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更新時(shí)間:2021-09-18 14:39:11瀏覽次數(shù):442次
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貨號(hào) | T11015 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
DNase Ⅰ溶液(1mg/ml) 核酸類(lèi)
產(chǎn)品貨號(hào):T11015
產(chǎn)品規(guī)格:1ml/5ml
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
脫氧核糖核酸酶Ⅰ(DNaseⅠ)是一種非特異性核酸酶切酶,大多數(shù)來(lái)源于重組E.coli菌株,含有牛胰腺 DNaseⅠ的MBP融合克隆。DNaseⅠ可用于降解單鏈或雙鏈DNA,其原理為DNaseⅠ水解磷酸二酯鍵產(chǎn)生帶有5'-磷酸基團(tuán)和3'-OH的單核苷酸或寡核苷酸。Mg 2 +或Mn 2 +都可以激活DNase I的活性,而Ca 2+濃度直接影響酶的活性。Mg 2+存在時(shí)可在雙鏈DNA的每條單鏈上隨機(jī)產(chǎn)生切口;而在Mn 2+存在下可使雙鏈DNA斷裂,使DNA片段化。
DNase Ⅰ溶液(1mg/ml) 核酸類(lèi)由DNaseⅠ、酶保護(hù)液、防腐劑等組成,濃度為1mg/ml相當(dāng)于2000U/ml, 不含RNase,用于單鏈DNA、雙鏈DNA、染色質(zhì)、RNA:DNA雜交鏈。多用于無(wú)DNA污染的RNA的制備,逆轉(zhuǎn)錄及體外轉(zhuǎn)錄等實(shí)驗(yàn)。
產(chǎn)品組成:
產(chǎn)品名稱(chēng) | 規(guī)格 | 保存條件 |
DNase Ⅰ溶液(1mg/ml) | 1ml/5ml | -20℃ |
操作步驟(僅供參考):
1. 取DNaseⅠ溶液(1mg/ml)平衡至室溫,低速離心,使液體沉至管底待用,根據(jù)不同實(shí)驗(yàn),應(yīng)加入適量的酶,以便充分消化DNA,一般1U酶可消化小于1μg的DNA。
2. 取DNaseⅠ溶液(1mg/ml)2~5μl(即 4~10U),加入待處理液(一般小于4~10μg),最后用去離子水或RNase-Free ddH2O補(bǔ)至100μl。
3. 25~37℃孵育10min。
4. 滅活條件:75℃孵育10min。
注意事項(xiàng):
1. 應(yīng)注意避免污染和反復(fù)凍融。
2. 1單位是指在 50μl 反應(yīng)體系中,37℃條件下,10min能*降解1μg pBR322DNA所需的酶量。
有效期:12個(gè)月有效。
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