上海尚寶生物科技有限公司
初級(jí)會(huì)員 | 第4年

400-611-0007

AB-PAS染色液使用說明書

時(shí)間:2022/8/8閱讀:500
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AB-PAS染色液

產(chǎn)品貨號(hào):R22021

 

產(chǎn)品規(guī)格:6×50ml/6×100ml

 

產(chǎn)品簡介:

糖原染色是病理學(xué)中常規(guī)的染色方法之一,McManus1946年最先使用高碘酸-雪夫技術(shù)顯示黏蛋白,該法常用來顯示糖原和其他多糖,該技術(shù)不僅能顯示糖原,還能顯示中性黏液性物質(zhì)和某些酸性物質(zhì)。

阿利新藍(lán)(又稱阿爾辛藍(lán)、愛先藍(lán)等)PAS技術(shù)聯(lián)合使用可鑒別同一組織切片中的中性黏蛋白和酸性黏蛋白。這種技術(shù)也常用作廣泛檢測黏蛋白的手段,切片先經(jīng)標(biāo)準(zhǔn)阿利新藍(lán)(pH=2.5)染色再使用PAS技術(shù)。阿利新藍(lán)可將唾液黏蛋白、硫黏蛋白和蛋白多糖染成藍(lán)色。PAS技術(shù)可將中性黏蛋白染成深紅或紅紫色,同時(shí)將既含中性黏蛋白又含酸性黏蛋白的組織和細(xì)胞染成深淺不同的紫色,這是由于阿利新藍(lán)與Schiff試劑結(jié)合并發(fā)生反應(yīng)。上述染色??沙霈F(xiàn)在含有中性黏蛋白和唾液黏蛋白的小腸杯狀細(xì)胞中。阿利新藍(lán)的染色原理在于是類銅鈦花青染料,這種陽離子染料與酸性基團(tuán)結(jié)合,也即阿利新藍(lán)與組織內(nèi)含有的陰離子基團(tuán)如羧基和硫酸根形成不溶性復(fù)合物。分子中帶正電荷的鹽鍵與酸性黏多糖物質(zhì)中帶負(fù)電荷的酸性基團(tuán)結(jié)合形成不溶性的復(fù)合物而呈藍(lán)色,再與PAS進(jìn)行復(fù)合染色,就能顯示三種不同黏液物質(zhì)成分。

尚寶生物 AB-PAS染色液核心成分為阿利新藍(lán)染色液和Schiff Reagent,多用于黏液物質(zhì)染色,糖原、中性黏蛋白、各種糖蛋白呈紫紅色,其余呈藍(lán)色。

 

產(chǎn)品組成:

試劑名稱

6×50ml

6×100ml

保存條件

試劑(A)阿利新藍(lán)染色液

50ml

100ml

4℃,避光

試劑(B)過碘酸溶液

50ml

100ml

4℃,避光

試劑(C)Schiff Reagent

50ml

100ml

4℃,避光

試劑(D):蘇木素染色液

50ml

100ml

室溫,避光

試劑(E):酸性分化液

50ml

100ml

室溫

試劑(F)Scott 藍(lán)化液

50ml

100ml

室溫

 

自備材料:

1. 系列乙醇

2. 蒸餾水

 

操作步驟(僅供參考):

1. 脫蠟至水,蒸餾水洗2min。

2. 入阿利新藍(lán)染色液,染色1020min。

3. 蒸餾水洗3次,每次12min。

4. 入過碘酸溶液氧化5min。

5. Schiff Reagent,浸染1020min。

6. 傾去Schiff Reagent,流水沖洗10min

7. (可選)入蘇木素染色液,染核12min。

8. 用酸性分化液分化25s,水洗。

9. Scott藍(lán)化液返藍(lán),水洗3min。

10. 逐級(jí)常規(guī)乙醇脫水。二甲苯透明,中性樹膠封固。

 

染色結(jié)果:

糖原、中性黏蛋白、各種糖蛋白            紫紅色

酸性黏蛋白(硫黏蛋白和唾液黏蛋白)         藍(lán)色

蛋白多糖和透明質(zhì)酸                      藍(lán)色

備注:含有中性黏蛋白和酸性黏蛋白的細(xì)胞或組織可染成不同程度的藍(lán)紫色至紫色。

 

注意事項(xiàng)

1. 切片脫蠟應(yīng)盡量干凈,否則影響染色效果。

2. 過碘酸氧化時(shí)間不宜過久,氧化時(shí)的溫度以1822℃最佳。

3. 阿利新藍(lán)染色液、過碘酸溶液、Schiff Reagent均應(yīng)置于4℃密閉保存,使用時(shí)避免接觸過多陽光和空氣。使用前最好提前30min取出恢復(fù)至室溫,避光暗處使用。

4. 酸性分化液 應(yīng)經(jīng)常更換新液,分化時(shí)間應(yīng)該依據(jù)切片厚薄、組織類別和酸性分化液的新舊而定,另外分化后自來水沖洗時(shí)間應(yīng)該足夠。

5. 切片在過碘酸溶液和Schiff Reagent中作用時(shí)間非常重要,該依據(jù)切片厚薄、組織類別等決定。

6. 尚寶生物 蘇木素染色液復(fù)染細(xì)胞核時(shí)應(yīng)淡染,以免影響陽性物質(zhì)AB的觀察。目的是防止胞漿或黏蛋白著色而掩蓋阿利新藍(lán)的顏色。

7. 阿利新藍(lán)-PAS聯(lián)合技術(shù)的染色順序可影響最終結(jié)果。PAS技術(shù)在阿爾辛藍(lán)染色之前時(shí),中性黏蛋白和糖原可染成紫色。與此相反,阿利新藍(lán)染色在PAS技術(shù)之前時(shí),則可將這些物質(zhì)染成預(yù)期的紫紅色。

8. 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

 

保質(zhì)期6個(gè)月有效。

 


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