DNase Ⅰ使用說明

DNase Ⅰ

產(chǎn)品貨號：T11191

產(chǎn)品規(guī)格：200U/1000U

產(chǎn)品簡介：

DNase I，即Deoxyribonuclease I，中文名稱為脫氧核糖核酸酶I，是一種可以消化單鏈或雙鏈DNA產(chǎn)生單脫氧核苷酸或單鏈或雙鏈的寡脫氧核苷酸的核酸內(nèi)切酶。DNase I水解單鏈或雙鏈DNA后的產(chǎn)物，5'端為磷酸基團，3'端為羥基。

DNase I活性依賴于鈣離子，并能被鎂離子或二價錳離子激活。鎂離子存在條件下，DNase I可隨機剪切雙鏈DNA的任意位點；二價錳離子存在條件下，DNase I可在同一位點剪切DNA雙鏈，形成平末端，或1-2個核苷酸突出的粘末端。

特點： 不含RNase(RNase free)，可以用于各種RNA樣品的處理。提供了用于DNase I失活所需的EDTA。

用途： 制備不含DNA的RNA樣品；RT-PCR反應(yīng)前RNA樣品中去除基因組DNA等可能的DNA污染；體外T7, T3, SP6等RNA Polymerases催化的RNA轉(zhuǎn)錄后去除DNA模板；DNase I footprinting研究DNA-蛋白質(zhì)相互作用；缺口平移(nick translatioin)；產(chǎn)生DNA隨機片段文庫；細胞凋亡TUNEL檢測中部分剪切基因組DNA作為陽性對照。

活性定義：37℃10分鐘內(nèi)，將能夠降解1μg pBR322質(zhì)粒DNA所需的酶量定義為1個活性單位。
活性檢測條件：40mM Tris-HCl(pH8.0)，10mM MgSO4，1mM CaCl2，1μg of pBR322 DNA。
純度：不含其它DNA內(nèi)切酶和外切酶，不含RNA酶。
酶儲存溶液：50mM Tris-acetate(pH7.5)，10mM CaCl2，50%(v/v)glycerol。
Reaction Buffer(10X)：100mM Tris-HCl(pH7.5 at 25℃)，25mM MgCl2，1mM CaCl2。

失活或抑制：加入EDTA至終濃度為2.5mM后，65℃加熱10分鐘可使DNase I失活。酚氯仿抽提也可以使DNase I失活。金屬離子螯合劑，達到毫摩爾/升濃度的鋅離子，0.1%的SDS，DTT、巰基乙醇等還原劑，50-100mM以上鹽濃度均對DNase I有顯著抑制作用。

產(chǎn)品組成：

注意事項：

1. 酶使用時宜存放在冰盒內(nèi)或冰浴上，使用完畢后宜立即放置于-20℃保存。

2. 本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。

3. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

保存：-20℃保存。