǔn)酸摩爾濃度;
W----樣品重量(克);
V0---空白樣滴定標(biāo)準(zhǔn)酸消耗量(毫升);
V----樣品滴定標(biāo)準(zhǔn)酸消耗量(毫升);
C----粗蛋白轉(zhuǎn)換系數(shù)。