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花青素(Anthocyan)檢測試劑盒(比色法)
產(chǎn)品貨號:BA1609
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品簡介:
花青素(anthocyan,cyanidin)又稱花色素(anthocyanidin),屬黃烷衍生物,溶解于細胞液中,是植物體內(nèi)廣泛分布的花色素之一,是花色素苷(anthocyains, anthocyanin) 水解而得的有顏色的苷元。植物體內(nèi)存在花青素、葉綠素、類胡蘿卜素、類黃酮、酚類等物質(zhì)與花、果實和葉片的顏色有關(guān),而且與果實等樣品衰老過程密切相關(guān),對其加工性能、存儲、營養(yǎng)價值等都有重要影響。
尚寶生物 植物花青素檢測試劑盒(比色法)檢測原理是花青素溶于有機溶劑,以有機溶劑粗提花青素,花青素在酸性溶液中呈紅色,顏色深淺與花青素含量呈正比,于530nm有最大吸收波,可利用分光光度計測定其吸光度,進而計算出花青素的含量,方法簡單易行。因組織中花青素種類不同,所需標(biāo)準(zhǔn)品亦不同,本產(chǎn)品不含標(biāo)準(zhǔn)品,因此只能檢測花青素的相對含量。如需檢測樣品中花青素的準(zhǔn)確含量,請自備對應(yīng)種類的花青素標(biāo)準(zhǔn)品,主要用于植物組織或果實中花青素的提取以及定量檢測花青素相對含量。該試盒僅用于科研領(lǐng)域,不宜用于臨床診斷或其他用途。
產(chǎn)品組成:
產(chǎn)品名稱 | 50T | 保存條件 |
Anthocyan Assay Buffer | 500ml | 室溫 |
自備材料:
1. 實驗材料:桃子、李子、蘋果、杏等果實或其他植物組織
2. 研缽或勻漿器
3. 離心管、離心機
4. 濾紙或紗布
5. 比色杯
6. 分光光度計
操作步驟 (僅供參考) :
1. 花青素提取:
方法一:
①4℃預(yù)冷研缽或勻漿器,以及Anthocyan Assay Buffer。
②取植物組織,洗凈,擦干,稱取新鮮樣品0.25g,剪碎,置于研缽或勻漿器中。
③加入2~3ml Anthocyan Assay Buffer,充分研磨或勻漿后轉(zhuǎn)入10ml離心管,用Anthocyan Assay Buffer沖洗研缽或勻漿器并轉(zhuǎn)移至離心管,補加Anthocyan Assay Buffer至8ml。
④4℃避光靜置20min,期間搖動2~3次,然后過濾至離心管,也可用離心機8000r/min離心3min,濾液(上清液)即為花青素粗提液。
方法二:
將樣品按上述比例加入提取液中,置于32℃溫箱浸提4~8h(期間可搖動數(shù)次) ,或室溫下避光浸提24h,離心取上清即為花青素粗提液。
2. 加樣及測定:取1cm比色皿,用Anthocyan Assay Buffer做空白對照,取花青素提取液(1~2ml)用分光光度計在530nm波長處讀取吸光度值。如果花青素濃度過高,可以減少樣品用量或適當(dāng)稀釋后再進行測定,樣品的檢測最好能設(shè)置2平行孔,求平均值。
計算:
花青素單位定義:以OD值為0.1時的花青素濃度稱為一個單位(U)。計算方法如下:
組織樣品的花青素含量(U/g)=(A測定-A空白)/(0.1xW)
式中:A測定=花青素提取液在530nm的OD值
A空白=空白對照在530nm的OD值
W=樣品鮮重(g)
亦可用自備的花青素標(biāo)準(zhǔn)品做梯度稀釋 (0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、1mg/ml),用Anthocyan Assay Buffer 做空白對照,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,進而計算出樣品中花青素的含量。
組織樣品的花青素(mg/g)={C×VT }/(W×V1 )
式中:C=根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線求得的測定管花青素含量(mg/ml)
V T =花青素粗提液總體積(ml)=8
V 1 =加樣時所用花青素粗提液的體積(ml)
W=樣品鮮重(g)
液體樣品的花青素(mg/ml)=C×N/V
式中:C=根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線求得的測定管花青素含量(mg/ml)
V=加樣時所用花青素粗提液的體積(ml)
N=稀釋倍數(shù)
注意事項:
1. 為了避免花青素見光發(fā)生變化,操作時應(yīng)盡量避光,研磨或勻漿應(yīng)盡量縮短時間。
2. 取樣量、試劑用量應(yīng)根據(jù)花青素含量適當(dāng)調(diào)整。
3. Anthocyan Assay Buffer應(yīng)密閉保存,避免有效成分揮發(fā)。
4. 如果沒有分光光度計,也可以使用酶標(biāo)儀測定。
5. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
有效期:12個月有效。
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