臺(tái)盼藍(lán)染色液（0.4%）

產(chǎn)品貨號(hào)：T6102

產(chǎn)品規(guī)格：50ml/100ml

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

  臺(tái)盼藍(lán)(Trypan blue)又稱錐藍(lán)或錐蟲(chóng)藍(lán)等，分子式為 C34H24N6Na4O14S4，分子量為 960.81，CAS Number 72-57-1，是一種陰離子型染料。Trypan blue 不能透過(guò)活細(xì)胞正常完整的細(xì)胞膜，故活細(xì)胞不著色，即產(chǎn)生所謂 的拒染現(xiàn)象 ,而死亡細(xì)胞的細(xì)胞膜通透性增加，可使染料通過(guò)細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，使死細(xì)胞著色呈藍(lán)色，是常用的檢測(cè)細(xì)胞活率的方法。通常認(rèn)為細(xì)胞膜完整性喪失，即可認(rèn)為細(xì)胞已經(jīng)死亡，這與中性紅作用相反。因此， 借助臺(tái)盼藍(lán)染色可以非常簡(jiǎn)便、快速地區(qū)分活細(xì)胞和死細(xì)胞。臺(tái)盼藍(lán)是組織和細(xì)胞培養(yǎng)中常用的死細(xì)胞鑒定染 色方法之一。

  尚寶生物 Trypan blue stain(0.4%)常用于檢測(cè)細(xì)胞膜的完整性以及細(xì)胞是否存活。活細(xì)胞不會(huì)被染成藍(lán)色， 而死細(xì)胞會(huì)被染成淡藍(lán)色。臺(tái)盼藍(lán)可被巨噬細(xì)胞吞噬，故可用于巨噬細(xì)胞的活體染色劑。臺(tái)盼藍(lán)染色后，通過(guò)顯 微鏡下直接計(jì)數(shù)或顯微鏡下拍照后計(jì)數(shù)，就可以對(duì)細(xì)胞存活率進(jìn)行比較準(zhǔn)確的定量，0.4%為常用的濃度。

產(chǎn)品組成：

自備材料：

1. PBS

2. 細(xì)胞計(jì)數(shù)板

3. 顯微鏡

操作步驟（僅供參考）：

1. 收集細(xì)胞：

如果收集貼壁細(xì)胞，應(yīng)用胰蛋白酶-EDTA 溶液消化細(xì)胞，收集細(xì)胞。如果收集懸浮細(xì)胞，則可以直接收集 細(xì)胞。收集好的細(xì)胞在 1000～2000g 離心 1min，棄上清，用 1ml PBS 重新懸浮細(xì)胞沉淀。

2. 臺(tái)盼藍(lán)染色：

吸取 100μl 細(xì)胞懸液到 1.5ml 或 0.5ml 離心管內(nèi)，加入 100μl Trypan blue stain(0.4%) 輕輕混勻，靜置染色 3min(染色時(shí)間可適當(dāng)延長(zhǎng)，但不宜超過(guò) 10min)。

3. 細(xì)胞計(jì)數(shù)：

吸取經(jīng)過(guò)染色后的細(xì)胞，用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。通常如果要比較準(zhǔn)確地進(jìn)行定量，每個(gè)細(xì)胞樣品至少需要數(shù) 500 個(gè)細(xì)胞，數(shù)出藍(lán)色細(xì)胞和細(xì)胞總數(shù)。

細(xì)胞存活率計(jì)算公式如下：

細(xì)胞存活率＝(細(xì)胞總數(shù)－藍(lán)色細(xì)胞數(shù))/細(xì)胞總數(shù)×*

注意事項(xiàng)：

1. Trypan blue stain 對(duì)人體有輕微毒性，請(qǐng)注意小心防護(hù)。

2. 注意凋亡小體偶爾也有臺(tái)盼藍(lán)拒染現(xiàn)象。

3. 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

有效期：12 個(gè)月有效。